ER、PR和HER2免疫组化检测在乳腺癌穿刺活检中的应用

潘超　夏想厚

1.浙江省肿瘤医院病理科，浙江杭州310022；2.浙江省肿瘤医院乳腺科，浙江杭州310022

ER、PR和HER2免疫组化检测在乳腺癌穿刺活检中的应用

潘超1夏想厚2

1.浙江省肿瘤医院病理科，浙江杭州310022；2.浙江省肿瘤医院乳腺科，浙江杭州310022

目的研究乳腺癌手术标本与穿刺活检组织中人类表皮生长因子受体-2（HER2）、孕激素受体（PR）、雌激素受体（ER）免疫组化检测的准确性。方法选取2014年8月～2015年8月间在本院实施乳腺癌根治术患者30例为研究对象，比较手术中切除标本和术前穿刺活检HER2、ER、PR免疫组化检测结果。结果手术前与手术中ER阳性分别为24例（80.0%）、26例（86.7%）；手术前与手术中PR阳性分别为21例（70.0%）、23例（76.7%）；手术前与手术中的HER2阳性分别为18例（60.0%）、20例（66.7%）。组织学一致性、HER2为83.3%，PR为90.0%，ER为93.3%。PR与ER检测的一致性较高，HER2的一致性则相对较低。结论PR、ER穿刺活检与术中标本的一致性较高，HER2较低，因此，需综合考虑各方面因素再进行手术方案确定。

孕激素受体；雌激素受体；人类表皮生长因子受体-2（HER2）；免疫组化；乳腺癌

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，目前已居于女性恶性肿瘤的第二位，每年全世界有100多万新增乳腺癌病例，其中有40多万死亡[1]。在绝经期前后、40～60岁女性中发病率较高，常发病于乳腺上皮组织[2]。乳腺肿瘤一般先采用影像学方法诊断，然后以病理活检确诊，手术后对切除的组织进行切片活检为金标准，但是术前穿刺活检也有重要价值。乳腺粗针穿刺活检是取得乳腺肿瘤标本的首选方法，可以通过此标本检测雌孕激素及HER2的表达情况而制定出针对性的治疗方案[3]。病理活检可采用细胞学方法和免疫组织化学法（免疫组化法），但是临床实践表明，细胞学方法不方便进行定量和定位，借鉴性较差[4，5]。而免疫组化法通过抗原抗体反应对组织切片或标本中的特定化学成分进行标记，不仅能定性，还能定位、定量[6，7]。选择合适的肿瘤标志物对确定乳腺癌的病情进展和病理分型十分重要[8-10]。本文主要探讨穿刺活检时人类表皮生长因子受体-2（HER2）、孕激素受体（PR）、雌激素受体（ER）免疫组化检测的准确程度，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

以2014年8月～2015年8月间在本院实施乳腺癌根治术患者30例为研究对象，术前检测凝血时间、血常规均正常，均未实施放化疗，穿刺活检在手术前进行，均呈浸润性癌。患者均为女性，年龄36～63岁，平均（50.1±2.7）岁；右乳14例（46.7%），左乳16例（53.3%）；病灶大小8～22 mm，平均（13.3±1.5）mm；病理分期：T1期2例（6.7%），T2期19例（63.3%），T3期9例（30.0%）。

1.2方法

1.2.1穿刺取样[11，12]超声检查患侧乳房，确定病变大小与部位，在体表做穿刺点标记。仰卧位，对皮肤做常规消毒，探头涂抹少量耦合剂，2%利多卡因在穿刺点逐层浸润麻醉，以破皮针在皮肤上刺一小口，超声引导下将活检针尖送达目的病灶，在活检枪发出后，将针快速拔出，在10%福尔马林液体中放置取下的组织条芯，行组织病理检查，完成后对活检部位压迫止血，包扎消毒。

1.2.2免疫组化检测[13，14]穿刺标本以常规辣根过氧化物酶法（HRP）检测HER2、ER、PR（试剂盒选用上海美轩生物科技有限公司产品）（检测方法选用SP法）。细胞膜是HER2表达部位，＞30%为阳性；细胞核是PR、ER阳性表达部位，＞1%的表达数量为阳性。对确诊患者实施手术，切除的病灶进行石蜡切片，以滴加新鲜配制的DAB工作液100μL（以覆盖组织为宜）染色。若DAB显色呈黄色，则判定结果为阳性。三种标志物以三个切片进行检测。

1.3观察指标

对比穿刺前、术中数值。术中标本检测与穿刺免疫组化一致则同属阴性，同为阳性时程度差异不明显的情况下等同于一致。

1.4统计学方法

采用SPSS 18.0统计学软件分析处理研究中的数据与资料，计数资料以百分数表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.1术中标本和术前穿刺活检的HER2、PR、ER表达情况分析

手术前与手术中ER阳性分别为24例（80.0%）、26例（86.7%）；手术前与手术中PR阳性分别为21例（70.0%）、23例（76.7%）；手术前与手术中的HER2阳性分别为18例（60.0%）、20例（66.7%）。见表1。

表1　手术中标本和术前穿刺活检的HER2、PR、ER表达情况[n（%）]

2.2手术标本和穿刺活检组织学一致性情况分析

分析其组织学一致性，HER2为83.3%，PR为90.0%，ER为93.3%。PR与ER检测的一致性较高，HER2的一致性则相对较低（ER与PR一致性比较，χ2=0.00，P＞0.05；ER与HER2一致性比较，χ2=0.65，P＞0.05；HER2与PR一致性比较，χ2=0.14，P＞0.05）。见表2。

表2　手术标本和穿刺活检组织学一致性情况

3　讨论

乳腺由皮肤、纤维组织、乳腺腺体和脂肪组成，原位乳腺癌并不致命，但癌细胞之间连接松散，容易脱落[15]，游离的癌细胞可以随血液或淋巴液播散全身，形成转移，危及生命。组织穿刺活检的方法是诊疗癌肿技术进步的结果，在临床中的应用较为广泛[16]，但需要选择合适的肿瘤标志物。目前对于标志物的要求主要有灵敏度、特异度高，可反映肿瘤的动态变化，有器官特异性，可为临床选择化疗药提供依据等。

目前免疫组化技术在乳腺癌患者中的应用越来越成熟，被广泛应用在乳腺癌中的ER、PR、HER2等检测技术，不仅作出病变性质诊断，还对其病变性质在临床预后关系选择个性化治疗提供依据[17]。肿瘤标志物的种类很多，可分为癌胚抗原、糖类、酶类、蛋白质类、激素类、基因类等。

HER2是一种膜蛋白，30%的乳腺癌患者中存在HER2基因过表达，HER2阳性的乳腺癌患者对内分泌治疗的反应较差，对其进行检测可提示患者的预后情况。其表达状况属于乳腺癌曲妥珠单抗靶向治疗的选择依据，也是判断乳腺癌预后的独立指标[18]。雌激素受体（ER）是一种蛋白质分子，它们较多地存在于靶器官的细胞内，可与激素发生特异性结合而形成激素-受体复合物，使激素发挥其生物学效应。ER是个核受体，其主要配体是17-β-雌二醇，作为配体依赖性转录因子来调节涉及乳腺癌细胞增殖、存活、侵袭和肿瘤新生血管形成的下游基因，这种作用能够通过封闭受体或剥夺循环配体而减弱[19]。孕激素受体（PR）作为配体激活的转录因子，是类固醇激素受体家族的一员。PR有两个异构体PR-A（94kDa）和PR-B（114kDa）。虽然它们的转录活性相反，但它们的DNA和配体结合亲和力相似。PR-B是孕激素敏感基因的激活剂，而PR-A则抑制PR-B功能。研究发现HER2、PR、ER均可以作为检测乳腺癌的重要指标[20]，ER、PR的表达决定了治疗方案的选择。

在本次研究中，PR与ER的术前术中检测一致性较高，HER2则较低，提示通过穿刺活检检测雌孕激素受体可为临床提供较好的内分泌治疗的依据。但HER2的一致性为83.3%，而且在穿刺活检中的阳性表达率偏低，说明在靶向治疗的选择中，穿刺活检的HER2免疫组化结果指导意义有限，应根据手术标本的免疫组化检测等较为成熟的方法来指导采用靶向治疗。

综上所述，在诊治乳腺癌的过程中，术前免疫组化检测有其使用价值，应综合考虑各项因素后决定手术方法的选用。

[1]蓝云飞.乳腺癌穿刺活检组织ER、PR和HER2免疫组化检测准确性的研究[J].中国医疗前沿，2013，8（17）：98-99.

[2]闫晓红，赵新汉，刘尧，等.TOPⅡa基因扩增对蒽环类药物在HER2阳性乳腺癌新辅助化疗中的疗效预测[J].现代肿瘤医学，2015，23（9）：1224-1226.

[3]王海.乳腺癌穿刺活检组织ER、PR和HER2免疫组化检测准确性的研究[J].医学信息（上旬刊），2011，24（6）：3744-3745.

[4]陈小媚，邹宇君，江燕.中晚期乳腺癌多支超选择性动脉化疗联合手术治疗的临床应用价值[J].齐齐哈尔医学院学报，2015，36（24）：3631-3632.

[5]周爱清，陈志军，孙正魁，等.乳腺癌患者血清HER-2/ neu浓度与组织HER-2表达水平的相关性[J].实用癌症杂志，2015，30（4）：479-481.

[6]胡祖健，徐海滨，任兴昌，等.乳腺癌转移抑制基因、尿激酶型纤溶酶原激活剂在乳腺癌组织中的表达[J].全科医学临床与教育，2015，13（2）：132-134.

[7]Hoegh A，Lindholt S.Basic science review.Vascular sistensibility as a redictive ool in the management of small symptomatic bdominal aortic aneurysms[J].Vase Edovascular Surg，2009，（4）：333-338.

[8]Várady E，Feher E，Levai A，et al.Estimation of vesselage and early diagnose of atherosclerosis in progeria syndrome by using echo-tracking[J].Clin Hemorheol Microcirc，2010，44（4）：297-301.

[9]Geerin O，Soto ME，Brocker P，et al.Nutritional status assessment during Alzheimer's disease[J].J Netr Health Aging，2012，9（2）：81-84.

[10]Araki T，Emoto M，Teramura M，etal.Effectofadiponectin on carotid arterial stiffness in type 2 diabetic patients treated with pioglitazone and metformin[J].Metabolism，2012，55（8）：996-1001.

[11]Mor IA，Uchida N，Inomo A，et al.Stiffness of systemic arteries in appropriate and small for gestational age newborn infants[J].Pediatrics，2012，118（3）：1035-1041.

[12]Zhang Y，Li W，Yan T，et al.Early detection of lesions of dorsal artery of foot in patients with type 2 diabetes mellitus by high-frequency ultrasonography[J].J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci，2011，29（3）：387-390.

[13]Shingu Y，Shiiya N，Ooka T，et al.Augmentation index is elevated in aortic aneurysm and dissection[J].Ann Thorac Surg，2009，87（5）：1373-1377.

[14]Nicoll MR，Haskins K，Flores SC.Oxidant stress，immune dysregulation，and vascular function in type I diabetes[J]. Antio Xid Redo X Signal，2012，9（7）：879-889.

[15]朱文标，郑少秋，卢善明，等.IHC与FISH检测118例乳腺浸润性导管癌HER-2的对比分析[J].中国医学创新，2015，12（11）：5-7.

[16]Gokce N，Vita JA，Mc Donnell M，et al.Effect of medical and surgical weight loss on endothelial vasomotor function in obese patients[J].Am J Cardiol，2011，95（2）：266-268.

[17]谭敏华，雷伟华，谭冬玲，等.浸润性乳腺癌ER、PR、HER-2、E-cadherin、CK5/6检测与临床预后关系[J].临床与实验病理学杂志，2011，27（9）：933-938.

[18]葛文凯，杨奔，左文述，等.乳腺癌穿刺活检对HR和HER-2及Ki-67评价可靠性以及化疗对其影响研究[J].中华肿瘤防治杂志，2014，21（11）：847-853.

[19]汪海新，应明真，王梅.ER、PR、HER-2、P53在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及临床意义[J].医学研究杂志，2013，42（2）：27-31.

[20]Brodszki J，Lnne T，Marsál K，et al.Impaired vascular growth in late adolescence after intrauterine growth restriction[J].Circulation，2011，111（20）：2623-2628.

Application of ER,PR and HER2 immunohistochemical tests in breast cancer biopsy

PAN Chao1XIA Xianghou2
1.Department of Pathology,Zhejiang Cancer Hospital,Hangzhou 310022,China；2.Department of Galactophore,Zhejiang Cancer Hospital,Hangzhou 310022,China

Objective To study the accuracy of HER2,PR and ER immunohistochemical tests in the surgical sample and biopsy tissue of breast cancer.Methods A tiotal of 30 patients,treated with radical mastectomy in our hospital from August 2014 to August 2015,were selected as research subjects,and the results of HER2,ER and PR immunohistochemical test in the surgical resection samples and preoperative biopsy were compared.Results The number of positive cases of ER before the surgery and during the surgery were 24(80.0%)and 26(86.7%)respectively；the number of positive cases of PR before the surgery and during the surgery were 21(70.0%)and 23(76.7%)respectively；the num ber of positive cases of HER2 before the surgery and during the surgery were 18(60.0%)and 20(66.7%)respectively. The histological consistency rates of HER2,PR and ER were 83.3%,90.0%and 93.3%respectively.The consistency rates of PR and ER were higher,while the consistency rate of HER2 was relatively lower.Conclusion The consistency rate of PR and ER in biopsy and surgical sample is higher,while that of HER2 is lower.Hence,various factors should be put into consideration before the surgical protocol is determined.

Progesterone receptor；Estrogen receptor；HER-2；Immunohistochemistry；Breast cancer

R730.4

A

1673-9701（2016）29-0026-03

浙江省自然科学基金（LY12H16030）

（2016-07-12）