丹参川芎嗪腹腔灌洗对重症急性胰腺炎大鼠血液流变学的影响

杨 军，顾元龙，钱 毅，李建平

丹参川芎嗪腹腔灌洗对重症急性胰腺炎大鼠血液流变学的影响

杨 军，顾元龙，钱 毅，李建平

目的：探讨丹参川芎嗪注射液持续腹腔灌洗对重症急性胰腺炎大鼠血流流变学的影响。方法：SD雄性大鼠120只，随机分为重症急性胰腺炎组(SAP组)、丹参川芎嗪治疗组(T组)和生理盐水治疗组(N组)。模型成功后，SAP组不做处理；T组和N组置腹腔冲洗管，分别灌洗丹参川芎嗪、生理盐水；各组于术后1 h、2 h、6 h、12 h经右侧颈总动脉放血6 mL，肝素抗凝后检测血液流变学指标。结果：T组全血黏度、毛细管血浆黏度、红细胞压积均明显低于SAP组及N组(P＜0.05)，而红细胞变形能力则明显增强(P＜0.05)。结论：丹参川芎嗪注射液持续腹腔灌洗对急性重症胰腺炎大鼠血流变学具有较好的影响。

丹参川芎嗪；症急性胰腺炎；腹腔灌洗；血液流变学；大鼠

1 材料与方法

1.1 动物及分组 实验动物均为10～12周龄的雄性SD大鼠，体质量约250～300 g，SPF级。由江苏省血吸虫病研究所实验动物中心提供。按照随机对照原则，分为重症急性胰腺炎组(SAP组)、丹参川芎嗪治疗组(T组)和生理盐水治疗组(N组)。每组分别观测4个时间点（术后1 h、3 h、6 h、12 h），每个时间点10只。SAP组只做SAP造模后观测；T组造模后置管，行丹参川芎嗪注射液10 mL溶于生理盐水250 mL缓慢腹腔灌洗（维持12 h）；N组造模后置管，生理盐水250 mL缓慢腹腔灌洗（维持12 h）。

1.2 药品及仪器 丹参川芎嗪注射液（贵州拜特制药有限公司，批号：国药准字H52020959）；5%牛磺胆酸钠（Sigma公司）；盐酸氯胺酮注射液（江苏恒瑞医药股份公司，批号：国药准字H32022820）；PE10聚乙烯导管（上海瑾瑜商贸有限公司）；全自动血流变仪（普利生LBY-N6compact，生产日期：2009-02-13）。1.3 SAP模型建立 SD大鼠术前禁食12 h，不禁水。氯胺酮(25 mg/kg)腹腔注射麻醉，沿腹正中线进腹。沿十二指肠找到胆管，用动脉夹在近肝门处夹闭胆总管，另一动脉夹夹闭胰胆管远端入十二指肠处，在胰胆管的近端用26号静脉留置针逆行穿刺胰胆管，以0.2 mL/min的速度缓慢注入5%牛磺胆酸钠(1 mL/kg)。拔针后压迫2 min，以免药液流出。推注后观察5 min，见胰腺组织充血水肿，被膜下散在出血，制模成功。

1.4 腹腔灌洗模型建立 麻醉后制模前，利用常规一次性无菌输液器自制腹腔冲洗管。将前端输液软管修剪（保留末端衔接处，便于连接后端输液管），置入大鼠左上方胰腺附近，作为输入管。再用输液管剪侧孔、固定做成双套管，置入右下腹作为引流管，外接引流袋。

1.5 动脉置管 麻醉后制模前，经右侧颈内动脉切开插入一根PE10聚乙烯导管，作为留取标本管。

1.6 血液流变学测定 各时间点取血6 mL，肝素抗凝，检测全血黏度、毛细管血浆黏度、红细胞变形指数、红细胞压积等血液流变学指标。

1.7 统计方法 利用SAS V8统计软件分析，实验数据以均数±标准差(±s)表示，使用t检验进行统计分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 全血黏度及血浆黏度 治疗前各组血黏度差异无显著性；治疗后SAP组的全血黏度在各种切变率（低L、中M、高H）均高于N、T组，SAP组全血黏度在各治疗时间点（1 h、3 h、6 h、12 h）无明显差异，N组及T组后血黏度呈不同程度降低，T组治疗后降低更明显，显著低于SAP及N组 (P＜0.05)。见图1。SAP组毛细管血浆黏度显著高于N、T组，N组及T组后黏度呈不同程度降低，T组治疗后降低更明显，显著低于SAP及N组 (P＜0.05)。见图2。

2.2 红细胞压积 SAP组随时间延长（1 h、3 h、6 h、12 h四个时间点）红细胞压积明显升高，而N、T组呈下降趋势。治疗后1 h时，3者无明显差异（P＞0.05），治疗后3 h、6 h、12 h时，N组、T组与SAP组有显著差异（P＜0.05）；治疗后12 h时，T组显著低于SAP组（P＜0.01）及N组 (P＜0.05)。见图3。

2.3 红细胞变形性能力的变化 随治疗时间延长，T组红细胞变形指数均高于N组和SAP组(P＜0.05)。见图4。

图1 全血黏度变化

图3 红细胞压积变化

图2 毛细血管黏度

图4 红细胞变形指数

3 讨论

腹部疼痛是急性胰腺炎主要临床症状，血淀粉酶、脂肪酶升高是胰腺炎的诊断指标之一[1]。80%的病例为轻症胰腺炎，药物治疗可完全康复；其他（20%）患者可并发局部和/或系统并发症，进展为急性重症胰腺炎（SAP）。尽管目前对急性胰腺炎的治疗已规范，并形成诊治指南，然而SAP的病情凶险，病死率高达30%～40%，多并发于败血症、全身炎症反应综合症、多器官功能衰竭[2]。

对于急性胰腺炎发病机理，目前仍有争议。大多数研究者认为，造成急性胰腺炎是由胰腺腺泡细胞内胰蛋白酶的激活，导致腺体自身的消化和局部炎症，进一步发展可出现胰腺坏死感染，并发败血症、SIRS、急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合症、MODS等全身性反应[3]。微循环障碍既是SAP的病因，又是重要的病理变化。SAP时微循环障碍已不仅局限于胰腺组织本身，而且已经累及全身各个器官，并可以诱发多器官功能不全或衰竭[10-11]。AP时胰腺微血管运动失调，血管收缩(失血)与血管扩张(再灌注再氧化)参与胰腺炎的发病。因此，缺血再灌注损伤在胰腺微循环障碍中的作用已倍受关注。从机体整体反应角度考虑，SAP时可相应引起机体血液系统变化，如血液动力学、流变学、微循环及新生血管形成等。许多研究认为，SAP时机体血容量下降，血液的粘滞性增加，血液流动性降低，致机体血循环瘀滞，以致胰腺微循环障碍，胰腺血液灌注量减少，使组织细胞缺血、缺氧，胰腺的坏死程度进行性加重。

许多中药已用于SAP的临床治疗，其中包括大黄、大承气汤、清肺承气颗粒、丹参、丹参川芎嗪等，并取得了较好的疗效。前三者主要通里攻下，降低炎症、增强免疫反应，改善肠道功能；后二者主要通过活血化瘀，改善胰腺微循环。相关研究报道，由于传统血管系统治疗的药物如丹参、丹参川芎嗪，可通过活血化瘀，纠正血流浓、粘、聚、凝的病理状态，改变其异常的血流动力学、血液流变性，增加胰腺血流量，改善胰腺微循环，保护血管内皮细胞，减少内皮细胞合成及促进新生血管形成等作用，起到保护胰腺组织，促进胰腺功能恢复的作用[4-5]。

目前对于SAP的治疗包括非手术治疗与手术治疗结合，或单独应用。手术治疗主要应用于SAP伴有胰腺及或周围组织坏死感染情况，假性囊肿和脓肿，腹腔大量渗液伴腹腔间隔室综合征的患者，方法包括进清创术和经皮穿刺、腹腔镜、内镜置管灌洗引流术等[6-7]。尽管有Meta分析认为，腹腔灌洗引流术有增加感染的风险，然而，也有一定数量的研究认为，合适时机的腹腔灌洗引流可起到有效的治疗作用[8-9]。其灌洗液包括抗生素、生理盐水、干扰素及蛋白酶抑制剂等。由于目前暂无丹参川芎嗪腹腔灌洗相关报道，本研究将从胰腺血液流变学角度观察了其腹腔灌洗治疗效果。

研究全血在各切变率下的表现黏度称为宏观流变学，而研究血液有形成分的流变学特性，如红细胞的变形、聚集、表面电荷等，称为血细胞流变学。血液黏度是诊断各种病理过程发展的一个重要指标。同时，通过对血液流变性的检测，对某些疾病的发生、发展、转归以及预后提出了可靠的依据。红细胞压积是影响血液黏度的重要因素，血液黏度随红细胞压积的增加，而迅速增高，反之则降低。红细胞刚性指数越大，表明红细胞变性性越小，是高切变率下，血液黏度高的原因之一。本研究发现，丹参川芎嗪丹参川芎嗪治疗组(T组)观察大鼠的全血黏度、毛细管血浆黏度、红细胞压积均明显低于SAP组及N组，而红细胞变形能力则明显增强。

综上所述，研究表明丹参川芎嗪注射液持续腹腔灌洗可起到纠正血流浓、粘、聚、凝的病理状态，改变其异常的血流动力学、血液流变性，增加胰腺血流量，改善胰腺微循环作用，对急性重症胰腺炎可能具有较好的治疗效果。

[1]Frossard JL，Steer ML，Pastor CM.Acute pancreatitis[J].Lancet，2008，371(9607)：143-152.

[2]Lund H，Tonnesen H，Tonnesen MH，et al.Long-term recurrence and death rates after acute pancreatitis[J].Scand J Gastroenterol，2006，41(2)：234-238.

[3]Frossard JL，Hadengue A.Acute pancreatitis：new physiopatholo⁃logical concepts[J].Gastro Clin Biol，2001，25(21)：164-176.

[4]Dasgupta A，Szelei-Stevens KA.Neutralization of Free Digox⁃in-like Immunoreactive Components of Oriental Medicines Dan Shen and Lu-Shen-Wan by the Fab Fragment of Antidigoxin Anti⁃body(Digibind)[J].Am J Clin Pathol，2004，121(2)：276-281.

[5]Wahed A，Dasgupta A.Positive and Negative In Vitro Interference of Chinese Medicine Dan Shen in Serum Digoxin Measurement[J].Am J Clin Pathol，2001，116(4)：403-408.

[6]Pavlidis TE，Pavlidis ET，Sakantamis A K.The role of laparoendo⁃scopic surgery in acute pancreatitis[J].Surg Endosc ，2011，25(3)：2417-2419.

[7]Dong Z，Petrov MS，Xu J，et al.Peritoneal Lavage for Severe Acute Pancreatitis：A Systematic Review of Randomised Trials[J].World J Surg，2010，34(9)：2103-2108.

[8]Souza LJ，Coelho AM，Sampietre SN，et al.Anti-Inflammatory Ef⁃fects of Peritoneal Lavage in Acute Pancreatitis[J].Pancreas，2010，39(8)：1180-1184.

[9]Yang C，Guanghua F，Wei Z，et al.Combination of hemofiltration and peritoneal dialysis in the treatment of severe acute pancreatitis[J].Pancreas,2010,39(1)：16-19.

[10]Vollmar B，Menger MD.Microcirculatory dysfunction in acute pan⁃creatitis.A new concept of pathogenesis involving vasomotion-asso⁃ciated arteriolar constriction and dilation[J].Pancreatology，2003，3(3)：181-190.

[11]Foitzik T，Eibl G，Hotz B，et al.Persistent multiple organ micro⁃circulatory disorders in severe acute pancreatitis：experimental findings and clinical implications[J].Dig Dis Sci，2002，47(1);130-138.

Effects of Continuous Peritoneal Lavage with Salviae Miltiorrhizae and Ligustrazine Hydrochloride on Hemorheology in Rats with Severe Acute Pancreatitis

YANG Jun,GU Yuan-long,QIAN Yi,et al.Depart⁃ment of Hepatobiliary Surgery,The Third Hospital of Wuxi,Wuxi(214000),China

ObjectiveTo investigate the effect of continuous peritoneal lavage with salviae miltiorrhizae and ligustrazine hydrochloride on hemorheology in rats with severe acute pancreatitis.Methods120 Male SD rats were randomly divided into 3 groups：severe acute pancreatitis(SAP group),salviae miltiorrhizae and ligustra⁃zine hydrochloride injection treated group(T group)and saline control group(N group).SAP was produced by bi⁃lopancreatic injection of sodium taurocholate(5%,1 mL/kg body weight).peritoneal washing tube were shoved in T group and N group,separately washed with alviae miltiorrhizae and igustrazine hydrochloride injection or sa⁃line.Each group Obtained 6 mL blood through the right common carotid artery at 1 h、3 h、6 h and 12 h.Then the blood rheology were detected.ResultsWhole blood viscosity,capillary plasma viscosity and hematocrit of Tgroup were significantly lower than the SAP group and N group(P＜0.05),while the red blood cell deformabili⁃ty was significantly increased(P＜0.05).ConclusionContinuous peritoneal lavage with salviae miltiorrhizae and ligustrazine hydrochloride injection for the treatment of severe acute pancreatitis has good clinical value．

Miltiorrhizae and ligustrazine hydrochloride;peritoneal lavage;severe acute pancreatitis;hemorheology;rats丹参川芎嗪的主要成分之一是丹参素和盐酸川芎嗪，有抗血小板聚集，扩张冠状动脉，降低血液黏度，加速红细胞的流速，改善微循环，抗心肌缺血和心肌梗死的作用。在重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）治疗中对于其腹腔灌洗治疗效果及机制尚未清楚。本文将通过大鼠SAP模型观察血流变学变化，研究丹参川芎嗪腹腔持续灌洗对SAP的治疗效果。

Q95-33；R657.5+1

A

1007-6948(2013)02-0153-04

10.3969/j.issn.1007-6948.2013.02.017

江苏省无锡市第三人民医院肝胆外科（无锡 214000）

李建平,E-Mail：wxsyljp@163.com

（收稿：2012-10-20 修回：2012-12-26）

（责任编辑 赵连根）