核型分析与FISH技术诊断成人B细胞急性淋巴细胞白血病等臂双着丝粒费城染色体

李能干，史克倩，刘恒涛，刘倩倩，张晋玚，李存玺，杨同华1,*

（1昆明理工大学医学院，昆明650504；2北京家恩德运医院家恩遗传实验室，北京 100191；3云南省第一人民医院血液科，昆明650032）

9号与22号染色体易位[t(9; 22)(q34; q11.2)]形成的衍生22号染色体[der(22)t(9; 22)(q34; q11.2)]称费城染色体（Philadelphia chromosome, Ph），是人类肿瘤细胞中最先发现的染色体异常[1]。在成人急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia, ALL）中，Ph阳性病例约占20%～25%[2]。Ph阳性的慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia, CML）和ALL病例，Ph可发生复杂重排，形成不典型的染色体形态。ALL者发生Ph不典型等臂重排十分罕见[3,4]。我们发现了国内第1例成人B细胞ALL（B-ALL）携带等臂双着丝粒费城染色体病例。现结合文献复习报告如下。

对象与方法

1 病例

患者，女，49岁，于2016年6月因乏力、纳差伴皮肤瘀斑1周，稀水样便腹泻4天入院。发病时有牙龈渗血、鲜红色血尿和血便；无发热、咳嗽、咳痰、胸闷，无明显呕吐、腹痛，无头痛、无鼻衄、口咽干燥、皮肤光敏等症状。血常规检查：WBC 42.4×109/L，HGB 100g/L，PTL 8×109/L；外周血白细胞明显增高，幼稚淋巴细胞占5%；凝血功能正常。骨髓涂片：急性淋巴细胞白血病骨髓象；流式免疫分型显示R2群（细胞表达CD58、CD22、CD19、CD10、HLA-DR、CD34、cCD79a、部分表达CD38和CD20）约占64.6%。临床诊断急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）。PCR融合基因检测显示BCR/ABL1(+)。

2 染色体核型分析

在患者知情同意的原则下，无菌抽取骨髓2ml，肝素锂抗凝。室温保存，48h内将适量骨髓样本接种到ALL专用HD培养基内，5%CO2，37 ℃培养24h。收获细胞前用HD550处理细胞70min；0.2g/ml秋水仙素处理20min；离心去上清，留1.5mL细胞液，加入HD低渗液处理15～17min；固定 (乙酸:甲醇=1:3)，离心去上清，留约1.5mL细胞液，混匀细胞。加入固定液，离心去上清，留约0.5mL细胞液混匀；再次加入固定液，离心去上清，留约0.2mL细胞液；……