头痛宁胶囊治疗头痛的实验研究*

何 娟，陈衍斌，许 刚，张晓红，刘 峰△，聂西周

1.陕西国际商贸学院中药研究院(咸阳712046 )，2.陕西步长制药有限公司(咸阳712000 )，3.陕西中医药大学(咸阳712046)

头痛宁胶囊治疗头痛的实验研究*

何 娟1，2，陈衍斌2，许 刚2，张晓红2，刘 峰1，2△，聂西周3

1.陕西国际商贸学院中药研究院(咸阳712046 )，2.陕西步长制药有限公司(咸阳712000 )，3.陕西中医药大学(咸阳712046)

目的：进行头痛宁胶囊治疗头痛的实验研究。方法：通过热板实验、扭体反应等方法考察头痛宁胶囊对小鼠疼痛的影响；建立急性不完全性脑缺血模型，考察头痛宁胶囊对大鼠脑组织含水量的影响；考察头痛宁胶囊对去甲肾上腺素和5-HT引起大鼠离体脑基底动脉收缩的影响。结果：头痛宁胶囊高、中剂量组能够显著降低热板所致小鼠疼痛反应；头痛宁胶囊各剂量组均显著降低醋酸所致小鼠扭体次数，具有明显镇痛作用；头痛宁胶囊显著降低脑缺血模型大鼠脑组织含水量；对去甲肾上腺素、5-羟色胺引起的大鼠脑基底动脉收缩有明显的抑制作用。结论：头痛宁胶囊具有明显镇痛作用，可用于各类头痛的治疗。

偏头痛、紧张性头痛以头痛暴作、疼痛剧烈、或左或右、反复发作为特征的一种临床常见病、多发病，属于中医学“头风”、“偏头痛”范畴。疾病可发生在任何年龄，发病率约37%～78%，女性发病率较高。本病发作剧烈，迁延难愈，因而被历代医家视为疑难病症。目前，偏头痛、紧张性头痛的发病机制和病因尚不明确，与神经递质代谢紊乱、颅周肌肉、心理因素、缺血、炎性介质释放增多等均有一定关系[1-2]。头痛宁胶囊由土茯苓、天麻、制首乌等六味药材组成，具有熄风涤痰，逐瘀止痛的功效，用于偏头痛、紧张性头痛属痰瘀阻络证，证见：痛势甚剧，或攻冲作痛，或痛如锥刺，或连及目齿，伴目眩畏光，胸闷脘胀，恶心呕吐，急躁易怒，反复发作。多年临床实践证明头痛宁胶囊在治疗各类头痛均疗效确切，安全性高，为进一步明确头痛宁胶囊治疗头痛的药理作用及其机制，本研究对其进行了药效学方面的实验研究，为临床合理应用提供依据。

材料与方法

1 实验动物 昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18～22 g；SD大鼠，雌雄兼用，体重180～220 g。实验动物均由第四军医大学实验动物中心提供，生产许可证号：SCXK(军)2012-0007。

2 试药与仪器 头痛宁胶囊(国药准字：20150914)、对乙酰氨基酚片(批号为141003)、盐酸氟桂利嗪胶囊(西比灵，批号为130613770)、去甲肾上腺素(NE，分析纯，美国Sigma 公司)、5-羟色胺(5-HT，分析纯，美国Sigma 公司)、0.9%氯化钠注射液(生理盐水)，乙酸(分析纯，99.5%)。热板仪(RB-200，成都泰盟软件有限公司)、电热恒温干燥箱(WHL-25AB，天津市泰斯特仪器有限公司)、电子天平(DV215CD，德国梅特勒公司)、八道生理记录仪及其附件(RM-6000，日本NIHON KOHDEN公司)、等长张力换能器(TB-612T，日本NIHON KOHDEN公司)。

3 实验方法

3.1 镇痛实验

3.1.1 对热板所致小鼠疼痛的影响:选取实验用小鼠，体重18～22 g，雌雄各半，实验前1 d，将小鼠放在热板仪上(温度55 ℃)，挑选舔后足时间合格的小鼠(痛阈值处于5～30 s)，筛选供实验用小鼠80只。将小鼠随机分成5组，每组16只，即头痛宁胶囊低、中、高剂量组、空白对照组(生理盐水)、阳性对照组(对乙酰氨基酚)。头痛宁胶囊低、中、高三个剂量组分别灌胃给药0.105 g/kg、0.21 g/kg、0.42 g/kg，空白对照组给予等体积的生理盐水，阳性对照组选用对乙酰氨基酚为对照药，剂量为0.2 mg /10 g。于给药后30 min、60 min分别测定小鼠舔后足的时间。

3.1.2 对醋酸所致小鼠扭体的影响:取小鼠50只，体重18～22 g，雌雄各半，随机分成5组，每组10只，头痛宁胶囊低、中、高三个剂量组分别灌胃给药0.105 g/kg、0.21 g/kg、0.42 g/kg，阳性对照组给予0.2 mg/10g对乙酰氨基酚，空白对照组给予等体积的生理盐水。每日灌胃给药1次，连续给药7 d，末次给药后30 min，给小鼠腹腔注射0.6 %冰醋酸溶液(临用前配置)0.1 ml/10g，观察并记录注射醋酸溶液后20 min内小鼠首次出现扭体反应的时间和小鼠的扭体次数。

3.2 头痛宁胶囊对大鼠脑组织含水量的影响:取健康SD大鼠60只，雌雄各半，随机分成6组，每组10只。头痛宁胶囊低、中、高三个剂量组分别灌胃给药0.21 g/kg、0.42 g/kg、0.84 g/kg；阳性对照组选用西比灵为对照药，剂量为0.332 mg/kg；假手术组和模型组分别给予等体积的生理盐水，给药体积皆为1 ml/100 g，连续给药10 d，于第11天给药后1 h，乙醚麻醉，打开大鼠颈部，结扎大鼠两侧颈总动脉，形成急性不完全性脑缺血模型，假手术组不结扎大鼠两侧颈总动脉。结扎手术3 h后，断头处死大鼠，开颅，取全脑，用电子天平秤定脑湿重，然后将脑放入干燥箱中，110 ℃烘72 h后，再次称定脑干重，然后计算脑含水量，脑含水量=(脑湿重-脑干重)÷脑湿重×100 %。

3.3 对大鼠离体脑基底动脉收缩的影响：取2.2项下低、中、高3个剂量组、模型组(空白)及阳性对照组(西比灵)的大鼠断头后，迅速取出大鼠脑基底动脉，分离血管周围组织，去除血管内血液，并制成动脉环，将动脉环挂在充满克氏液的浴槽中，温度37 ℃，通入95% O2和5% CO2混合气体，先分别加入去甲肾上腺素和5-羟色胺引起脑基底动脉收缩，10 min后分别向浴槽中加入不同浓度的药物，记录给药前激动剂所诱导的血管收缩和给药后的血管收缩变化情况，计算给药后血管收缩抑制百分率[3]。抑制百分率(%)=(给药前血管收缩-给药后血管收缩)/给药前血管收缩×100 %。

结 果

1 镇痛实验

1.1 对热板所致小鼠疼痛反应的影响:给药后，头痛宁胶囊各剂量组与空白对照组比较，均能提高小鼠热刺激所致疼痛的痛阈值，延长效果与给药剂量有一定的量效关系，且高剂量组效果与阳性对照组相当，结果见表1。

表1 对热板所致小鼠疼痛的影响

注：与空白对照组比较△P<0.05，▲P<0.01

1.2 对醋酸所致小鼠扭体的影响:各剂量组与空白对照组比较均具有显著镇痛作用，并呈现一定的量效关系，各剂量组与空白对照组比较20min内扭体次数均显著下降，差异具有统计学意义(P<0.05)，结果见表2。

2 头痛宁胶囊对大鼠脑组织含水量的影响 头痛宁胶囊各剂量组和阳性对照组与空白对照组比较，大鼠脑湿重与脑干重无明显差异，大鼠脑含水量均能显著降低，差异均具有统计学意义(P<0.01)，表明头痛宁胶囊能显著降低大鼠脑含水量，结果见表3。

3 对大鼠离体脑基底动脉收缩的影响 头痛宁胶囊对脑基底动脉收缩抑制作用随剂量增加呈现出一定的量效关系，头痛宁胶囊对去甲肾上腺素和5-HT引起脑基底动脉收缩有抑制作用，均较空白对照组显著增加，差异有统计学意义(P<0.01)，结果见表4。

表2 对醋酸所致小鼠扭体的影响

注：与空白对照组比较，▲P<0.01

表3 对大鼠脑组织含水量的影响

注：与模型组比较▲P<0.01

表4 对大鼠离体脑基底动脉收缩的影响

注：与空白对照组比较，▲P<0.01

讨 论

头痛，是一种常见病和多发病，物理、生化、精神和机械性质等多种因素均可能诱发头痛。头痛发作机理极其复杂，是反复发作性头部血管舒缩功能紊乱引起的[4]。头痛的发病人群广，患病率高，严重影响人们的生活质量。按照头痛疾患的国际分类，将头痛疾患分为：原发性头痛，继发性头痛，脑神经痛、中枢和原发性颜面痛及其他头痛[5]， 其中又以原发性头痛的人数最多，包括偏头痛、紧张型头痛、丛集性头痛和其它类型原发性头痛4类[6]。从中医角度来看，头部是人体的诸阳之会，头痛病因可分为外感和内伤两大类，外部因素的侵袭和内部五脏六腑的病化，都会产生头痛。外感头痛分为风寒、风热、风湿；内伤头痛分为肝阳上亢、痰浊内扰、气血亏虚、肾精亏虚、瘀血内阻，原发性头痛常归为内伤头痛范畴。中医中药治疗头痛的历史较为悠久，国内患者长期以来对中药信任度较高，使得中成药在头痛治疗中的地位日趋重要。

头痛宁胶囊处方是在前清孟文瑞《春脚集》中“立愈汤”的基础上加减化裁而成，方中天麻甘平入肝，平肝潜阳，熄风止痉，为平肝熄风之要药、“治风之神药”，土茯苓甘淡性平，入肝胃经，除湿健脾、清热解毒，两药共用为主。何首乌与天麻共用，两药直入肝胆经，阴平阳秘，头痛自除。当归补血活血，补肝血养肝阴，与首乌共为臣药。防风以举为用，味轻而升，引诸药直达头面受病之所，用为佐药；全蝎平肝熄风，用为使药。全方集升降攻补于一方，兼顾风痰瘀虚，为治疗偏头痛证属风痰阻络标本同治之良方，可以用于治疗风火痰瘀引起的各种头痛。现代临床应用表明，头痛宁胶囊治疗偏头痛、紧张性头痛、丛集性头痛、原发性血管性头痛等各类头痛均有良好的疗效[7]；在治疗偏头痛方面更加显著，有效率高于西比灵[8]；头痛宁胶囊可通过调节体内血浆NOS、5-羟色胺和谷氨酸的含量对紧张性头痛发挥作用[9]。

本研究对头痛宁胶囊的镇痛作用进行了研究，结果表明头痛宁胶囊高剂量组和阳性对照组能显著提高小鼠热刺激所致疼痛的痛阈值，各剂量组均能显著降低小鼠因醋酸刺激所致的扭体次数，证明头痛宁胶囊具有较强的镇痛作用。

脑缺血、炎症介质释放增多等均可导致紧张性头痛发病[2]，非特异性炎症是脑缺血的病理生理反应之一，在急性期可以加重缺血性脑损伤。本研究利用大鼠急性不完全性脑缺血模型，测定头痛宁胶囊对大鼠脑组织含水量的影响，进而反应脑组织的水肿和炎症介质释放程度。实验结果表明，头痛宁胶囊各剂量组与模型组的脑含水量百分率相比有显著性差异，说明头痛宁胶囊具有降低脑组织含水量的作用，可能具有降低炎症介质释放，调节血管通透性的作用。

椎-基底动脉发生病变时，脑部血流不畅，供血不足，常出现眩晕、头痛等症状，头痛多为跳痛，有时呈炸裂痛，多位于枕部，弯腰或憋气时加重[3]。本实验考察了头痛宁胶囊对大鼠离体脑基底动脉收缩的影响，发现其对去甲肾上腺素和5-羟色胺引起的脑基底动脉收缩具有明显的抑制作用，有助于降低眩晕、头痛的发生率，缓解头痛症状。

本研究结果表明，头痛宁胶囊具有良好的镇痛作用，能够降低脑缺血模型大鼠脑组织含水量，抑制去甲肾上腺素和5-羟色胺引起的脑基底动脉收缩。研究为头痛宁胶囊在临床上治疗各种类型头痛提供实验依据。

[1] 沈姗姗，胡志强．紧张型头痛病因病机分析[J]．山东中医药大学学报，2012，36(1):5-6．

[2] 杨 月，李春红．紧张型头痛病因病机初探[J]．国医论坛，2016，31(1):13-14．

[3] 赵林钢，龙 军，袁冬平．眩痛停方对离体犬基底动脉收缩反应的影响[J]．安徽医药，2013，17(11) :1845-1847．

[4] 李炳祺．对602例头痛患者流行病学问卷调查[J]．现代医院，2011，11(7):72-73.

[5] 中华医学会疼痛学分会头面痛学组．中国偏头痛诊断治疗指南[J]．中国疼痛医学杂志，2011，17(2) :65-86．

[6] 葛鑫宇，陈宝田，于 林，等．原发性头痛的西医类型与中医分型关系的探讨[J]．现代医院，2013，13(7):58-60．

[7] 闻梓钧，董 明，耿 煜，等．头痛宁胶囊对蛛网膜下腔出血所致头痛的临床观察[J]．辽宁中医杂志，2015，42(10):1916-1917．

[8] 黄金华，陈 伟．头痛宁治疗偏头痛的系统评价[J]．中医药临床杂志，2015，27(5):642-645.

[9] 陈荣华，肖迎春．头痛宁胶囊对紧张性头痛模型大鼠神经递质的影响[J]．中医杂志，2016，57(21):1869-1872．

(收稿：2017-01-23)

*陕西省科学技术研究发展计划项目(2016SF-368)

陕西省创新药物研究中心资助项目(2015SF2-09)

陕西省咸阳市中青年科技领军人才资助项目(2015k04-30-9)

头痛/中医药疗法 动物，实验 大鼠 @头痛宁胶囊

R747.2

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2017.07.082

陕西省创新人才推进计划-重点科技创新团队计划(2015KCT-19)

△通讯作者