阿尔茨海默病患者脑脊液中胰岛素、β-淀粉样蛋白水平与疾病严重程度的关系

张 璐 方 宇 魏建科 连亚军 陈 媛 罗志毅

(郑州大学第一附属医院神经内科，河南 郑州 450052)

研究表明，胰岛素水平及其敏感性异常与阿尔茨海默病(AD)的发病机制及临床表现相关，胰岛素在中枢神经系统的代谢、调节作用与AD发病的关系日益受到重视〔1〕。AD病理特征以老年斑和神经原纤维缠结为主，β淀粉样蛋白(Aβ)中的Aβ40和Aβ42是构成老年斑重要的组成部分。近来研究表明，Aβ42沉积早且为致病核心，具有很强的神经毒性，容易聚集、凝集成斑块〔2〕。为进一步明确AD患者脑内是否存在胰岛素及Aβ异常，本文观察了AD患者脑脊液中胰岛素、Aβ40和Aβ42水平变化是否与AD疾病程度相关，为阐明AD的发病机制提供新思路。

1 资料与方法

1.1 对象 2005年1月至2006年6月我院收治的年龄≥60岁的散发性 AD患者68例，男 38例，女30例，平均年龄(72.37±5.53)岁。应用简易精神状态检查量表(MMSE)初筛存在痴呆，按美国精神障碍诊断与统计手册第3版修订版(DSM-Ⅲ-R)和美国国立神经病语言机能紊乱和卒中研究所及AD和相关疾病协会(NINCDS-ADRDA)标准诊断。应用Hachinski缺血指数评分与血管性痴呆进行鉴别，同时排除其他老年期痴呆。将AD按MMSE评分分为两组，MMSE评分≥16分为轻度组，MMSE评分＜16分为中重度组。对照组35例，男21例，女14例，平均年龄(71.14±5.86)岁，全部为门诊体检健康老年人，经MMSE检测排除痴呆及轻度认知障碍。

1.2 方法 受试者入组后施行腰椎穿刺术，采脑脊液样本3 ml于无菌的聚丙烯酰胺试管中，置于冰上，4℃ 3 500 r/min离心15 min，分装冻存于－80℃冰箱待测，避免反复冻融，从采集标本到存入冰箱于2 h内完成。胰岛素采用瑞典Mercodia公司的ELISA试剂盒(批内变异系数为3.4%，总变异系数为4.8%)。用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定样本中Aβ42、Aβ40的浓度，试剂盒为美国 Biosource公司生产的 Aβ42、Aβ40。用DENLEY DRAGON Wellscan MK 3全自动酶标仪(Thermo公司，芬兰)于450 nm读取吸光度值，Ascent software forMultiskan分析软件直接读取样本浓度。

1.3 统计学分析 使用SPSS13.0统计软件，计量资料以x±s表示，多均数间比较采用方差分析，两两比较用t检验，应用Logistic回归分析判断预测AD严重程度的相关因素。

2 结果

2.1 两组患者脑脊液中胰岛素、Aβ水平的变化 MMSE评分AD组明显低于对照组(P＜0.05)。AD组脑脊液中胰岛素低于对照组(P＜0.05)，Aβ40与对照组相比无显著性差异(P＞0.05)，Aβ42较对照组降低(P ＜0.01)。见表1。

表1 两组患者脑脊液中胰岛素、Aβ水平比较(x±s)

2.2 不同程度痴呆患者脑脊液中胰岛素、Aβ42水平的变化三组患者中，轻度AD组脑脊液胰岛素水平与对照组比较无显著性差异(P＞0.05)，中重度AD组胰岛素较对照组降低(P＜0.05)。轻度AD组、中重度AD组Aβ42均较对照组降低(均P＜0.01)。见表2。

表2 AD组不同程度痴呆患者脑脊液中胰岛素、Aβ水平比较(x±s)

2.3 AD患者脑脊液中胰岛素、Aβ42与MMSE评分的关系AD组胰岛素水平与MMSE评分间呈正相关关系(r=0.73，P＜0.01)，Aβ42水平与MMSE评分间呈正相关关系(r=0.85，P＜0.01)。MMSE评分的高低表示患者痴呆的严重程度，因此表明脑脊液中的胰岛素、Aβ42与AD患者痴呆的严重程度有密切关系，痴呆越严重，脑脊液中胰岛素、Aβ42含量可能越低。

3 讨论

AD发病机制是目前研究热点，能量代谢障碍是AD的可能病因之一。近年研究发现，大脑齿状回与海马等部位存有大量的胰岛素受体，而这些区域在记忆和认知功能中起重要作用，AD首先就在这些区域出现严重病理改变;葡萄糖是大脑的主要能源，而胰岛素是调节血糖的主要激素，胰岛素在增龄老化和AD的脑部糖代谢中起到重要作用，因此AD与胰岛素关系越来越密切〔3〕。本研究显示，随AD病情加重，脑脊液中胰岛素水平降低，轻度组、中重度组与对照组相比有显著性差异，表明AD患者血浆中胰岛素存在异常，与AD严重程度相关。可能机制是脑组织对胰岛素摄取出现异常，降低了从外周摄取胰岛素的能力，从而脑脊液中胰岛素出现降低〔4〕。

Aβ是AD的病理改变之一，前淀粉样蛋白(amyloid precursor protein，APP)是Aβ的前体，APP基因转录翻译后的产物经过淀粉样肽源性途径使APP产生Aβ，Aβ40和Aβ42就来源于此。正常时，Aβ的产生和降解保持平衡;当平衡被打破，则会导致Aβ的沉积。多种研究对AD患者的Aβ40和Aβ42进行了测定，但报道不完全一致〔5～7〕。本文将患者按痴呆轻重分组后，与对照组对比，AD患者脑脊液中Aβ40浓度与对照组相比无统计学差异;脑脊液Aβ42浓度较正常对照组降低，提示AD早期即发生Aβ42下降，中晚期下降更明显。

总之，越来越多的证据表明，AD不能再认为是单一信号失调疾病。本文也证明，AD既存有胰岛素的代谢紊乱，也存有Aβ的代谢异常。

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