三种麻醉药物对灰仓鼠麻醉效果的分析和选择应用

徐艺玫，乌守巴特，史 深，廖力夫

（新疆实验动物研究中心，乌鲁木齐 830002）

灰仓鼠属于啮齿目，仓鼠科，仓鼠亚科，仓鼠属动物，体重45g左右。广泛分布于中亚地区，栖息生境从荒漠平原至海拔3000m以上的高山草甸均有分布，是新开发的一种实验用动物，广泛应用于鼠疫、包虫病、黑热病等动物实验，具有一定的实际应用价值。选择合适灰仓鼠的最佳麻醉剂量，有利于进行灰仓鼠手术或实验需要，确保灰仓鼠进入麻醉状态，满足手术的需要和确保灰仓鼠的安全，获得准确可靠的实验结果。本文研究了氯胺酮、水合氯醛和氨基甲酸乙酯对灰仓鼠麻醉的效果。

1 材料和方法

1.1 实验动物

普通级灰仓鼠60只，雌雄各半，体重40～60g，由新疆实验动物研究中心提供。

1.2 试剂及仪器

水合氯醛，由中国医药集团上海化学试剂有限公司生产（批号990511），化学纯，用氯化钠注射液配制成10％的水溶液。氨基甲酸乙酯，北京化学试剂公司生产（批号021118），化学纯，用生理盐水配制成10％水溶液［1］。盐酸氯胺酮，上海第一生化药业有限公司生产（批号030905），0.01g/mL；氯化钠注射液、分析天平、电子天平、计时器、点温计及相关器材。

1.3 实验方法［2，3］

通过预实验进行麻醉剂量的测定，下阈剂量为动物皆可进入深麻状态（皮肤疼痛反应消失，眼睑刺激无反应，肌肉松弛，呼吸平顺），上阈剂量低于动物出现死亡的剂量。

通过预试验测定后，将60只灰仓鼠随机分为6组，每组10（♀♂各半）只，分别为A1、A2、B1、B2、C1、C2组，并称量体重，按照以下剂量进行实验，氯胺酮0.1mL/10g（A1）和0.08mL/10g（A2）、水合氯醛0.06mL/10g（B1）和0.04mL/10g（B2）和氨基甲酸乙酯0.16mL/10g（C1）和0.12mL/10g（C2）。

在相同实验室条件下，室温18℃～20℃，相对湿度40％～60％，采用腹腔注射，并分组实验，当药物注射完毕，用秒表开始计时，观测和记录诱导时间、测量维持时间以及恢复自主意识时间，同时，在维持时间用点温计测量直肠温度，记录各个组的观察指标。

1.4 观察和记录指标［4，5］

观察灰仓鼠麻醉期间呼吸、体温等生命体征及其他变化，疼痛反应和眼部情况（瞬目、眼球运动与瞳孔反应）、肢体运动等，测量体温，记录观察指标。

诱导时间：指灰仓鼠注射麻醉药物至出现麻醉状态的时间。

维持时间：指灰仓鼠出现麻醉临床表现至苏醒（爬动站立）的时间。体温在麻醉维持期内测得。

恢复自主意识时间：指灰仓鼠从苏醒到能够完全自由活动的时间

体温：麻醉维持期内测得灰仓鼠的体温（直肠测量）。

临床表现：观察诱导期、麻醉期、恢复期灰仓鼠的表现。

1.5 统计学处理

数据以平均值±标准差表示，利用计算机软件SPSS11.0版进行数据处理。同种麻醉药物不同剂量组进行单因素方差分析。

2 结果

2.1 麻醉诱导期及麻醉维持期的临床表现

2.1.1 诱导期：在麻醉药物注入灰仓鼠腹腔后，起初主动动作，紧接着后半身躯摇晃，后肢前行无力，呈拖行状，反应逐渐迟缓，失去抓咬能力，最后卧地。此期时间的长短，随剂量大小而不同，同一给药剂量动物个体略有差异。在药物起效至进入深麻状态之间，动物受药物影响期间还有一个浅麻状态的表现，灰仓鼠表现为停止爬动，而后呈侧卧状，部分出现角弓反张症状，置仰卧体位后不能自行翻正。之后，用钳夹指间组织尚不能引起趾蹼反射，此时灰仓鼠进入麻醉维持期。

2.1.2 麻醉维持期：动物平静，仰卧或侧卧，痛觉消失，肢体肌肉松弛，眼睁，瞳孔散大。麻醉维持时间因药量的增多而延长。此期的氯胺酮对非疼痛刺激无肢体动作反应，但用钳夹指间组织尚能引起趾蹼反射；水合氯醛和氨基甲酸乙酯对非疼痛刺激无肢体动作反应，钳夹指间组织未能引起趾蹼反射，而且肌肉完全松弛、角膜反射微弱，本期严重刺激都不引起有害反射即为进入深麻状态。

2.2 三种麻醉药物剂量对灰仓鼠诱导时间及麻醉时间

三种麻醉药物均能使灰仓鼠出现麻醉状态，并且麻醉维持时间组与组间有显著差异（P＜0.05）。三种麻醉药物六个剂量组对灰仓鼠的麻醉诱导时间都很短，分别为2.28±0.46min、3.50±0.47min、2.14±0.24min、2.68±0.49min、3.16±0.16min和3.67±0.33min，平均2.90min（2.1～3.7min）；维持时间分别为29.3±3.7min、17.4±2.7min、89.4±3.9min、61.8±3.1min、487.9±9.5min、393.1±7.8min（表1）。

2.3 体温

麻醉维持期内体温与麻醉深度有关，麻醉剂量增加，麻醉深度增加，体温下降，相同的麻醉药物间无显著差异（P＞0.05）。

表1 不同麻醉药物对灰仓鼠的麻醉效果［6］（n=10）Tab.1 Effects of different anesthetic agents in surgery for Cricetulus migratorus（n=10）

3 讨论

实验动物的麻醉在动物实验过程中是相当关键的环节，对于麻醉方法、麻醉剂量及麻醉维持效果时间的把握将影响整个实验进程。氯胺酮、水合氯醛和氨基甲酸乙酯是目前国内较常用的、效果和安全性有保证的麻醉药物。但是三种麻醉药物对灰仓鼠的适用浓度及相关作用时间的报道很少，通过以上三种麻醉药物的麻醉效果测定，为灰仓鼠有关实验的麻醉提供参考依据。氯胺酮麻醉维持时间最短，适用于短期的手术实验，如采血。氨基甲酸乙酯麻醉持续时间最长，适用于昆虫的吸血感染实验，应用在媒介感染的动物模型制备中，并且随剂量的增加，诱导时间减少而麻醉时间相应延长。

3.1 麻醉药物反应

氯胺酮为苯环已哌啶的衍生物，主要是阻断大脑联络径路和丘脑反射到大脑皮层各部分的径路，不引起中枢神经系统深度麻醉，对动物体表有明显镇痛作用注射后灰仓鼠很快进入麻醉状态，肌肉松弛，保护性反射（如角膜反射）仍存在，呼吸平稳通畅，麻醉过程中无呕吐，不需禁食，具有省时省力、操作简便、起效快、但维持时间较短，一般仅15～30min，苏醒期短，苏醒后可立即站立行走；在安全范围内可通过调节剂量来改变麻醉维持期。苏醒后连续观察48h无异常，无一例死亡，安全可靠。氯胺酮适用于实验动物的前期引导麻醉、采血或者短时间手术的麻醉，不适合用作胸腹等手术时间较长的实验［7］。

水合氯醛为无色透明棱状结晶，有穿透性的臭气及腐蚀性苦味。配制后的溶液有沉淀时，可以先在水浴锅中适量加热促其融解。实验发现，水合氯醛在空气中可渐渐挥发，因此配制好的药液除要密封保存之外还要保持新鲜度。麻醉持续时间60～90min左右。水合氯醛对动物的胃肠道、上呼吸道影响较大，高浓度使用时受试动物出现口、鼻腔分泌物增多，有阻碍动物呼吸的状况发生：在苏醒过程中出现蜷缩、不愿爬行等现象。该麻醉药物适用于心肌功能实验和电生理实验［8］。

氨基甲酸乙酯为无色、无味的结晶粉末，易溶于水。使用时用生理盐水配制成10％的水溶液。麻醉时多用腹腔注射，因为氨基甲酸乙酯用作静脉注射时会导致溶血［9］。药物腹腔注射后，肌肉松弛较好，作用温和，可用做深度麻醉。一次给药可维持6～8h麻醉作用，麻醉过程平稳，对循环及呼吸功能影响较小，使用时受试动物出现口、鼻腔分泌物增多。氨基甲酸乙酯适用于呼吸系统、兴奋药物、观察保留自主神经反射活动的麻醉动物实验方面的研究［9］。目前，我们应用在白蛉的吸血感染实验和相关感染动物模型的制备中。

3.2 麻醉效果

良好的麻醉效果是实施动物实验的一个关键，其中最为重要的是采用何种麻醉剂和麻醉方法，即不同动物的麻醉药物的选择和剂量，以及麻醉药物的配比都是动物实验中的重要环节。在对实验动物施行预定的手术操作前，必须首先对动物进行较理想的麻醉，才能保证实验的顺利进行和获得正确的实验结果。影响实验动物麻醉的因素很多，如同一种麻醉剂在相同的剂量下，取不同的质量浓度会有不同的麻醉效果。再如低质量浓度下生效相对缓慢，但对动物组织器官生理上不会造成太大影响；高质量浓度生效快，但同时也增加了麻醉的副作用和死亡率。由于三种麻醉药物各有自己的特点，在做动物实验时要根据各自的实验目的选用不同的麻醉剂，或联合使用麻醉剂，以获得较理想的实验结果。

本实验刻意选取了麻醉药物的特定剂量以掌握它的作用时间，三种麻醉药物维持动物的麻醉时间随浓度升高呈上升趋势，可以满足现在一般动物实验所需的麻醉时间。麻醉剂量的控制十分重要，应选择对实验动物的麻醉效果最适合的剂量，使麻醉产生对实验动物的生理功能影响降低到最低限度，从而可以充分保障实验结果的稳定性。

3.3 注意事项

动物实验麻醉剂的选择要考虑动物品种、实验时间的长短和手术大小三个方面。根据灰仓鼠的体重选择麻醉剂量，氯胺酮应用（0.08～0.1）mL/10g的剂量就可以获得不同的麻醉维持时间；水合氯醛则选择（0.04～0.06）mL/10g的剂量，剂量过大则会导致动物死亡，注射少了起不到麻醉效果；氨基甲酸乙酯则在（0.12～0.16）mL/10g之间比较合适，剂量过大会导致深麻醉时间过长，影响动物的生理状况，从而使实验结果不理想。

麻醉过程中，如果麻醉过浅，动物会因疼痛而挣扎，甚至出现兴奋状态，呼吸心跳不规则，影响观察。麻醉过深，可使机体的反应性降低，甚至消失，呼吸、心跳停止，导致动物死亡。因此，在麻醉过程中必须善于掌握给药的速度和判断麻醉程度，随时观察动物生命体征的变化。

由于动物间存在个体差异，动物对麻醉的敏感性不同，同一剂量药物在不同动物体内反应不同，剂量过大往往对体弱的灰仓鼠产生不良反应，如抑制呼吸造成死亡，剂量过小又不能满足实验需要。因此，在实验过程中要随时观察动物的反应，准确掌握用药剂量，以保证实验顺利进行［10］。

［1］陈良儿，宋良萍.氨基甲酸乙酯家兔麻醉浓度的评价［J］.中华医学写作杂志，2003，10（6）：507-508.

［2］徐平.实验动物管理与使用操作技术规程［M］.上海：上海科学技术出版社，2007：171-181.

［3］邓小明，朱科明.常用实验动物麻醉［M］.上海：第二军医大学出版社，2001，34.

［4］陈丽玲，刘汝文，郑红，等.两种麻醉剂对树鼩麻醉效果的初步观察［J］.实验动物与比较医学，2009，29（3）：194-195.

［5］闫明霞，赵方瑜，刘蕾，等.复合麻醉对免疫缺陷动物麻醉效果的比较［J］.上海交通大学学报（农业科学版），2009，27（2）：108-112.

［6］刘雪萍，谢莉萍，韦祝梅，等.四种麻醉药物对食蟹猴麻醉效果分析和选择应用［J］.中国比较医学杂志，2010，20（2）：45-47.

［7］王红伟，任爱红.氯胺酮临床作用的研究进展［J］.河南科技大学学报（医学版），2009，27（3）：236-238.

［8］沙爱龙.三种麻醉剂对动物组织器官生理特性影响的探讨［J］.北京联合大学学报（自然科学版），2007，2l（3）72-74.

［9］周昆，屈彩芹.动物实验常用麻醉剂的比较与选择［J］.实验动物科学，2008，25（2）：41-43.

［10］单靖华，孙银贵.氯胺酮两种注射方式对小鼠的麻醉效果的观察［J］.潍坊医学院学报，2008，30（6）：561-562.