郭慧,李晓燕,李东波,韩锦华
(大连大学附属新华医院耳鼻喉科,大连 116021)
喉癌是常见的头颈部恶性肿瘤,具有快速生长、强侵袭力的特点,常用治疗方法主要有手术、放疗和化疗,后二者在杀伤肿瘤细胞的同时,也经常会损伤正常细胞,光动力疗法是随着激光医学、光纤技术发展而日渐兴起的针对肿瘤有效的治疗方法,可选择性的杀伤癌症细胞而较少损伤正常组织的方法[1]。光敏剂是引起光动力发生的重要因素之一。姜黄素不仅本身可以产生抗癌作用[2],而且还被发现具有光敏剂的作用,具有高效、安全、少副作用、反复使用和成本相对低等优点,应用于光动力治疗中[3]。
信号转导和转录激活因子3(STAT3)是细胞质中酪氨酸磷酸化信号传导通路中的一种双功能蛋白,在肿瘤组织(包括喉癌)内高表达,被认为是一种原癌基因[4-6]。
本实验旨在通过激光照射姜黄素,了解其对人喉癌Hep-2细胞系增殖、凋亡及STAT3传导通路调控蛋白p-STAT3、cyclin Dl和Bcl-2水平的影响,为进一步了解姜黄素抗癌作用的机制提供实验依据。
人鳞状喉癌细胞株Hep-2(本实验室保存),RPMI1640培养基,浓缩型磷酸化STAT3兔抗人单克隆抗体(p-STAT3,针对705位酪氨酸磷酸化位点)和B淋巴细胞2(Bcl-2)鼠抗人单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司),cyclin D1蛋白多克隆抗体购自北京赛弛生物科技有限公司,姜黄素购自Sigma公司。
人喉癌Hep-2细胞株置于37.0℃、5%CO2的培养箱中,培养于含10%小牛血清、1%青霉素及链霉素双抗的DMEM培养基,常规细胞培养、传代。……