不同亚型HPV感染与女性宫颈疾病的相关性

梁艳华毕超★梁景耀唐明珠王焕丽邓斌宋卫忠

不同亚型HPV感染与女性宫颈疾病的相关性

梁艳华1毕超1★梁景耀1唐明珠2王焕丽1邓斌1宋卫忠1

目的 探讨不同亚型HPV感染与女性宫颈疾病的相关性。 方法 选取本所2015年3月至2016年4月的2 360例宫颈疾病患者进行21种亚型HPV检测，其中包括5种低危亚型（LR-HPV）和16种高危亚型（HR-HPV），同时根据宫颈病病理活检结果将宫颈疾病患者分为3组，宫颈炎组217例，宫颈上皮内瘤变（CIN）组118例，宫颈癌组36例。比较不同亚型HPV感染与女性宫颈疾病发病的关系。 结果 本研究中的2 360例宫颈疾病患者中检测到HPV阳性患者371例，阳性率为15.7%，其中HPV单一感染203例（54.7%），多重感染168例（45.3%）。宫颈炎患者组HPV感染以HPV16（68.7%），HPV 52（13.0%），HPV31（5.2%），HPV11（3.5%）亚型为主，CIN组HPV感染以HPV6（69.2%），HPV33（6.2%），HPV52（6.2%），HPV58（6.2%）亚型为主，宫颈癌组HPV感染以HPV 16（65.2%），HPV53（13.0%），HPV58 （8.7%），HPV56（8.7%）亚型为主；HPV16型感染和HPV11型感染为导致宫颈炎发生的危险因素（P＜0.01），HPV6型感染和HPV52型感染为导致CIN发生的危险因素（P＜0.01），HPV16型感染和HPV58型感染为导致宫颈癌发生的危险因素（P＜0.01）。 结论 高危型HPV是导致宫颈癌，宫颈炎发生的危险因素，低危型HPV是导致CIN发生的危险因素，HPV分型与宫颈疾病的发生具有密切相关性。

亚型；HPV；宫颈病变；人乳头癌病毒

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一种属于乳头多瘤空泡病毒科的乳头瘤病毒A属的双链DNA病毒［1］。这种病毒可侵犯皮肤以及黏膜鳞状上皮，感染HPV会导致多种宫颈疾病的发生，包括宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）、宫颈癌等众多危害女性健康的疾病，其中宫颈癌也是妇科最常见的恶性肿瘤之一［2-4］。HPV感染是导致这些疾病的重要因素，目前已经发现了多种HPV的亚型，根据其危险程度不同可分为高危型和低危型，不同亚型HPV感染可导致不同的女性宫颈疾病，且不同亚型HPV感染存在地域差异［5］。不同的亚型对宫颈疾病发病造成的影响不同，而且不同学者研究的结果存在一定的差异，因此有必要进行本次研究，探讨哪种亚型对宫颈疾病的发生占主导因素。本研究针对本所收集的病例进行研究，研究不同亚型HPV感染与女性宫颈疾病的关系，为深入的研究提供参考依据。

1 资料与方法

1.1.1 一般资料

随机选取本所2015年3月至2016年4月的2 360例宫颈疾病患者进行研究，经严格病理组织学检测证实，其中HPV感染阳性妇女371例，将HPV检测结果为阳性的样本根据病理结果分为3组，其中为宫颈炎组217例，年龄20～70岁，平均（40.71±8.86）岁；宫颈上皮内瘤变（CIN）组118例，年龄21～65岁，平均（40.56±7.81）岁；宫颈癌组36例，年龄22～68岁，平均（40.76±7.90）岁。3组患者的年龄相比，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。病人纳入标准：无HPV感染治疗病史；无其他影响HPV检测的病症；未进行过宫颈和盆腔治疗；患者完全知情，并签署知情同意书。排除妊娠期孕妇、正处于月经期的宫颈疾病患者和存在心肝肾等器官严重疾病患者。

1.1.2 试剂

HPV检测试剂盒购自广东凯普生物科技股份有限公司。

1.2 方法

1.2.1 采集标本

HPV检测前，所有患者在24 h内不能进行性生活，在窥阴镜的观察下将患者的宫颈充分暴露，然后用干棉签将患者宫颈口的分泌物擦干净，用标本毛刷收集宫颈口脱落的细胞，将收集的样本置于4℃的冰箱内备用［6］。

1.2.2 HPV分型检测

HPV分型检测采用导流杂交HPV DNA检测法［7］进行检测，检测21种HPV亚型，包括16种高危亚型：HPV 16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV52（MM4）亚型，5种低危亚型：HPV 6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44。

1.2.3 诊断标准［8］

通过观察芯片薄膜（在芯片薄膜的质控点正常的基础上）HPV亚型分布的相应着色点获得研究结果，呈现清晰的蓝紫色圆点可判断检测结果为阳性点。判断阳性点为何种HPV亚型。一种HPV亚型感染的为单一感染，两种及两种以上HPV亚型感染的为多重感染。

1.2.4 宫颈疾病病理学活检

由具有经验且专业的妇产科医师负责阴道镜下宫颈疾病的病理学活检，患者需排空膀胱以窥阴器充分暴露宫颈。将阴道内过多分泌物用干棉签拭去，调整好阴道镜的距离、焦距和放大倍数，先肉眼观察宫颈有无糜烂、出血、赘生物等病变。然后用3%醋酸涂于宫颈行醋酸试验，异常者摄像保存。再用1%碘溶液涂于宫颈行碘试验，观察发生病变的周围边界及表面形态，对碘试验异常区域行多点可疑处活检。填写患者基本信息，标本置于10%福尔马林固定后送病理科登记检査。

1.3 统计学方法

数据分析采用SPSS 26.0统计学软件进行处理，计数数据结果用n%进行表示，组间比较采用两组独立样本t检验，方差齐用方差分析，方差不齐用秩和检验，以P＜0.05为差异有统计学意义，回归分析采用单因素非条件Logistic回归检验方法，以α= 0.05为检验标准，P＜0.05为差异具有统计学意义，OR＞1为危险因素，OR＜1为保护因素。

2 结果

2.1 宫颈病变严重程度与感染分型比较

2 360例宫颈疾病患者中检测到HPV阳性患者371例，阳性率为15.7%，其中单一感染203例（54.7%），多重感染168例（45.3%），见表1。宫颈炎组和宫颈癌组主要为高危型HPV感染，CIN组主要为低危型HPV感染，差异具有统计学意义（P＜0.05）。具体见表2。

表1 各组患者HPV感染比较［n（%）］Table 1 Comparison of HPV infection in each group ［n（%）］

表2 各组患者HPV感染分型比较［n（%）］Table 2 Comparison of positive rate of HPV infection in each group［n（%）］

2.2 HPV亚型在不同宫颈疾病中的分布状况

HPV亚型在不同宫颈病变中的分布状况（以单一感染数统计）见表2，由表2可以看出，宫颈炎患者组HPV感染以HPV 16（65.5%），HPV 52 （12.2%），HPV31（6.8%），HPV11（3.4%）亚型为主，CIN组 HPV感染以 HPV 6（63.3%），HPV33 （6.7%），HPV52（6.7%），HPV58（6.7%）亚型为主，宫颈癌组HPV感染以HPV 16（64.0%），HPV53 （12.0%），HPV58（8.0%），HPV56（8.0%）亚型为主。

2.3 不同亚型HPV感染与宫颈癌的相关性

根据单因素分析中占的比例比较高的HPV16、HPV53、HPV58、HPV56亚型得到的结果进行Logistic回归模型分析，结果显示HPV16型感染和HPV58型感染是导致宫颈癌发生的危险因素（P＜0.01），见表4。

表3 HPV亚型在不同宫颈疾病中的分布状况［n（%）］Table 3 Ddistribution of HPV subtypes in different cervical diseases［n（%）］

表4HPV感染与宫颈癌的相关性Table 4 Correlation between HPV infection and cervical cancer

2.4 不同亚型HPV感染与CIN的相关性

根据单因素分析中占的比例比较高的HPV6、HPV33、HPV52、HPV58结果进行Logistic回归模型分析，结果显示HPV6型感染及HPV52型感染是导致CIN发生的危险因素（P＜0.01），具体结果见表5。

2.5 不同亚型HPV感染与宫颈炎的相关性

根据单因素分析中占的比例比较高的HPV16、HPV52、HPV31、HPV11结果进行Logistic回归模型的分析，结果显示，HPV16型感染及HPV11型感染是导致宫颈炎发生的危险因素（P＜0.01），具体结果见表5。

表5HPV感染与CIN的相关性Table 5 Correlation between HPV infection and CIN

表6HPV感染与宫颈炎的相关性Table 6 Correlation between HPV infection and cervicitis

3 讨论

`宫颈疾病是危害女性的重要疾病，其中宫颈炎、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌是常见的几种宫颈疾病［9］，HPV感染能够引起主要的生殖系统疾病，HPV在癌症发展中的作用已被广泛研究［10］。有研究［11］报道宫颈癌中不同HPV亚型中的高危型的阳性率比较高，而低危型的阳性率比较低。可见高危型HPV是宫颈癌的发病的主要因素。宫颈疾病中的宫颈炎也与HPV感染有关，研究认为高危型的HPV感染对宫颈炎的发生起到关键作用［12］。本研究的结果也表明宫颈癌和宫颈炎患者的发病原因主要是因为高危型HPV感染，这也和前人的研究基本吻合［13］。

宫颈上皮内瘤变是癌前病变的总称，主要包括宫颈不典型增生和宫颈原位癌，是发展到宫颈癌的一系列变化的过程。宫颈上皮内瘤变的发病与HPV感染有关，而有研究［12］认为低危型HPV感染是导致该病发生的原因，可能的原因是不同的疾病发病程度对不同亚型的HPV感染具有一定影响，而且也与患者的体质有一定的关系。但也有学者［14］认为高危型HPV感染的影响比较大，本研究结果显示高危型HPV感染的比例为52.8%（196/371）略高于低危型47.2%（175/371），与此研究报道一致。

不同亚型HPV感染的基因型中比较常见的是高危型16个，低危型5个，不同的基因型也会对宫颈疾病的发生有不同的影响。研究［15］发现高危型中的HPV16对宫颈疾病的发生比较重要，尤其在宫颈癌和宫颈炎的发病中具有重要作用。本研究显示宫颈炎组感染的主要HPV亚型是高危型HPV16、HPV52、HPV33和低危型HPV11，宫颈癌组感染的主要是高危型HPV16、HPV53、HPV58、HPV56，宫颈上皮内瘤变的发生主要是低危型HPV6和高危型HPV33，HPV52，HPV58。本研究的结果和其他研究［16］的结果存在一定的差异，可能的原因是生殖道HPV感染有HPV亚型单一感染与HPV亚型多重感染。关于HPV亚型多重感染的比例方面，每个学者得到的结果也存在一定的差异，可能的原因是与研究对象及地域有一定关系，同时也有可能与不同检测方法的有一定的关系［17］。本研究的结果显示宫颈癌的发生与不同HPV感染的多因素分析中发现，宫颈上皮内瘤变发生的危险因素是HPV6和HPV52感染，宫颈癌的发生危险因素是HPV16和HPV58感染，导致宫颈炎发生的危险因素是HPV16型感染和HPV11型感染。由此可见，宫颈疾病的发生与多个不同亚型HPV感染有着密切的关系。

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Relationship between different subtypes of HPV infection and cervical disease in female

LIANG Yanhua1,BI Chao1★,LIANG Jingyao1,TANG Mingzhu2,WANG Huanli1,DENG Bin1,SONG Weizhong1
（1.Guangzhou Institute of Dermatology，Guangzhou，Guangdong，China，510000；2.Guangzhou DaAn Clinical Laboratory Center Co.Ltd.,Guangzhou,Guangdong,China,510000）

Objective To study the relationship between infection with the different subtypes of human papillomavirus(HPV)and cervical disease. Methods From March 2015 to April 2016,2 360 cases of cervical disease were studied.Twenty-one subtypes of HPV were detected,including 5 low-risk subtypes(LRHPV)and 16 high-risk subtypes(HR-HPV),according to cervical biopsy results HPV positive women were divided into 3 groups,cervicitis group was 217 cases,cervical intraepithelial neoplasia(CIN)group was 118 cases,cervical cancer group was 36 cases.The relationship between different subtypes of HPV infection and cervical disease was analyzed. Results In the 2 360 cases of cervical disease analyzed,371 patients were HPV positive,for a positive rate of 15.7%,of which 203 cases(54.7%)were of single-subtype infection,and multiple infection occurred in 168 cases(45.3%).In the patients with cervicitis,infection with HPV 16（68.7%），HPV52（13.0%），HPV31（5.2%），and HPV11（3.5%）were detected.In the cervical intraepithelial neoplasia patients,subtypes HPV6（69.2%），HPV33（6.2%），HPV52（6.2%），and HPV58（6.2%）were detected.Among the cervical cancer patients,infection with HPV 16（65.2%），HPV53（13.0%），HPV58（8.7%），and HPV56 （8.7%）subtypes were found.Subtype HPV6 and HPV52 infection are risk factors for CIN(P＜0.01)and type HPV16 infection and type HPV58 infection are risk factors that lead to the occurrence of cervical cancer(P＜0.01). Conclusion The high risk HPV subtypes are risk factors for cervical cancer and cervicitis,while the low risk HPV is a risk factor for CIN.HPV infection is closely related to the occurrence of cervical disease.

Subtype;HPV;Cervicitis;Cervical cancer

1.广东省广州市皮肤病防治所，广东，广州510095 2.广州达安临床检验中心，广东，广州510000

★通讯作者：毕超，E-mail：biccc916@sina.com