HPLC法测定芩斛利咽合剂中芍药苷的含量

陈 静

（河南省商丘市第一人民医院药剂科，商丘476000）

HPLC法测定芩斛利咽合剂中芍药苷的含量

陈 静

（河南省商丘市第一人民医院药剂科，商丘476000）

目的 建立HPLC法测定芩斛利咽合剂中芍药苷含量的方法。方法 采用Eclipse XDB-C18色谱柱，乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）为流动相；流速1.0ml·min-1；检测波长230nm。结果 芍药苷在0.5165～2.066μg范围内线性关系良好（r＝0.9995），平均回收率为97.98%，RSD＝1.01%（n＝6）。结论 本方法操作简便，专属性强，结果准确，可用于芩斛利咽合剂的质量控制。

芍药苷；高效液相色谱法；含量测定

芩斛利咽合剂是由黄芩、石斛、赤芍、木蝴蝶、麦冬、地黄等药材加工制成的医院制剂，具有清热解毒，化痰利咽之功效，主治急慢性咽炎。［1］现行质量标准中未收载含量测定项目，不能有效的控制药品质量。赤芍为方中主药，芍药苷是赤芍的主要有效成分［2］，本文以芍药苷为指标成分，建立了芩斛利咽合剂中芍药苷的高效液相测定法，为该制剂的质量控制提供了客观的含量评价方法。

1 仪器与试药

1.1 仪器 Agilent 1260型高效液相色谱仪，AUW-220D电子分析天平，5210DT超声处理器。

1.2 试药 芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110736-200934）；乙腈为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂为分析纯。芩斛利咽合剂（由柘城县人民医院提供，批号：130219、130416、130711）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 ×150mm）。

流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14：86）为流动相［3］；流速1.0ml·min-1；检测波长230nm；进样量20μl；理论板数应不低于2000。

2.2 线性关系考察 取芍药苷对照品约10mg，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。按照“2.1”项色谱条件，分别进样5、8、10、12、15、20μl，记录芍药苷峰面积值，以峰面积积分值（Y）对对照品浓度（X）进行线性回归，得回归方程：Y＝285.34X＋106.33r＝0.9995。结果表明，芍药苷对照品浓度在0.5165～2.066μg范围内与峰面积值呈良好的线性关系。

2.3 对照品溶液的制备 取芍药苷对照品约10mg，精密称定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇适量，振摇使完全溶解后，稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.4 供试品溶液及阴性对照溶液的制备 精密量取本品约2ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇35ml，超声处理30分钟，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取缺赤芍的其他味药按处方工艺制成阴性制剂，按上述方法制备阴性对照溶液。

2.5 干扰试验 取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各20μl，按照“2.1”项色谱条件，分别进样测定，记录色谱图，结果见图1。

图1 高效液相色谱图1、芍药苷

2.6 精密度试验 取同一对照品溶液，重复进样5次，每次10μl，记录峰面积，RSD＝0.89%（n＝5），表明精密度良好。

2.7 稳定性试验 取同一对照品溶液，分别在0、1、2、3、4、5、6h进样测定，RSD＝0.95%，供试品溶液在6小时内峰面积基本稳定。

2.8 加样回收率试验 精密量取6份已知含量为1.163mg／ml的样品1.0ml，置50ml量瓶中，分别精密加入浓度为0.1163mg／ml对照品溶液10ml，按照“2.4”项下供试品溶液制备方法制备溶液，按照“2.1”项色谱条件，分别测定，结果见表1。

表1 加样回收率试验结果（mg，%）

2.8 样品测定 取3批样品，按“2.4”项下方法制备供试液，各进样10μl，按外标法计算芍药苷的含量，结果见表2。

表2 3批样品中芍药苷的含量（mg／ml）

3 讨论

采用高效液相色谱法测定芍药苷的含量报道很多［3-4］，但供试品溶液的提取方法比较繁琐，本方法采用超声提取，操作简便，具有较强的专属性，回收率好，能够更有效的控制该制剂的质量。

［1］河南省食品药品监督管理局．河南省医疗机构制剂标准［S］．批件号：2004Z00585．

［2］国家药典委员会．中国药典2010年版．一部［S］．北京：化学工业出版社，2010：147-148．

［3］马琳，李勇军，何迅．高效液相色谱法测定辛芍注射液中芍药苷含量［J］．中国药业．2008．17（11）：22-23．

［4］罗艳，刘皈阳，马建丽，等．高效液相色谱法测定养血醒脑口服液中芍药苷的含量［J］．中国药物与临床．2012，12（8）：1054-1055．

HPLC Determination of Paeoniforin in Qinhuliy an Liquid

Chenjing
（Pharmacy department，Shangqiu city the first people's hospital，Shangqiu，476000，China）

Objective To establish a HPLC method to determination of paeoniforin in Qinhuliyan Liquid．Methods The chromatographic system consisted of C18 column，using acetonitrile－0.1%phosphate solution（14：86）as mobile phase．The content was detected at a waveleng of 230nm，the flow rate was 1.0ml·min-1．Results The paeoniforin have a good tincar rolatim in the range of 0.5165－2.066μg（r＝0．9995），the average recovery was 97.98%and RSD＝1.01%（n＝6）．Conolusion The established method is accuracy，sensitive and simple．It can be used for quality control of Qinhuliyan Liquid．

Paeoniforin；HPLC；Determination

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.05.100

1672-2779（2014）-05-0158-02

杨 杰 本文校对：刘晓云

2013-11-11）