探讨免疫组化、特染套染技术在硬化性胆管炎（SC）病理诊断中的应用价值分析

蔡航航

（华中科技大学同济医学院附属同济医院，湖北 武汉 430000）

肝脏病理是肝脏疾病诊断的“金标准”，而肝脏病理诊断的重要技术就是肝脏穿刺法。研究发现，正常成人肝脏中只有胆管上皮细胞会出现CK7表达，而肝细胞则无CK7表达，因此，CK7也被称为“胆管型细胞角蛋白”[1]。本文将在硬化性胆管炎（SC）病理诊断中应用免疫组化及Masson 染色套染技术，并分析其应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机抽取2017年7月～2019年6月我院病理科收到并检验的S12例SC病理标本。所有标本均使用福尔马林固定，按照标准检测流程进行操作，步骤包括脱水、石蜡包埋、切片、免疫组化及特染等。

1.2 方法

（1）免疫组化：常规脱蜡、修复，室温孵育，PBS洗涤，加入第一抗体，恒温孵育1.15 h（37℃）。注意切片应保持湿润，但表面禁止有液体及气泡，应使抗体与组织充分接触。加入鼠抗人单克隆抗体，使用PBS洗涤，随后再加入增强剂，孵育15～20 min（37℃）。再次使用PBS洗涤，加入辣根酶，对羊抗小鼠/兔 IgG 聚合物进行标记，孵育15～20 min（37℃）。进行DAB显色、脱水、树胶封固。（2）Masson 三色染色：常规脱蜡，依次使用Weigert铁苏木素、丽春红酸性品红染液 、苯胺蓝染液进行染色，前两种染色5～10 min，最后染色3～5 min，进行冲洗、脱水、树胶封固。（3）免疫组化+Masson：首先进行免疫组化染色，水洗，使用丽春红酸性品红染液 、苯胺蓝染液染色，不使用苏木素染色，冲洗、脱水、树胶封固。

1.3 评价标准

免疫组化：CK7阳性：细胞浆着黄色；Masson三色染色套染：阳性：肌纤维、纤维素、红细胞显示红色，胶原纤维、细胞核分别为蓝色及蓝黑色。

2 结 果

免疫组化染色结果：所有标本均显示CK7阳性。Masson 三色染色结果：所有患者均符合阳性判定标准。免疫组化+Masson染色套染结果：同时具备以上特征。

3 讨 论

研究发现[2]，胆管上皮细胞可见CK7表达，而肝细胞中则无CK7表达，而肝硬化结节中，可见CK7表达。通过染色、标记CK7，可了解胆管及管腔、界面小胆管增生、胆管上皮变性及增生等情况，反映汇管区纤维化程度。Masson 染色是肝脏纤维化程度判断的“金标准”。可见，除SC以外，以上两种技术还被应用于其他肝脏疾病诊断并取得了显著的成果，例如药物性肝损伤、胆汁性胆管炎等。但与其他肝脏疾病的表现、特征不同，SC患者经染色后无汇管区纤维化，其典型改变为胆管周围纤维组织增生，纤维化呈同心圆、洋葱皮样。以往在进行病理诊断时，均首先观察CK7免疫组化染色切片，确定增生胆管及变性上皮，随后观察Masson染色切片，确定是否有纤维化，往往需要反复比对两个切片，才能够发现特征性病变，不仅费时、费力，且可能出现漏诊。在本次研究中，所有标本免疫组化染色均显示CK7阳性，符合Masson染色阳性判定标准，免疫组化+Masson染色后显示，同时具备以上两种特征。利用免疫组化、特染套染技术后，可在同一张切片上反映胆管损伤情况、纤维化情况，不仅定位准确、质量优良，同时色彩鲜明，方便观察及判断，显示出极高的应用价值。

综上所述，在SC病理诊断中应用免疫组化及Masson染色套染技术可实现准确定位，诊断结果稳定可靠，可反映病变胆管及周围纤维化程度，为病理医师提供丰富的诊断依据。