PCI术后再狭窄患者的survivin水平及红花黄色素的干预作用

孙玉芹 韩海玲 宋文刚 朱玉红 吕冬燕 朱艳彬 何海涛 姜 欣

(吉林大学，吉林 长春 130021)

经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后再狭窄与survivin的关系，目前临床上尚无相关的报道，仅有一些体外细胞培养及动脉内膜损伤动物模型发现增生的血管内膜和培养增殖的SMC中可见survivin表达增高。随着PCI在冠心病治疗中的迅速发展，术后再狭窄的出现成为目前急待解决的问题。本研究旨在观察支架置入术后红花黄色素对血浆survivin水平的影响，为再狭窄的防治提供临床依据。

1 对象与方法

1.1 研究对象 2008年10月至2009年12月收集本院60例PCI术后6个月内复查冠状动脉造影的患者，根据冠状动脉造影结果分为再狭窄组(治疗处血管腔径狭窄≥50%)〔1〕、无再狭窄组(治疗处血管腔径狭窄＜50%)。以同期行冠状动脉造影检查(未行PCI术)完全正常(所有血管内膜光滑)的患者30例作为对照组。20例同期在本院内科择期行PCI术的患者随机分为未用药组和用药组，用药组平均年龄(59.45±9.34)岁;术后当天起应用红花黄色素(辉瑞制药有限公司产品)40 mg/d，共7 d。未用药组平均年龄(61.7±10.8)岁，未应用红花黄色素治疗。两组其余治疗方案相同。所有患者签署知情同意书。

1.2 标本采集 所有初查及复查冠状动脉造影的患者均空腹8 h，在导管室行冠状动脉造影前抽取静脉血。行择期PCI术的患者术前在导管室抽血，术后 6、24 h和3、7 d在病房按Seldinger法穿刺右股静脉，回抽1 ml静脉血弃去，再抽取2 ml静脉血置于10 ml乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝管，3 h内以3 000 r/min速度离心 5 min〔2〕，取血浆分装于 1.5 ml离心管，置－70℃低温保存待检。

1.3 血浆survivin水平的检测 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆survivin水平。survivin试剂盒购自R＆D公司(博士德公司代理)。检测步骤严格按试剂盒内所附说明书及酶标仪操作指南进行。

1.4 统计学处理 应用SPSS11.0统计学软件。数据以x±s表示，多组间均数比较首先采用One-Way方差分析，然后采用SNK进行组间的两两比较。两组间比较采用t检验。

2 结果

2.1 各组间一般资料比较 再狭窄组与对照组间年龄、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白(Apo)A的差异均有统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)。见表1。

2.2 各组血浆survivin水平比较 PCI术后再狭窄组的血浆survivin水平显著高于无再狭窄组和对照组(均P＜0.01)，无再狭窄组的survivin水平又显著高于对照组(P＜0.01)。见表1。2.3 PCI术后短期应用阿托伐他汀对血浆survivin的影响 未用药组的术前及术后6 h、24 h、3 d、7 d的血浆survivin水平分别为(289.4±22.4)、(609.7±69.6)、(1 157.8 ±222.6)、(1 263.1±179.8)和(1 142.7±179.1)pg/L;用药组分别为(299.9±24.7)、(684.4 ±72.3)、(1 050.4 ±139.5)、(903.6 ±120.7)和(498.3±100.6)pg/L。PCI术后患者血浆survivin水平于术后6 h急剧增高，未用药组在术后3 d达最高峰，术后7 d仍处于高水平;用药组于术后24 h达最高峰。两组术后各时间点的血浆survivin水平均显著高于术前(均P＜0.01)。用药组在术后3、7 d的血浆survivin水平均显著低于未用药组，差异有统计学意义(均P＜0.01)。

表1 各组间一般资料及survivin水平比较(x±s)

3 讨论

survivin是一个新近克隆的凋亡抑制基因，属于IAP家族中的最新成员，是迄今发现的最强的凋亡抑制因子。人类survivin基因位于染色体17q25上，全长14.7 kb，是家族中一个结构独特的新成员，于1997年由耶鲁大学的Altieri等用效应细胞蛋白酶受体在人类基因组库的杂交筛选中首先分离出来，具有强大的抗细胞凋亡功能〔3〕。

survivin的表达具有细胞周期依赖性，只在细胞周期的G2/M期表达，在有丝分裂开始时，survivin与纺锤体的微管蛋白特异性结合，维持有丝分裂正常进行。干扰survivin与微管蛋白的结合反应可致survivin抗凋亡活性的丧失。还有研究发现survivin过度表达会导致细胞加快向S期转换，抑制G1期静止，从而促进细胞增殖〔4〕。资料表明survivin在人类很多细胞中表达，并与细胞的增殖、凋亡、血管生成、预后和耐药性的产生密切相关，在其他增生性疾病如动脉粥样硬化、PCI术后再狭窄等，survivin也可能具有潜在价值。Shin〔4〕、Simosa〔5〕、Wang〔6〕等发现:①兔动脉球囊损伤模型中，survivin在内膜增殖的VSMC中表达增高;②在用血清或血小板衍生生长因子(PDGF)AB亚型干预培养的VSMC中，有survivin的表达;③腺病毒携带的survivin基因变异体(AdT34A)转染可抵抗PDGF对VSMC的保护作用，但不影响有丝分裂，同时抑制股动脉损伤模型的新生内膜形成和诱导VSMC凋亡。提示survivin是急性血管损伤后VSMC增殖和凋亡的关键调节剂，抑制survivin的表达可以诱导VSMC凋亡，抑制血管损伤后内膜的增殖。

本研究显示，PCI术后再狭窄组的血浆survivin水平显著高于无再狭窄组和对照组，无再狭窄组的survivin水平又显著高于对照组。表明survivin因子表达增高与患者体内存在细胞过度增殖及凋亡不足相关。因此，survivin可能成为PCI术后再狭窄的预测指标。

本研究还显示，PCI术后6 h的血浆survivin水平即明显增高，未用药组在术后3 d达最高峰，7 d仍在高水平;用药组在术后24 h达最高峰，术后3 d、7 d的survivin水平显著低于未用药组。提示红花黄色素可显著降低PCI术后患者的血浆survivin水平，与体外VSMC培养的结果一致〔7〕。PCI术后短期内血浆survivin水平显著增高，其原因可能为PCI引起血管内膜撕裂导致内皮功能损伤和紊乱、血小板激活、血栓形成和急性炎性反应等。PCI是一种血管内膜损伤过程。因此，红花黄色素明显降低血浆survivin水平，这可能是红花黄色素类药物防治血管损伤后内膜增殖的机制之一。

综上所述，PCI术后再狭窄患者的血浆survivin水平显著增高，可能提示再狭窄患者体内存在细胞增殖过度、凋亡不足。血浆survivin水平持续增高可能成为预测PCI术后再狭窄的有用指标。红花黄色素治疗可使血浆survivin水平显著降低，可能是红花黄色素类药物防治血管损伤后内膜增殖的机制之一，值得进一步研究。

1 胡春燕，何 奔，孙宝贵，等.冠状动脉支架内再狭窄的危险因素分析〔J〕. 上海医学，2006;29:123.

2 韩雅玲，刘海伟，张振刚，等.冠状动脉支架内再狭窄临床相关因素分析〔J〕.中国实用内科杂志，2002;22:209-11.

3 Temme A，Rieger M，Reber F，et al.Localization，dynamics，and function of survivin revealed by expression of functional survivin fusion proteins in the living cell〔J〕.Mol Biol Cell，2003;14(1):78-92.

4 Shin S，Sung BJ，Cho YS，et al.Anti-apoptotic protein human survivin is a direct inhibitor of caspase-3 and 7〔J〕.Biochemistry，2001;40:1117-23.

5 Simosa HF，Wang G，Sui X，et al.Survivin expression is up-regulated in vascular injury and identifies a distinct cellularphenotype〔J〕.JVasc Surg，2005;41:682-90.

6 Wang GJ，Sui XX，Simosa HF，et al.Regulation of veingraft hyperplasia by survivin，an inhibitor of apoptosisprotein〔J〕.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2005;25:2081-7.

7 Blanco-Colio LM，Villa A，Ortego M，et al.3-Hydroxy-3-met-hylglutaryl coenzyme A reductase inhibitors，atorvastatin and simvastatin，induce apoptosis of vascular smooth muscle cells by downregulation of Bcl-2 expression and Rho A prenylation〔J〕.Atherosclerosis，2002;161:17-26.