中药定心胶囊的提取工艺研究

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(1.辽宁中医药大学附属医院，辽宁 沈阳 110032；2.辽宁省中医药研究院，辽宁 沈阳 110034；3.辽宁中医药大学,辽宁 沈阳 110032)

定心胶囊是临床应用治疗心律失常20余年的有效方剂，在《伤寒论》“炙甘草汤”的基础上加减化裁而来，以益气滋阴、活血化瘀、通阳复脉的中医理论为依据研制的中药制剂。本方为临床经验方，由黄芪，人参，甘草，麦冬，酸枣仁等药物组成。笔者对其提取工艺进行了探索。人参和黄芪为方中的主药，其有效成分为人参皂苷和黄芪皂苷，以总皂苷含量为评价指标，采用正交试验设计法，确定了定心胶囊的最佳提取工艺条件。

1 仪器与材料

LC-10P液相泵LC-10UV紫外检测器(大连江申分离科学技术有限公司生产)。色谱柱：Hypersil(大连依利特有限公司提供)5 μ，4.6 mm×200 mm.Spheri gel(大连江申分离科学有限公司提供)5 μ，4.6 mm×200 mm.所用试剂乙腈为色谱纯(山东禹王实业有限公司禹城化工厂)，水为重蒸馏水，其它试剂为分析纯。人参皂苷Rg 1对照品(中国药品生物制品检定所提供，含量测定用，批号0703-9812)；

2 方法与结果

2.1 提取液中总皂苷含量测定

2.1.1 人参皂苷Rg 1标准曲线制备 分别精密吸取1.08 mg/mL的人参皂苷Rg 1对照品溶液20、40、60、80、100和120 μL，分别置干燥具塞试管中，蒸干，分别精密加入5%香草醛-冰醋酸溶液0.2 mL及高氯酸溶液0.8 mL，摇匀，水浴70 ℃显色15 min,流水冷却，分别加入冰醋酸5 mL，摇匀，在540 nm波长处测定吸收度，计算，得标准曲线方程为：C=121.98A+5.70，r=0.999 2。

2.1.2 供试液的制备 精密吸取提取液适量，水浴蒸至无醇味，加水稀释至50 mL，用水饱和正丁醇提取3次(30，30，20 mL)，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2次，每次50 mL，弃去氨试液，正丁醇液续用水洗涤2次，每次50 mL，弃去水洗脱液，正丁醇液水浴蒸干，残渣加甲醇使溶解，并定容于5 mL容量瓶中。精密吸取各供试液适量，分别置干燥具塞试管中，蒸干，按“标准曲线制备”项下操作，测定吸光度，计算，得出各次试验提取液中总皂苷含量。

2.2 正交实验设计

2.2.1 药材提取正交试验因素、水平的确定 根据文献资料报道:总皂苷在水及乙醇溶液中有良好的溶解性，因此在正交实验中，选择水及乙醇回流提取方法。在预实验中，以提取液中总皂苷含量为考察指标，对提取次数进行选择，结果发现:50%乙醇提取2次与提取3次提取液中总皂苷含量相差无几，故把提取次数限定为2次,同时以提取溶媒、加入量、提取时间等为考察因素，以提取液总皂苷含量为考察指标，按L9(3)4正交试验表进行实验，根据实验数据的方差分析结果确定药材提取的最佳工艺。正交试验因素水平表见表1。

表1 人参、黄芪等药材提取正交试验因素水平表

2.2.2 试验方法及实验结果 称取人参100 g，黄芪200 g，甘草200 g，麦冬200 g，酸枣仁200 g，共计9分，每分900 g，分别按正交试验表进行试验，提取液过滤,合并滤液,量取体积,按上述方法分别测定提取液中总皂苷含量,其正交试验安排表及结果见表2。

从方差分析结果可以看出，提取溶媒(A)对提取液中总皂苷含量有显著性影响，加入量(B)及提取时间(C)无显著性影响，从节约生产成本角度， 拟选择定心胶囊是由生地黄、人参、黄芪、麦冬、甘草、酸枣仁、丹参、红花等8味中药组成的复方制剂，方以炙甘草汤加黄芪补益心气，气血旺盛则血脉充盈，不续之脉得以复生，达到益气滋阴养血复脉；加丹参、红花等活血化瘀通脉，使炙甘草汤药力更猛，直达病所，并且可以预防房颤血栓栓塞并发症的发生。诸药合用有益心气助心阳，滋心阴养心血，通血脉复心脉之效，使心脉平复房颤减少或消失。经现代药理学研究，定心方有很好的抗心律失常的作用。

表2 人参、黄芪等药材提取正交试验表及试验结果

表3 人参、黄芪等药材提取总皂苷方差分析结果

3 讨论

定心胶囊为中药复方制剂，考察生产工艺的优劣之一，是通过考察制剂中的有效成分含量进行的。该复方中主药人参和黄芪的有效成分为人参皂苷和黄芪皂苷，因此将方中的有效成分总皂苷含量作为优选正交方案的指标，可以较好的反映本品的质量。本试验筛选的定心胶囊优化工艺为A1B3C3,即药材加水8倍量和6倍量提取2次,每次提取1 h。该工艺稳定可行，可作为定心胶囊生产的提取工艺。本方制备工艺简单,生产成本低,适合医院制剂生产。经本院临床使用,疗效确切,服用方便,深受患者欢迎。