急性缺血性脑卒中患者血清Sestrin2、神经胶质原纤维酸性蛋白和泛素羧基末端水解酶-1水平变化及预后影响因素分析

陶培洪，孟 涛， 杨 柳， 田 丽

(1.武警重庆总队医院神经内科，重庆 400061；2.重庆市急救医疗中心/重庆大学附属中心医院神经内科，重庆 400014)

急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke，AIS)是临床常见的脑血管疾病，近年来其发病率呈升高趋势，严重影响患者生活质量与身心健康[1]。在中国，每年有近200万脑卒中患者，其中AIS占60.0%以上[2]。急性脑梗死发生时AIS患者脑部出现水肿，导致严重的神经功能缺损。近年来，在AIS病情评估中广泛应用分子生物学指标。神经胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)属于神经系统特异性标志物，在细胞损伤、修复中具有重要作用[3]；泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin C-terminal hydrolase L1,UCH-L1)是在神经元胞体中广泛存在的蛋白，属于特异性神经元蛋白产物；Sestrin2为应急诱导蛋白成员之一，在细胞代谢中具有重要作用，与血脑屏障保护、炎症抑制密切相关[4]。目前，临床对Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平在 AIS中的相关分析报道较少，而且临床也缺乏对AIS患者病情评估和预后评估的良好指标[5]。本研究旨在探讨血清Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平对AIS患者的影响及AIS预后的影响因素，以期为AIS的基础及临床研究提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料选择2018年3月至2020年3月武警重庆总队医院神经内科收治的136例AIS患者为AIS组。纳入标准：(1)符合《2018 版中国急性缺血性脑卒中诊治指南》中AIS的诊断标准；(2)年龄19～79岁；(3)起病后24 h内入院。排除标准：(1)合并肿瘤、颅脑外伤、精神疾病、阿尔茨海默病、免疫系统疾病、风湿性疾病者；(2)有其他系统的重大疾病者。AIS组患者中，男70例，女66例；年龄56～79(66.1±5.8)岁；体质量指数(body mass index，BMI)21.9～25.4(23.8±1.2)kg·m-2。另选择同期健康体检者70例作为对照组，其中男 39例，女31例；年龄 50～79(64.8±7.0)岁；BMI 21.5～25.6(23.7±1.5)kg·m-2。AIS组与对照组患者的性别、年龄、BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。根据美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of health stroke scale，NIHSS)[3]将AIS患者分为轻度组(≤3分)、中度组(4～15分)、重度组(≥16分)。轻度组30例，其中男15例，女15例；年龄56～74(66.2±5.1)岁；BMI 21.9～25.1(24.2±1.1)kg·m-2。中度组69例，其中男36例，女33例；年龄57～78(66.4±5.7)岁；BMI 22.2～25.0(23.6±1.1)kg·m-2。重度组37例，其中男19例，女18例；年龄56～79(66.2±5.5)岁；BMI 22.4～25.4(23.6±1.1)kg·m-2。轻度组、中度组和重度组患者的性别、年龄、BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。根据格拉斯哥预后评分(Glasgow outcome score，GOS)等级标准[4]将AIS患者分为预后良好组(GOS 评分为4、5分者)和预后不良组(GOS评分为1、2、3分者)。预后良好组92例，其中男51例，女41例；年龄56～77(65.9±5.3)岁；BMI 21.9～25.2(23.6±1.0)kg·m-2。预后不良组44例，其中男19例，女25例；年龄56～79(66.7±5.0)岁；BMI 22.3～25.4(24.1±1.1)kg·m-2。预后良好组与预后不良组患者的性别、年龄、BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2 观察指标(1)一般资料采集：回顾性分析AIS患者的病历资料，包括年龄、性别、BMI、入院时的NIHSS评分、出院后3个月的GOS评分、梗死部位、合并疾病。(2)血清学指标：抽取AIS组和对照组受试者入院后24 h空腹静脉血5 mL，2 000 r·min-1离心30 min，分离血清，采用酶联免疫吸附试验测定血清中UCH-L1、GFAP、Sestrin2水平，试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。

2 结果

2.1 对照组与AIS组受试者血清Sestrin2、GFAP及UCH-L1水平比较结果见表1。AIS组患者的血清Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 对照组与AIS组受试者血清Sestrin2、GFAP及UCH-L1水平比较

2.2 轻度组、中度组、重度组患者的血清Sestrin2、GFAP及UCH-L1水平比较结果见表2。轻度组、中度组、重度组患者的血清Sestrin2、GFAP及UCH-L1水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。重度组患者的血清Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平均显著高于轻度组、中度组，差异有统计学意义(P<0.05)；中度组患者的血清Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平均显著高于轻度组，差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 轻度组、中度组、重度组患者的血清Sestrin2、GFAP及UCH-L1水平比较

2.3 AIS患者预后危险因素的的单因素分析结果见表3。AIS患者预后与NIHSS评分、GOS评分、血清Sestrin2水平、血清GFAP水平、血清UCH-L1水平、梗死病灶大小、冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease,CAHD)、心房颤动有关(P<0.05)；与年龄、起病至入院时间、性别、脑梗死部位、高血压、糖尿病及血脂异常无关(P>0.05)。

表3 AIS患者预后危险因素的单因素分析

2.4 AIS患者预后危险因素的多因素logistic分析结果见表4。 NIHSS和GOS评分、梗死病灶大小、心房颤动及血清GFAP、UCH-L1水平是影响AIS患者预后的独立危险因素(P<0.05)。

表4 AIS患者预后危险因素的多因素logistic分析

3 讨论

AIS病情复杂、治疗棘手，患者以脑组织循环障碍为主,是神经内科最为常见的缺血性疾病。动脉粥样硬化在AIS的发病过程中占据了重要地位，一般供应人体脑部血液的是颈动脉，其血流通畅情况决定了脑部血液供应是否充足，但随着动脉粥样硬化性疾病的进展，颈动脉会形成斑块，将动脉堵塞导致AIS发生。研究发现，在AIS患者中炎症反应也是重要的病理过程，炎症介质分泌增多主要与大脑局部的缺氧、缺血等形成的继发性脑损伤有关，多种细胞因子释放增多，形成级联放大反应导致脑损伤加重[6]。目前，对于AIS的治疗原则是早发现、早治疗，改善患者神经功能缺损，常规的诊断方法包括CT、超声等，但是AIS患者病情具有变化快的特点，因此无法对患者早期疾病状况进行评估和判断。有研究发现，AIS患者内皮功能受损，体内存在明显的氧化应激反应与炎症反应[7-8]。因此，通过对AIS患者体内细胞因子进行检测可有效评估疾病的发展及预后。

本研究发现，AIS组患者的血清Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平均显著高于对照组，提示Sestrin2、GFAP、UCH-L1在AIS患者体内显著升高。本研究发现，重度组患者血清中Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平均显著高于轻度组和中度组，中度组患者血清中Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平均显著高于轻度组，提示AIS患者疾病程度越重，体内Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平越高。GFAP是人体星形胶质细胞的骨骼中间丝蛋白，反映了星形胶质细胞生理与病理状况，一旦发生缺氧、缺血等脑组织损伤后会穿透血脑屏障进入到血液循环中[9]。研究证实，人体的星形胶质细胞主要为神经元，附着在邻近或连接大脑和脊髓的毛细血管壁，缺氧、缺血发生后星形胶质细胞数量明显减少，细胞体积更小，细胞损伤与细胞死亡明显增加，而且其对预测基底神经节和脑白质损伤具有重要价值[10-11]。UCH-L1在人神经元中呈高度表达，属于小分子蛋白，其降解产物主要由损伤神经元释放，易通过损伤的血脑屏障，可在脑脊液及血液中保持稳定。刘萍[12]研究发现，UCH-L1在主动脉瘤手术后出现中枢神经系统缺血损伤的患者中呈现显著升高，提示UCH-L1在AIS患者中可能也会出现明显变化。Sestrin2为应激诱导蛋白成员之一。靳文等[13]研究发现，Sestrin2参与了小鼠慢性肾功能不全合并动脉粥样硬化性血栓的形成,其机制可能与血小板活化有关。有研究发现，AIS与氧化应激反应有关，患者脑组织损伤严重会促进Sestrin2分泌，从而调控保护脑组织，减轻梗死对患者造成的损伤[14]。王鹏等[15]研究发现,在AIS患者体内Sestrin2水平越高氧化应激反应越严重，患者神经功能缺损越严重，与本研究结果一致。

本研究发现，AIS患者预后与NIHSS评分、GOS评分、血清Sestrin2水平、血清GFAP水平、血清UCH-L1水平、梗死病灶大小、CAHD、心房颤动有关；进一步多因素logistic分析发现，NIHSS评分、GOS评分、梗死病灶大小、心房颤动、血清GFAP及UCH-L1水平是影响AIS患者预后的独立危险因素；说明血清GFAP、UCH-L1水平能反映AIS患者的预后情况，可作为评估患者预后和了解患者疾病程度的潜在标志物。

综上所述，AIS患者血清中Sestrin2、GFAP、UCH-L1水平较高，且与病情严重程度有关， NIHSS评分、GOS评分、梗死病灶大小、心房颤动、血清GFAP及UCH-L1水平是影响AIS患者预后的独立危险因素。但是本研究中样本量较小，也未能将所有类型AIS患者全部纳入，存在一定局限性，结果可能存在偏差，因此还有待进一步扩大样本量深入分析实验室生物化学指标与各类型AIS之间的关系。