森林脑炎灭活疫苗的安全性和免疫原性研究

何淑云，付 博，范学斌，隋 红，王轶文*

(1.吉林市疾病预防控制中心，吉林 吉林132001；2.长春生物制品研究所)

森林脑炎，又称蜱传脑炎(tick-borne encephalitis，TBE)，是一种由森林脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus，TBEV)感染引起的急性中枢神经系统传染病，为自然疫源性疾病，主要分布于北温带[1]。我国是森林脑炎的高发区之一，其中东北地区是主要的自然疫源地[2]。疫苗接种是预防森林脑炎发生的最有效措施，我国上世纪中期便已开展森林脑炎疫苗的研发工作，但当时的疫苗存在副反应较大和免疫效果不理想等问题。2004年，长春生物制品研究所成功研制了新型的森林脑炎灭活疫苗，该疫苗去除了大部分异源蛋白、提高了抗原含量，以降低副反应和提升免疫效果[3]。本研究对此新型森林脑炎灭活疫苗开展效果评价，进一步观察和评估疫苗的安全性和免疫原性。

1 资料与方法

1.1 观察对象

以知情同意、自愿参加为原则，选择吉林地区8-60周岁健康人群，无疫苗过敏史、一年内无明确的森脑疫苗接种史、无相关疾病史、符合临床研究入选/排除标准者作为观察对象。

1.2 疫苗及接种方法

森林脑炎灭活疫苗来源于长春生物制品研究所有限责任公司，每支1 ml，批号20110703,有效期2013年4月7日。每名观察对象均接种2针，于0天、14天各注射本疫苗1剂，上臂三角肌附着处肌内注射。

1.3 主要试剂

森林脑炎IgG ELISA试剂盒为德国IBL公司产品。

1.4 安全性观察

在每剂疫苗接种后30 min、24 h、48 h和72 h对观察对象进行安全性观察，记录接种后反应情况。疫苗反应判断标准参照国家食品药品监督管理总局2005年发布的《预防用疫苗临床试验不良反应分级标准指导原则》执行。

1.5 免疫原性评价

分别于疫苗接种前及免疫后28天、6个月、1年采集静脉血样本3 ml，用森林脑炎IgG ELISA试剂盒测定血清IgG抗体水平，判断阳性结果，计算抗体阳性率。

样本结果判断：

IgG抗体浓度> 126 VIEU/ml 为抗体阳性

抗体阳性率=IgG抗体阳性的样本数/总样本数×100%

1.6 统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析。

2 结果

2.1 基本情况

本次研究纳入安全性观察的共2000人，共观察了3900剂次，第一剂观察了2000人，第二剂观察了1900人。纳入免疫原性评价的共571人。

2.2 安全性观察

2000名观察对象首剂接种，局部反应9例,全身反应10例，第2剂接种，局部反应7例，全身反应2例，AEFI共28例，总报告发生率0.73%。除3例AEFI发生在24-48 h内(恶心、肌肉痛及疲劳乏力各1例)，其它均发生在接种后24 h内，观察对象中有1例不良反应症状持续3天(局部疼痛)，其它均在48 h内恢复正常(表1)。

表1 AEFI发生例数和报告率

注：6例局部红肿病例均为轻度红肿，直径均小于1.5 cm。3例发热病例分别为轻度发热和中度发热，体温分别是37.3℃和38.4℃。

2.3 免疫原性评价

森林脑炎灭活疫苗免疫前，571份血清中抗体检测GMC为 47 VIEU/ml，血清IgG抗体浓度最低为 0 VIEU/ml，最高为 124 VIEU/ml。

免疫28天后采血检测，共收集506份血标本，经检测抗体阳性486人，阳转率为96.05%，GMC为 753 VIEU/ml。抗体应答水平上升明显，血清IgG抗体浓度最低为 37 VIEU/ml，最高为 3190 VIEU/ml。

免疫6个月后采血检测，共收集502份血标本，抗体阳性434名，阳性率为86.45%，GMC为332 VIEU/ml。血清IgG抗体浓度最低为 42 VIEU/ml，最高为 3061 VIEU/ml。

免疫1年后采血检测，共收集502份血标本，抗体阳性386名，阳性率为76.89%，GMC为 225 VIEU/ml。血清IgG抗体浓度最低为 8 VIEU/ml，最高为 2225 VIEU/ml(表2)。

表2 不同采血时间抗体阳性率和GMC比较

3 讨论

本次研究安全性观察结果显示，AEFI总报告发生率为0.72%，多数属于轻度反应，自觉症状多在24小时内消失，皮疹在24-48小时消失 ，全部报告病例均在72小时内恢复正常，一般反应发生率0.67%,异常反应发生率0.05%，无严重异常反应发生。不良反应轻微、副反应发生率低，具有良好的安全性。

免疫原性评价结果显示，接种后28天，抗体阳性率达96.05%，GMC为 753 VIEU/ml，最高滴度达 3190 VIEU/ml；接种后6个月，抗体阳性率为86.45%，GMC为 332 VIEU/ml，最高滴度为 3061 VIEU/ml，抗体应答水平有下降趋势；接种后1年，抗体阳性率为76.95%，GMC为 225 VIEU/ml，最高滴度为 2225 VIEU/ml，血清IgG抗体浓度和阳性率有明显下降。

研究结果表明，森林脑炎抗体在人群中的自然阳性率很低，存在感染后造成流行的风险[4]，因此接种疫苗为预防和控制森林脑炎发病的最有效措施之一。森林脑炎灭活疫苗应用于人群，体液免疫效果较好，接种后抗体阳转率和几何平均滴度均明显升高，且安全可靠，适用于8-60岁健康人群进行预防性接种。同时我们注意到，观察对象接种疫苗1年后，抗体水平呈现明显下降。为保持体内抗体水平的有效浓度，形成持续的免疫保护屏障，建议在基础免疫1年后，实施一剂次加强免疫。

参考文献：

[1]陈 育,张晓光,韩淑祯,等.森林脑炎诊治现状[J].当代医学,2012,18(8):29.

[2]赵俊伟,王环宇,王 英，等.中国蜱传病原体分布研究概况[J].中国媒介生物学及控制杂志,2012,23(5):445.

[3]宋宗明,董关木,洪成龙,等.森林脑炎纯化疫苗实验室检定及人体Ⅰ期临床观察[J].中国生物制品学杂志,2004,17(6):412.

[4]张志强,吴益民,冯立,等.东北部分地区人群森林脑炎病毒抗体调查[J].沈阳部队医药,2006,19(2):112.