小鱼眼草化学成分研究

胡美忠 何 骞

1.铜仁职业技术学院，贵州 铜仁 554300;2.贵州大学生命科学学院，贵州 贵阳 550025

小鱼眼草 (Dichrocephala benthamii Clarke)为菊科鱼眼草属植物，一年生草本，分布于湖北，广西，四川，贵州，云南等省区[1]，性苦、凉，具清热解毒，祛风明目功能。主治肝炎、小儿消化不良、小儿感冒发烧、肺炎、痢疾、疟疾、牙痛、夜盲症等[2]。

小鱼眼草在民间被广泛地用于保肝、抗炎、抗菌、治疗止血、镇痛和外伤等方面的治疗，疗效较好，然而对小鱼眼草化学成分研究目前尚少，为了更好深入研究小鱼眼草的药用价值，阐明其药用成分及机理，笔者对小鱼眼草粗提物浸膏的进行分离纯化，得到7种化合物，鉴定出其中4种，分别为没食子酸 (Ⅱ)，山奈酚 (Ⅵ)，邻苯二甲酸二丁酯 (Ⅴ)，槲皮素(Ⅶ)，其中没食子酸 (Ⅱ)，山奈酚 (Ⅵ)，槲皮素 (Ⅶ)均是首次从小鱼眼草里分离纯化出。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 材料 小鱼眼草 (Dichrocephala benthamii Clarke)购自于贵州省贵阳市药材农贸市场，洗净晒干后粉碎成100目左右细粉备用。

1.1.2 仪器 显微熔点测定仪 (X-4)，北京泰克仪器有限公司;超导脉冲付里叶变换核磁共振仪 (NOVA-400型)，美国瓦里安公司;Sephadex LH-20葡聚糖凝胶，瑞典Amersham公司产;气质联用仪，美国惠普公司 (Hcwlctt Packard)HP-6890/HP5973 GC-MS。

2 提取分离

干燥小鱼眼草 (Dichrocephala benthamii Clarke)4.5千克粉粹，85%乙醇室温浸提4～5次 (每次5天)，浸提液减压浓缩回收溶剂，得浸膏，浸膏加适量水溶解，静置于冰箱过夜后过滤，滤液分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液减压浓缩，得到石油醚部分，氯仿部分 (12g)，乙酸乙酯部分 (30g)和正丁醇 (130g)部分。

氯仿部分的分离 氯仿部分经硅胶拌样上柱 (硅胶颗粒:100～200目，柱4.5cm×65 cm)，石油醚﹕乙酸乙酯(100∶1～0∶1)梯度洗脱，薄层板检测，合并相同组分后浓缩再经硅胶柱层析，重复几次，相同组分结晶和重结晶，最终从氯仿部分得到4个单体。Ⅰ (32mg)白色羽毛针状晶体，mp281― 283℃;Ⅱ (15mg)为无色针状晶体，mp232― 234℃;Ⅲ (40mg)为白色状晶体，mp214―216℃;Ⅳ (5mg)为无色针状晶体，mp236-238℃。

乙酸乙酯部分的分离纯化乙酸乙酯部分经硅胶拌样上柱(硅胶颗粒:100-200目，柱5.5cm×90cm)，氯仿﹕甲醇(100∶0―0∶1)梯度洗脱后，经AB―8大孔树脂及LH―20凝胶反复层析，在乙酸乙酯部分得3个单体，Ⅴ (21mg)浅黄色油状;Ⅵ (17mg)为黄色粉末状晶体，mp276―278℃;Ⅶ(11mg)为黄色粉末状晶体，mp308―310℃。

3 化合物结构鉴定

分离出7种化合物，经过理化方法及光谱分析鉴定了其中4个化合物。

化合物 (Ⅱ):无色针晶状 (氯仿)，mp232―234℃，易溶于氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇，MS，m/z:170，153，141，125，113，96，79，63，51，1H-NMR(CD3OD)，δ:7.03(2H，s);13C-NMR(CD3OD)，δ:169.10(C=O)，145.05(C-3，C-5)，138.22(C-4)，120.66(C-1)，108.96(C-2，C-6)。以上波谱数据和文献报道没食子酸基本一致[3-4]，因此，推测该化合物为3，4，5―三羟基苯甲酸，即没食子酸 (Gallic acid)。

化合物 (Ⅵ):黄色粉末状 (甲醇)，mp276―278℃，易溶于甲醇、乙醇，微溶于乙酸乙酯，难溶于氯仿，几乎不溶于冷水，盐酸-镁粉反应显淡紫红色，三氯化铝显色后在紫外灯下观察为黄绿色荧光，Molish反应呈阴性，1HNMR(CD3OD)，δH:8.03(2H，d，H-3 ＇、5 ＇)，6.89(2H，d，H-2＇，6＇)，δH:6.38(1H，d，H-8)，6.16(1H，d，H-6)，1H-NMR(CD3OD)，03(2H，dd，H-3＇，5＇)，6.89(2H，d，H-2＇，6＇)，6.38(1H，d，H-8)，6.16(1H，d，H-6)。EI-MS(M/e):286(M+)、285、257、229、194、143、121、101、81、55。13C-NMR(CD3OD)，δC:115.14，129.31，174.00，97.93，93.11，128.52，114.96，97.90，164.23，65.32，47.83 该化合物的理化性质与文献报道的山奈酚的理化性质基本一致[5-6]，且EI-MS经微机检索标准图谱库与山奈酚基本一致。故鉴定为山奈酚 (Kaempferol)。

化合物 (Ⅴ):浅黄色油状物 (甲醇)，易溶于乙酸乙酯、乙醇、甲醇，微溶于氯仿、乙醚，1HNMR(CD3OD)，δ:7.69(2H，d，H-3，6)，7.51(2H，t，H-4，5)，4.28(2H，t，H-1＇)，1.42(2H，m，H-2＇)，0.98(2H，m，H-3＇)，0.88(3H，t，H-4＇)，13CNMR(CD3OD)δ:167.8(C=O)，132.3(1，2-C)，131.0(4，5-C)，128.9(3，6-C)，77.3(1＇-C)，30.65(2＇-C)，29.7(3＇-C)，13.8(4＇-C)。以上数据与文献数据基本一致[1，7-8]，可以确定该化合物为邻苯二甲酸二丁酯 (Dibutyl phthalate)。

化合物 (Ⅶ):黄色粉末 (甲醇)，mp308～310℃，溶于乙醇、甲醇和稀碱溶液，盐酸-镁粉反应显红色，三氯化铝反应显黄绿色荧光，NaOH水溶液显深黄色，Molish反应呈阴性。1H-NMR，6.16(1H，d，J=2.0Hz)，6.37(1H，d，J=2.0Hz)，7.72(1H，d，J=2.0Hz)，7.62(1H，dd，J=1.6，2.0Hz)，13C-NMR，δC:147.5，136.7，176.7，157.7，99.0，164.8，94.3，161.8，104.2，123.5，115.6，145.6，148.1，121.4 图谱数据与文献的数据基本一致[9-10]。故鉴定为槲皮素 (Quercetin)。

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