奶牛不同发育时期乳腺组织IGF-I及其受体的表达与定位

崔英俊，李庆章

(东北农业大学 乳品科学教育部重点实验室，哈尔滨150030)

0 引 言

胰岛素样生长因子家族(Insulin-like growth factor family)是乳腺生长发育的重要调节因子。成熟IGF-I由70个氨基酸残基组成，相对分子质量约7.5 ku，是生长激素 (Growth factor，GH) 依赖的碱性单链蛋白[1]。IGF-I主要由垂体GH刺激肝产生，GH也可以刺激乳腺分泌IGF-I，并通过IGF-I对乳腺发育起作用。IGFI作于乳腺上皮细胞上的IGF-IR从而介导细胞的生存和增殖[2-3]，IGF-I缺失时乳腺不发育[4]。目前国内外对胰岛素样生长因子家族成员的研究多以啮齿类动物为研究对象，且多局限于RNA水平。本研究旨在阐述IGF-I及其受体IGF-IR在奶牛乳腺发育、泌乳及退化过程中表达定位的动态变化，揭示IGF-I及其受体表达变化与乳腺发育及泌乳功能的关系。

1 实 验

1.1 实验动物与样品采集

本研究以健康荷斯坦奶牛为实验动物，购自黑龙江省畜牧业科技园区。所选用的奶牛生理状态均正常，没有疾病记录，泌乳期奶牛乳腺健康，产奶量正常。奶牛舍饲，舍温18℃，通风干燥，采光良好，自由采食饮水。

实验动物按照青春期(Virgin，V)、妊娠期(Pregnancy，P)、泌乳期(Lactation，L)、退化期(Involution，I)4个时期共12个时点进行取样。分别为：青春期12个月(V12m)、青春期14个月(V14m)；妊娠期2个月(P2m)、妊娠期4个月(P4m)、妊娠期6个月(P6m)；围产前期(产前7日，Peripartum)；泌乳期第7日(L7d)，泌乳期第50日(L50d)，泌乳期第140日(L140d)，泌乳期第280日(L280d)；退化期第3日(I3d)，退化期第30日(I30d)。 每个采样时点选取3头奶牛做平行实验，每次试验至少重复3次。在预定取样时点，乳房中部消毒，按常规手术切取少量乳腺组织块，获取组织样本。获取的组织样本在30 min内于液氮速冻，保存于-80℃低温冰箱备用。……