抗羊肚菌菌丝特异性抗原单克隆抗体的制备与初步鉴定*

顾张杰，傅泽茜，石 宇，梁 勇，史广用，曲凯歌，王一东

（长春理工大学生命科学技术学院，吉林 长春 130022）

抗羊肚菌菌丝特异性抗原单克隆抗体的制备与初步鉴定*

顾张杰，傅泽茜，石 宇，梁 勇，史广用，曲凯歌，王一东**

（长春理工大学生命科学技术学院，吉林 长春 130022）

为利用免疫学技术研究羊肚菌 [Morchella esculenta(L.)Pers.]菌丝生长发育规律，以菌株代号为51589的羊肚菌菌丝破碎液为抗原免疫Balb/c鼠，将致敏Balb/c鼠的B细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合，经镜检和ELISA间接法检测，筛选出一分泌抗羊肚菌菌丝抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为W2F3。经传代培养和亚克隆纯化，得到稳定分泌抗羊肚菌菌丝抗原单克隆抗体的细胞株，经鉴定W2F3单克隆抗体抗体亚类为IgG1，轻链亚型为Kappa，初步确定该单抗对应的抗原具有羊肚菌属特异性。

羊肚菌；特异性抗原；单克隆抗体

羊肚菌 [Morchella esculenta(L.)Pers.]属子囊菌亚门 （Ascomycotina） 盘菌纲 （Pezizomycetes） 盘菌目（Pezizales） 羊肚菌科（Morchellaceae） 羊肚菌属（Morchella），是1种珍稀食（药） 用菌，味道鲜美，具有较高的营养和保健价值[1-4]。由于人们对它的生活史了解不完整，目前还无法实现稳定的大规模人工栽培，价格居高不下，因此对羊肚菌菌丝发育、子实体形成等生活史的研究具有重要的经济和理论研究价值[5]。免疫学技术尤其是单克隆抗体技术在对特异性抗原的定位、跟踪、检测等方面的研究具有得天独厚的优势[6-7]，本研究即利用经典的杂交瘤技术制备抗羊肚菌菌丝特异性抗原单克隆抗体，并对制备的单克隆抗体进行初步鉴定。抗羊肚菌单克隆抗体尤其是识别羊肚菌特殊生命阶段的标识性抗原的单克隆抗体的制备，将为人们认识、了解羊肚菌一些特殊生命现象发生条件与规律提供技术方法支持，进而为了解羊肚菌的生活史，实现羊肚菌的人工栽培提供帮助。……