新生儿溶血病血清学检验结果的分析

江永承 谭尚华

（1 广东德庆县妇幼保健院，广东 德庆 526600；2 广东省肇庆市第一人民医院，广东 肇庆 526040）

新生儿溶血病（HDN）临床上是指由于母婴血型不合，胎儿的血液随母体血液循环进入母体后，导致母体产生相应的IgG抗体[1]，产生的IgG抗体岁母体血液循环进入胎儿体内并作用于胎儿的红细胞而产生同种被动免疫性疾病。HDN可导致因而出现黄疸、水肿、贫血，严重者会导致新生儿出现胆红素脑病，危及新生儿的生命[2]。HDN严重影响着新生儿的正常生长发育及生命安全，因此如何有效的进行HDN的治疗具有重要的意义。临床诊断是疾病治疗的前提，准确的临床诊断可有效的提高疾病的治疗效果，基于此，笔者进行了HDN血清学检查的相关临床研究，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2009年6月至2012年3月我院接受分娩的O型血产妇108例，年龄1～30 d，平均年龄（16.4±4.7）d，产妇所产新生儿临床表现为高胆红素血症，疑似HDN，按照新生儿血型不同，依次分为A型血组（A组）和B型血组（B组），其中A型血组新生儿50例，1～10 d新生儿14例，10～20 d新生儿26例，20～30 d新生儿10例，男性新生儿24例，女性新生儿26例；B型血组新生儿58例，1～10 d新生儿22例，10～20 d新生儿22例，20～30 d新生儿14例，男性新生儿30例，女性新生儿28例，两组新生儿在年龄构成比及性别构成比方面无显著性差异（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 检测仪器

Grifols专用孵育器（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），Dianafuge-232专用离心机（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），HH.W21-420电热恒温（上海悦丰仪器仪表有限公司）。

1.2.2 检测试剂

Diana-Ge1 Coombs卡（西班牙Diagnostic Grifols，S.A公司），1%A、B、O标准红细胞（上海医药生物公司），生理盐水。

1.2.3 血液样品的采集

两组新生儿各取1管血液样品，使用乙二胺四乙酸作为抗凝剂。

1.2.4 检查方法

1.2.4.1 直接抗人球蛋白试验

取各组新生儿红细胞适量，使用生理盐水进行洗涤，洗涤3次，除去上清液，制备1%红细胞悬浮液（取洗涤后红细胞5 µL，加入生理盐水500 µL），于Diana-Ge1 Coombs检测卡的一个小孔内加入1%红细胞悬浮液50 µL，离心9 min，取出，直接观察结果。

1.2.4.2 游离试验和放散试验

对Diana-Ge1 Coombs检测卡的6个小孔进行标记，前三个孔用于游离试验，依次放入A、B、O标准红细胞50 µL，再各放入患儿血清50 µL。放散试验（ABO血型系统采用热放散法、Rh血型系统采用醚放散法），参照《全国临床检验操作规程》进行操作[3]，于后三个小孔依次放入A、B、O标准红细胞50 µL，再各放入患儿血清50 µL，将Diana-Ge1 Coombs检测卡置于赋予相中，37 ℃孵育15 min，离心9 min，取出，直接观察结果。

表1 ABO血型系统不同血清学检查结果比较

1.2.5 检查结果判定

阳性：红细胞分布在凝胶中或留在微柱上端；阴性：红细胞分布于微柱的底部或出现沉降。

1.2.6 统计学方法

统计两组新生儿的各项检查指标结果，使用SPSS13.0软件包进行χ2检验，以P<0.05作为具有统计学意义的基本检测标准。

2 结 果

2.1 结果分析

108例疑似HDN的高胆红素血症新生儿中，确诊为HDN的患儿49例，占45.37%，其中ABO血型系统HDN患儿为45例（91.84%），其中A组21例（42.86%），B组24例（48.98%），Rh血型系统HDN患儿为4例（8.16%）。

2.2 ABO血型系统各项检查结果比较

ABO血型系统不同检查方法的检查结果见表1。

3 讨 论

现代临床研究发现，HDN的起源来自胎儿从父亲方面继承的一部分红细胞抗原，由于母亲体内没有这些抗原，因此当胎儿红细胞中的抗原通过血液循环进入母体内，母体的免疫系统将会长生相应的抗体IgG，这部分抗体又会随着母胎血液循环进入胎儿的体内，从而破坏胎儿的红细胞，进而导致HDN的发生。ABO型HDN是临床上最为常见的新生儿溶血证类型，其主要由于O型血目前血清中的IgG抗体抗A(B)效价较B型血清中的抗A和A型血清中的抗B效价高[4]，从而导致ABO血型系统HDN的母亲多为O型血，本次临床研究发现，ABO血型系统HDN患儿占91.84%，明显高于Rh血型，与临床报道一致；HDN的检查方法中，直接抗人球蛋白试验主要用于检查患儿的红细胞是否收到抗体致敏，而游离试验和放散试验主要检测胎儿新生儿体内IgG抗体存在的与否，其中直接抗人球蛋白试验在HDN的检查中具有重要作用，其可区分HDN是ABO血液系统还是Rh血液系统，这是因为ABO血型系统所致的HDN对直接抗人球蛋白试验强度很弱，仅有强ABO血型系统所致的HDN导致直接抗人球蛋白试验呈弱阳性，而其他血液系统，尤其是Rh血型系统HDN对直接抗人球蛋白试验强度通常超过“+”，本次临床研究中，4例Rh型HDN患儿的直接抗人球蛋白试验结果均为“++++”，同时，通常直接抗人球蛋白试验结果越强，患儿的HDN越严重。本次临床研究中通过对不同血型新生儿进行游离试验和放散试验发现，放散试验对于ABO血型系统HDN的检测灵敏度优于游离试验。

总之，母婴血型不合的HDN主要发生于ABO血型系统，放散试验对ABO血型新生儿溶血病的检查敏感度最高，直接抗人球蛋白试验对Rh血型新生儿溶血病检查检查敏感度最高，可作为判定HDN的临床诊断依据。

[1]谢世荣,张兴明.凝聚胺技术在产前血型抗体及新生儿溶血病检查中的应用[J].检验医学与临床,2008,5(4):218-219.

[2]孙六娜.108例新生儿溶血病患儿血清学检测结果分析[J].检验医学与临床,2012,9(21):2718-2719.

[3]叶应妩,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程[M].3版.南京:东南大学出版社,2006:256-257.

[4]刘孟黎,张艳,刘晟,等.新生儿溶血病患儿母亲血清中IgG 亚类水平的临床意义[J].细胞与分子免疫学杂志,2006,22(4): 498-499.