保和丸质量控制方法研究

李先佳

（河南省漯河医学高等专科学校生化教研室，漯河462002）

保和丸质量控制方法研究

李先佳

（河南省漯河医学高等专科学校生化教研室，漯河462002）

目的 建立保和丸质量控制方法。方法 薄层色谱鉴别山楂，半夏，连翘，HPLC测定连翘苷含量。结果 薄层图谱斑点清晰，阴性无干扰。连翘苷在0.01～0.1mg／mL范围线性关系良好，平均加样回收率99%，RSD为1.01%。结论 方法简便，重复性好，可用于制剂的质量控制。

保和丸；薄层色谱；连翘苷；HPLC

保和丸是纯中药制剂，含有山楂（焦），六神曲（炒），半夏（制），茯苓，陈皮，连翘，莱菔子（炒），麦芽（炒）等，具有消食、导滞、和胃作用，用于食积停滞，脘腹胀满，嗳腐吞酸，不欲饮食［1］。为了保证产品质量，本文采用薄层色谱对保和丸中的山楂，半夏，连翘进行了定性，高效液相色谱法（HPLC法）对连翘中连翘苷的含量进行定量。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪（岛津LC-20AT），UV-1700光度计（岛津）；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。

保和丸（甘肃天水岐黄药业有限责任公司，国药准字Z62020350）；半夏对照药材，连翘对照药材；山楂对照药材；盐酸麻黄碱对照品；连翘苷对照品；熊果酸均购自中国药品生物制品检定所；甲醇、乙睛为色谱纯；其他试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 薄层色谱

2.1.1 山楂 保和丸适量捣碎，秤取约4g，加乙酸乙酯50ml超声辅助提取2h，提取2次，合并提取液，蒸干，甲醇5mL溶解得供试液。秤取熊果酸1mg，加入氯仿5ml，超声助溶，得对照品溶液。按处方比例取除山楂的药材，按照供试液工艺制备阴性对照溶液。毛细管各吸取2μl，点于硅胶板，以石油醚－丙酮（3∶1）展开，取出晾干，喷10%硫酸无水乙醇溶液，100℃加热。结果供试液、对照品溶液相同的位置显示紫色的斑点，而阴性对照无此现象。

2.1.2 半夏 保和丸适量捣碎，秤取约4g，加浓氨水1ml，乙醚50ml，超声辅助提取2h，提取2次，滤过，合并滤液，蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，即得供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品1mg，加甲醇5ml，超声助溶，得对照品溶液。按处方比例取除半夏的药材，按照供试液工艺制备阴性对照溶液。毛细管各吸取2μl，点于硅胶板，以三氯甲烷-甲醇-浓氨水（40∶7∶1）展开并取出晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热。结果紫外灯365 nm下，供试品溶液、对照品溶液在相同的位置显示黄绿色的斑点，而阴性对照无此现象。

2.1.3 连翘 保和丸适量捣碎，秤取约4g，加甲醇50ml超声辅助提取2h，提取两次，合并提取液，浓缩至原体积的1／6，氯仿萃取，蒸干，10ml甲醇溶解，得供试品溶液。取连翘苷对照品1mg，加甲醇5ml，超声助溶，得对照品溶液。按处方比例取除连翘的药材，按照供试液工艺路线制备阴性对照溶液。毛细管各吸取2μl，点于硅胶板，以正己烷-氯仿-甲醇（4∶2∶1）为展开剂，展开并取出晾干。喷10%硫酸乙醇液，加热至斑点显色清晰。结果，供试品溶液、对照品溶液在相同的位置显示相同的颜色，而阴性对照无此现象。

2.2 连翘苷含量测定

2.2.1 对照品溶液 精密秤取连翘苷1mg，置于10ml的量瓶，加甲醇5ml溶解，甲醇定容，得标准品溶液，备用。

2.2.2 供试品溶液 保和丸适量捣碎，秤取约4g，加入70%甲醇50ml，超声辅助提取3h，提取3次，合并提取液，浓缩并转移至25ml的量瓶中，70%甲醇定容，即得供试品溶液。

2.2.3 色谱条件 色谱柱：VP-ODS cI8柱（4.6mm×150mm）；流动相：乙腈-甲醇（16∶55）；流速：1mL／mim；柱温：25℃；检测波长：220nm；进样量：20μL；灵敏度0.5 AUFS。连翘苷理论塔板数＞10000。

图1 色谱图

2.2.4 专属性试验 按处方比例取除连翘的药材，制备阴性对照溶液。按上述色谱条件对照品、供试品、阴性对照溶液进行测定，结果见图1。供试品与对照品溶液的色谱图均有连翘苷吸收峰，而阴性对照无对应的吸收峰，显示保和丸中连翘苷的专属性较好。

2.2.5 线性关系 吸取连翘苷对照品0.5，1，2，3，4，5ml于5ml量瓶中，甲醇定容，得浓度不同的对照品溶液，按上述色谱条件进样，记录峰面积，以峰面积积分值（y）为纵坐标，对照品浓度（X）为横坐标线性回归，得回归方程Y＝21361x＋1762，相关系数r＝0.9998，表明连翘苷在0.01～0.1mg／mL范围呈现线性关系良好。

2.2.6 精密度试验 精密吸取对照品溶液1ml于5ml的量瓶中，甲醇定容。进样连续测定5次，测定连翘苷峰面积，结果连翘苷峰面积RSD值为0.11%，显示仪器精密度良好。

2.2.7 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，分别在0、2、5、20、12、24h进样测定面积，结果连翘苷峰面积RSD值为0.21%，说明连翘苷在24h内稳定性良好。

2.2.8 重复性试验 秤取同一样品5份制备供试品溶液，进样测定连翘苷峰面积，计算得RSD值为0.13%，表明方法重复性良好。

2.2.9 加样回收率 精密秤取已知含量（0.58mg／g）的保和丸6份，每份2g，分别加入连翘苷对照品0.58、0.93、1.39mg，制备供试品溶液，按照色谱条件测定，每个样品平行测定3次，计算加样回收率。结果连翘苷平均回收率为99.7%，RSD为1.01%。

2.2.10 样品含量测定 取样品3批，按照供试品溶液制备方法制备，按照色谱条件测定，计算3批样品中连翘苷的含量平均含量为0.58mg／g。

3 结论与讨论

通过薄层色谱显示，保和丸中的山楂的熊果酸，半夏中的盐酸麻黄碱，连翘中的连翘苷，各个样品在对照品相应位置上均有相同颜色的斑点，而阴性对照品没有干扰，展开和分离效果较好［2］。

本文建立了高液相色谱法测定保和丸中连翘苷含量的方法，采用乙睛、甲醇等极性有机溶剂作为流动相，洗脱效果良好，成分均可得到较好的基线分离，方法特异性强、前处理简单、重复性好，可以为保和丸质量控制提供参考。

［1］国家药典委员会，中国药典．一部［S］．北京：化学工业出版社，2010：537-538．

［2］胡旭涛．保和丸的质量控制［J］．中医临床研究，2011，3（10）：44-45．

Methods to Bao he Pill Quality Control

LiXianjia
（Luohemedical college，Henanprovince，Luohe，462002，China）

Objective To establish the quality control method of Baohe Pills．Methods Thin layer of chromatography（TLC）distinguished hawthorn，pinellia，forsythia，the content of phillyrin was determined by HPLC．Results the TLC spots developed were fairly clear，negative with no disturbance，Phillyrin in 0.01～0.1mg／mL range of linear relationship was good，the average recovery was 99%，RSD 1.01%Conclusion The method is simple，reproducible，which can be used for the quality control of the preparation．

Baohe Pills；Thin layer chromatography；Forsythin；HPLC

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.05.101

1672-2779（2014）-05-0160-02

杨 杰 本文校对：任丽平

2013-11-29）