老年恶性肿瘤化疗患者血清促红细胞生成素、血管内皮生长因子及网织红细胞参数变化及意义

夏晶颖, 张 倩

海军军医大学第一附属医院 干部病房,上海 200081

恶性肿瘤是机体细胞过度增殖,失去正常调节而引起的疾病,被称为三大非自然死亡疾病之一[1]。化疗是目前治疗癌症的主要方法,可以有效地控制肿瘤细胞的增殖,延长患者生命。但老年患者免疫功能低下,机体重要脏器功能及储备均严重下降,化疗产生的不良反应会引起骨髓造血抑制,影响整体治疗效果[2-3]。因此,寻找能够灵敏且有效监测化疗后患者骨髓造血功能情况的指标十分重要。网织红细胞是未成熟阶段的红细胞,其在周围红细胞中的数量可用来反映机体的骨髓红系造血功能,判断是否贫血等异常情况[4]。促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是一种酸性糖蛋白,也是红细胞生成的主要调节因素[5]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是具有高度特异性的血管生成因子,低氧环境下可与受体结合,诱导内皮细胞增殖,促进新生血管形成,并增加血管的通透性[6]。本研究拟通过检测老年恶性肿瘤患者化疗前后血清中EPO、VEGF及网织红细胞参数的表达情况,探讨其对评估骨髓抑制的临床意义。报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选取自2017年5月至2022年7月于海军军医大学第一附属医院就诊的89例老年恶性肿瘤患者设为观察组,其中,男性38例,女性51例;平均年龄(68.65±5.74)岁;疾病类型:胃癌22例,肺癌27例,结肠癌8例,乳腺癌5例,淋巴瘤4例,直肠癌9例,卵巢癌5例,食管癌4例,鼻咽癌5例。纳入标准:(1)经临床和病理检查确诊为恶性肿瘤;(2)首次接受化疗;(3)年龄60～82岁;(4)无相关基因突变;(5)可提供完整临床资料。排除标准:(1)近期使用抑制骨髓造血功能的药物;(2)近期接受血清VEGF、EPO治疗;(3)患有自身免疫疾病、感染性疾病;(4)既往有骨髓抑制史;(5)有精神类疾病。另选取同期于本院进行健康体检的80例老年人设为常规组,其中,男性34例,女性46例;平均年龄(68.71±5.66)岁。两组研究对象的年龄、性别比例比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准。所有研究对象均知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集 常规组于体检当日清晨,观察组在化疗前及化疗3 d、1周、2周、3周清晨抽取空腹静脉血5 ml,放入抗凝管。将血样在室温下以3 400 r/min离心10 min,收集上清液,然后于-80℃储存,直到使用。

1.2.2 临床指标检测 采用全自动血液分析仪器检测血小板计数(platelet count,PLT)、白细胞计数(white blood cell,WBC)、网织红细胞参数等指标。网织红细胞参数包括:低荧光强度网织红细胞(low fluorescent reticulocvte,LFR)比率、中荧光强度网织红细胞(middle fluorescent reticulocyte,MFR)比率、未成熟网织红细胞指数(immature reticulocyte fraction,IRF)、网织红细胞计数(reticulocyte,RET)比率、网织红细胞计数绝对值(RET#)、网织红细胞血红蛋白含量(hemoglobin content of reticulocyte,RET-He)、高荧光强度网织红细胞(high fluorescent reticulocyte,HFR)比率。

1.2.3 血清中EPO、VEGF水平检测 采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清VEGF、EPO水平,检测步骤严格按照试剂盒说明进行,人VEGF ELISA试剂盒购自武汉菲恩生物科技有限公司(货号:EH3953),人EPO ELISA试剂盒购自上海酶研生物科技有限公司(货号:EK-H10513)。

2 结果

2.1 两组血清中EPO、VEGF及网织红细胞参数表达水平比较 观察组患者血清EPO、VEGF、RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均高于常规组,RET-He、LFR比率均低于常规组,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1、表2。

表1 各组血清中EPO、VEGF表达水平比较

表2 各组血清网织红细胞参数表达水平比较

2.2 观察组患者血清中EPO、VEGF水平与网织红细胞参数的相关性分析 Pearson法分析结果显示,观察组患者血清EPO、VEGF水平与RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均呈正相关,与RET-He、LFR比率均呈负相关(P<0.05)。见表3。

表3 观察组患者血清中EPO、VEGF水平与网织红细胞参数的相关性分析

2.3 观察组化疗前后患者血清中EPO、VEGF及网织红细胞参数表达水平比较 化疗后3 d,观察组患者的MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均开始下降,但与化疗前比较,差异均无统计学意义(P>0.05);化疗后1周,观察组患者的MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均明显下降,化疗后2周下降至最低值,化疗后3周逐渐上升,各指标与化疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的VEGF、EPO、RET-He、RET#、IRF、RET比率在化疗后3 d均呈明显下降趋势,且均在化疗后1周降至最低值,化疗后2周开始呈现上升趋势,与化疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);各指标上升趋势持续到化疗后3周,且VEGF、EPO、RET比率与化疗前比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 观察组患者化疗前后血清中各指标表达水平比较

3 讨论

随着人们生活、工作方式的变化,以及社会老龄化加重,恶性肿瘤发病率逐年上升[7-9]。化疗治疗产生的毒副作用如骨髓抑制可导致外周血细胞数量减少,增加患者感染、贫血和出血的风险,影响肿瘤的有效治疗并增加病死率[10-11]。因此,化疗后及时、准确地判断患者骨髓抑制发生情况仍是目前研究的重点。

网织红细胞是反映骨髓造血功能、鉴别贫血的重要指标[12]。近年来,随着网织红细胞检测技术的进步,其相关新参数正逐步应用于临床。在既往研究中,WBC、PLT是用于监测恶性肿瘤患者化疗后骨髓造血功能的主要指标,当二者出现下降时,骨髓造血功能已被显著抑制。宁军等[13]研究发现,网织红细胞参数IRF、RET比率在检测骨髓造血功能时表现出更高的灵敏度。王春阳等[14]研究发现,RET、RET比率、IRF、MFR比率等指标的下降与恶性肿瘤化疗患者发生骨髓抑制关系密切。本研究通过对肿瘤患者化疗前后各指标动态变化比较发现,患者化疗后3 d,MFR比率、HFR比率、LFR比率、PLT、WBC均开始下降,但与化疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05);化疗后1周下降明显,2周下降至最低值,至3周时,表达逐渐上升。RET-He、RET#、IRF、RET比率在化疗后3 d均呈明显下降趋势,且均在化疗后1周降至最低值,化疗后2周开始呈现上升趋势,直到第3周。从上述结果可以发现,网织红细胞相关参数RET-He、RET#、IRF、RET比率4个指标相较于MFR比率、HFR比率、LFR比率下降更明显,可对以上指标进行严格监测,为临床早期评估骨髓造血功能提供参考依据。

EPO可以作用于骨髓中的红系造血祖细胞,促使造血红细胞的增殖及分化[15]。VEGF是机体重要的细胞因子,其与血管生成等关系密切[16]。此外,VEGF还是影响骨髓微环境的关键细胞因子之一。骨髓微环境又被称为造血干细胞的“土壤”[17]。有研究报道,VEGF在再生障碍性贫血患者中呈低表达[18]。因此,EPO、VEGF二者均有可能与化疗后骨髓抑制的发生有关。本研究结果发现,老年恶性肿瘤患者血清中EPO、VEGF水平明显高于健康人群,通过与网织红细胞参数相关性研究结果发现,EPO、VEGF与RET#、MFR比率、HFR比率、RET比率、IRF均呈正相关,与RET-He、LFR比率均呈负相关,提示EPO、VEGF可能会影响网织红细胞相关参数的变化。通过对患者化疗前后血清中VEGF、EPO的动态监测发现,VEGF、EPO在化疗后3 d均呈明显下降趋势,且在化疗后1周下降至最低值,分析其原因,VEGF、EPO与骨髓造血均存在密切联系,VEGF、EPO水平异常降低,会造成血管通透性降低,造血环境逐渐恶化,导致造血功能障碍趋于严重,因此,推测二者与骨髓抑制程度也存在一定联系。化疗后2周开始呈现上升趋势,直到3周肿瘤患者接受化疗后,VEGF、EPO水平进一步增高,其原因可能是化疗导致骨髓造血产生抑制,引起红系祖细胞对VEGF、EPO的利用度减少。以上结果提示,相对于临床常用的血清指标WBC、PLT,EPO、VEGF具有更高的敏感度,在患者化疗后3 d即可检测到下降趋势。这也提示,EPO、VEGF也可作为诊断老年恶性肿瘤化疗患者化疗后发生骨髓抑制的生物学标志物,可为患者的临床化疗提供参考依据。

综上所述,EPO、VEGF及网织红细胞参数指标可用来监测老年恶性肿瘤患者化疗后骨髓抑制的发生。其中,VEGF、EPO、RET-He、RET#、IRF、RET比率在化疗后检测骨髓抑制发生的敏感度较高,对老年恶性肿瘤的临床治疗具有重要指导意义。但本研究样本纳入量较少,将在今后的研究中进行完善验证。