化学发光分析仪检测乙型肝炎病毒血清标志物的性能分析

大石桥市卫生健康事务中心疾控所检验科 （辽宁 营口 115100）

内容提要：目的：研究化学发光分析仪在检测乙型肝炎病毒标志物中的性能。方法：取本院2018年1月～2018年12月收治的确诊乙型肝炎患者80例为研究对象，随机均分成对照组和观察组各40例，对照组给予ELISA法检测病毒五项标志物，观察组给予雅培i2000化学发光分析仪测病毒五项标志物。对比检测准确率。结果：两种方法检测后HBsAb符合32例，符合率80%，HBeAb符合33例，符合率82.5%、HBcAb符合37例，符合率92.5%，HBsAg符合35例，符合率87.5%，HBeAg符合率35例为87.5%。观察组明显优于对照组，且数据差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：化学发光分析仪检测乙肝标志物的准确率高于ELISA法，且操作方便，误诊率低。

乙型肝炎为严重传染疾病，并且在世界范围内具有较高的发病率，对患者生命威胁较大。数据显示，全世界的慢性乙肝病毒携带者可达3.5亿～4.0亿。乙肝病毒发现和治疗不及时会恶化成肝衰竭、肝硬化甚至肝癌，我国近年来成为乙型肝炎的高发区域，对于该病的治疗首先要及时发现并正确诊断[1]。在临床检查中，以往使用放射疫检，但该方对患者身体机能的影响较大，随后研究并使用了酶联免疫吸附试验（ELISA）检验法，安全性更高，但是检验率偏低，有一定的漏诊率[2]。本次研究所提出的化学发光分析仪主要是一种以光学原理作为基础的检测方法，主要检测指标包括乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒表面抗体（抗-HBs）等，现对两种不同方法的检测效果报道如下。

1.资料与方法

1.1 临床资料

取本院2018年1月～2018年12月收治的确诊乙型肝炎患者80例为研究对象，随机均分成对照组和观察组各40例。其中对照组男性患者20例，女性患者20例，年龄50～88岁，观察组男性患者21例，女性患者19例，年龄49～81岁，所有患者均在本院经过病理检查，确诊携带乙肝病毒，确诊为乙型肝炎，患者时间均在1年以上，所有患者均进行血清标志物的检查，排除肾衰竭患者，两组患者在一般资料上差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

仪器为雅培ARCHITEC T-i2000全自动酶免分析仪，联合使用美国Bio-rad550型酶标仪和法国YR-WASH-1型洗板机。所有配套设备均由雅培公司提供。所有患者分组后，分别采用ELISA法和化学发光分析仪法检测。对比两种检测结果。其中ELISA检测法的主要过程为：按照说明书以表面抗原定值血清作为质控，阴阳对照各两孔。加样，使聚苯乙烯板包被的抗体（或抗原）与样本抗体（或抗原）相互结合，加入辣根过氧化物酶孵育，洗去游离的酶标抗原或抗体，加显色剂显色，经酸终止后在450/630nm处测读吸光度值。其中HBcAb指标检测的样本需进行1:40稀释。阴性对照平均吸光度（A）值×2.1作为临界值。以检测孔A值为判断标准，大于临界值为阳性，反之为阴性。观察组给予化学发光分析仪检查，主要为双抗体夹心检测法。所有患者取样后进行标记，培育，反复洗涤使游离抗体和抗原相互分离，将反应液吸入流动室，磁微粒由磁铁吸附到电极表面，再加入三丙胺，电极加电压，启动ECL反应，形成病毒血清标志物，使用雅培i2000仪器进行病毒检测。

1.3 观察指标

观察两组的HBsAb、HBeAb、HBcAb、HBsAg阳性检出率，比较两组检测质指标的符合率。HBsAg阳性为＞0.05lU/mL，HBsAb阳性为＞10mlU/mL，HBeAg阳性为≥1，抗-HbeS/CO阳性≤1。两组检测后的正确率吻合度为符合率，分别记录四项指标的符合率，统计检出正确率，与病理检测向比较。

1.4 统计学分析

本次采用统计学软件SPSS20.0进行数据统计，分别进行计量检测和计数检测，计量检测以均数来表示，计数资料以%来表示，所有数据的统计学意义分析以P＜0.05为标准。即P＜0.05为数据差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 两种方法检测结果比较

两种方法检测后HBsAb符合32例，符合率80%，HBeAb符合33例，符合率82.5%、HBcAb符合37例，符合率92.5%，HBsAg符合35例，符合率87.5%，HBeAg符合率35例为87.5%。

2.2 乙型肝炎阳性检出率

本次80例病理确诊携带乙肝病毒患者，对照组阳性检出33例，检测正确率为82.5%，观察组阳性检出39例，检出正确率为97.5%，观察组明显优于对照组，且数据差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3.讨论

随着技术水平的提高，光学仪器在检查中开始应用，化学发光仪的检出正确率被证明高于ELISA法检查，检查结果影响因素较少，因此结果更加稳定。化学发光分析仪是一种全新的将化学发光与生物发光相结合的检测仪器，主要应于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。检测原理或可看做与放射免疫（RIA）和酶免疫（EIA）的检测原理相似，但该方法使用发光底物自身的发光强度来进行病毒的判定。酶促化学发光系统的原理在于免疫反应中的酶作用于发光底物，也就是酶对检测发光物起到促进作用，使其释放出能量，利用其稳定状态下发射出的光子进行扫描检查。在检测中，检测仪器的光量子产额与酶量成正比，因此可以基于此建立数据曲线来计算被检验样本中的病毒含量，这就是其基本的检测原理。在检验灵敏度上，主要采用HBsAg灵敏度来表示，其中化学发光仪的检测在达到0.1/mL既可以显示阳性，酶标ELISA检测HBsAg的灵敏度需要达到到2ng/mL时才显示出阳性。本次研究对两种方法的样本检查结果进行报道，检查过程正确，检查样本均符合要求，且检查结果与临床其他检查结果保持差异性，但整体结论上保持一致。但缺点在于所选样本的数量不足，需要进一步研究并结合临床其他研究资料。研究结果显示，研究中部分患者的乙型肝炎E抗原的低值总精密度超标，但不影响整体检测，提示与患者的自身E抗原数值偏低有关。仪器选择的是雅培i2000检测仪，定量项目乙型肝炎表面抗体检测范围内的线性良好。所有参考数值均为发现离群值。检查报告数据记录由本院专业医生完成，配套试剂选择合理。另外，本次未对两种仪器检查的假阳性做出对比，仅从病理确诊患者中进行检查。

综上所述，化学发光分析仪检测乙肝标志物的准确率高于ELISA法，且操作方便，误诊率低，可以在临床乙肝病毒检查中推广使用，也可以在医学实验室中使用，推进乙肝病毒的研究。