百草枯液相色谱分析方法的探讨

刘育清 顾 辉 方国斌 周 扬 刘全科

（湖北省农药检定管理所 武汉 430070）

1 前言

百草枯（英文名paraquat）属灭生性除草剂,我省沙隆达股份有限公司和仙隆化工股份有限公司是该产品母药和水剂出口的定点生产企业。该产品极性较强,极易溶于水,几乎不溶于大多数有机溶剂，在中性和酸性介质中稳定，在碱性介质中迅速水解，其水溶液在紫外光照射下发生光分解。虽然现有国标中已有百草枯的高效液相色谱(HPLC)的定性定量分析方法，但在实际操作中存在使用试剂昂贵、不易购买且色谱峰存在拖尾现象等问题，我们通过多次试验用KH2PO4缓冲溶液（pH=1.9）作为流动相，采用耐水性强的C18反相柱，在保留值的重现、柱效和色谱峰的对称性各方面都得到较好的效果。该方法线性关系好，准确度高，结果精密度好，操作简便易行，节约分析成本，适于企业的生产质量控制。

2 实验部分

2.1 仪器与试剂

Waters515/996PDA高效液相色谱仪，带化学工作站；

百草枯标样：已知百草枯二氯盐的质量分数99.2%。使用前于 105℃烘 2h。（农业部农药检定所提供）；

甲醇：色谱纯；

磷酸二氢钾：分析纯。

2.2 色谱操作条件

色谱柱：AQ C18，粒径5 m，250mm×4.6mm（id）；

流动相：0.74g磷酸二氢钾用840mL水溶解，再加160mL甲醇，混匀，用磷酸调至pH1.9，并经0.45 m的滤膜过滤；

流速：1.0mL/min；

检测波长290nm；

进样量：10uL；

保留时间：百草枯约2.6min。

2.3 测定步操

标样溶液的配制：称取百草枯二氯盐标样0.06g（精确至0.0002g）于50mL容量瓶中，用流动相溶解稀释至刻度，摇匀备用。

试样溶液的配制：称取约含百草枯阳离子0.04g的试样（精确至0.0002g）于50mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。用孔径0.45 m的有机相针式滤器过滤备用。

测定：在上述色谱条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，待相邻两针百草枯阳离子的峰面积响应值变化<1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样测定。典型液相色谱图如下：

2.4 计算

将测得的两针试样溶液与试样前后两针标样溶液中百草枯阳离子的峰面积分别进行平均，试样中，有效成分百草枯阳离子的质量分数x（%）按下式计算：

3 结果与讨论

3.1 流动相的选择

采用国标的分析方法，调整流动相中庚磺酸钠的用量，色谱峰拖尾现象有一定的改善。但为了更好的优化色谱峰，结合我们工作实际，我们尝试用磷酸二氢钾缓冲溶液做流动相进行测定，使用不同用量的磷酸二氢钾与调整不同的pH的流动相进样试验后，通过峰型比较，发现用0.74g磷酸二氢钾加840ml水溶解，再加160ml甲醇，用磷酸调pH=1.9的缓冲溶液做流动相，效果最好。

3.2 分析方法的线性相关性测定（表1）

表1 分析方法的线性相关性试验数据

称取百草枯二氯盐标样0.2g（精确至0.0002g）于100ml容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。用移液管分别移取标准溶液5.00ml、10.00ml、15.00ml、20.00ml、25.00ml于 5 个 25ml容量瓶中，分别用流动相稀释至刻度，配成5种不同浓度的溶液。按前述规定的色谱条件测定，以质量浓度为横坐标，以其峰面积为纵坐标作图。其线性方程为：Y=1290.9X+7491.9，r=0.9998。

3.3 分析方法精密度的测定（表2）

表2 分析方法的精密度试验数据

在上述色谱条件下，对同一试样进行5次平行测定。检测结果经统计，该方法的标准偏差、变异系数分别为0.069和0.23%。

3.4 分析方法准确度的测定（表3）

表3 分析方法的准确度试验数据

称取已知质量分数的试样5份，加入一定量的标样，测定其回收率，本方法测定百草枯的回收率为98.91%～100.87%。

3.5 采用国标分析测定与本方法测定结果的比较（表 4）

表4 分析方法的测定结果比较

对同一百草枯母液试样，分别采用国标方法和本方法进行分析测定，测定结果表明，本方法的测定结果与采用国标测定的结果一致。

4 结论

试验结果表明，该方法具有分离效果好，准确度与精密度高，线性范围较宽，操作简便、分析成本低等特点，符合定量要求，适于企业的生产质量控制。