心肺复苏患者NF—κB亚基P65、TNF—α的变化及相关性分析

夏金明 赖登攀 何旋芳

[摘要] 目的 分析心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation，CPR）患者心脏骤停（cardiac arrest，CA）时及自主循环恢复（restoration of spontaneous circulation，ROSC）后血浆核转录因子kappa B（nuclear factor kappa B，NF-κB）亚基P65、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）浓度的变化，并探讨两者的关系。 方法 收集行CPR后ROSC并存活≥24 h的 CA患者30例，分别于CA时、ROSC即刻和ROSC后2 h、8 h、12 h、24 h测定血浆NF-κB亚基P65、TNF-α水平，并进行相关性分析。 结果 CPR患者NF-κB亚基P65在ROSC即刻、2 h、8 h、12 h、24 h均高于CA时（P<0.05），且在12 h达到峰值，TNF-α在ROSC即刻、2 h、8 h、12 h、24 h均高于CA时（P<0.05），在8 h达到峰值，NF-κB亚基P65与TNF-α呈正相关关系（P<0.05）。 结论 CA患者CPR后出现炎症反应，NF-κB亚基P65的活化可刺激TNF-α的释放，ROSC后12 h内是心肺复苏救治的关键时期。

[关键词] 心脏骤停；心肺复苏；炎症反应；核转录因子kappa B

[中图分类号] R459.7 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2018）07-0027-04

[Abstract] Objective To analyze the plasma levels of NF-κB P65 and TNF-α in patients with cardiac arrest（CA）who underwent cardiopulmonary resuscitation（CPR） and had return of spontaneous circulation（ROSC），and investigate the correlation between them. Methods Medical records of 30 patients with CA who underwent CPR and had ROSC and survived more than 24 hours were collected，the plasma levels of NF-κB P65 and TNF-α were tested at CA， ROSC and 2 h，8 h，12 h，24 h after ROSC，and the correlation was analyzed. Results The plasma levels of NF-κB P65 at ROSC and 2 h，8 h，12 h，24 h after ROSC were higher than CA（P<0.05），and peaked at 12 h after ROSC. the plasma levels of TNF-α at ROSC and 2 h，8 h，12 h，24 h after ROSC were higher than CA（P<0.05），and peaked at 8 h after ROSC. Correlation analysis showed that NF-κB P65 was positively correlated with TNF-α（r=0.492，P<0.05）. Conclusion The inflammation occured in patients with CA who underwent CPR，the activation of NF-κB P65 could increase the release of TNF-α，within 12h after ROSC was the critical period in CPR.

[Key words] Cardiac arrest；Cardiopulmonary resuscitation；Inflammatory reaction；NF-κB

隨着人们生活条件的不断提高，心脑血管病的发生率较前有了明显上升，CA也同时成为急诊比较常见的危重症之一，且发病年龄趋于年轻化。CA患者死亡率、致残率居高不下，严重影响着人们的生命安全和生活质量。虽然近年来CPR技术不断改进，公众自救意识不断提高，相关知识普及程度也越来越广泛，ROSC成功率较前明显上升[1-2]，复苏后综合征的抢救和治疗方面也有了更多的办法，如亚低温、干细胞移植、蛋白酶抑制剂、抗氧化应激损伤药物、兴奋性毒性氨基酸抑制剂等也相继用于复苏后综合征的治疗[3-5]，但均无法达到人们预想的效果，CA患者的预后仍处于一个较低的水平。

目前大量研究表明[6-9]，炎症反应参与了复苏后综合征的发生、发展过程，且贯穿于病程的始终。我们在前期动物研究中[10-11]也发现心脏骤停动物在ROSC后血浆炎症因子如TNF-α、IL-6等浓度有上升的趋势，且在ROSC后8 h达到峰值。但其在心肺复苏患者中的变化及对预后的影响程度目前尚不是很明确。本文通过对CPR患者CA时及ROSC后血浆NF-κB亚基P65、TNF-α的变化，探讨其对预后的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2014年1月～2017年6月我院急诊科CA患者，将CPR成功并存活≥24 h者纳入研究对象，剔除CA前一周患有感染者，并去除CPR后存活<24 h者。最后有30例患者符合纳入条件，其中男17例，女13例，年龄30～90岁，平均（66.04±21.19）岁。CA原因：脑出血6例，呼吸衰竭5例，窒息4例，室颤3例，气胸2例，高钾血症2例，心肌梗死2例，自缢、电击伤各1例，病因不明确4例。

1.2 CA标准

①意识丧失；②大动脉搏动消失；③心电图或心电监护示室颤、无脉性心电活动或心室静止。

1.3 CPR措施

所有纳入对象CA后立即按照2015版美国心脏协会与心血管急救指南进行标准CPR[12]，包括胸外心脏按压、气管插管、机械通气，心电监护示室颤者立即予以电除颤，同时建立静脉通道，应用复苏药物。

1.4 CPR成功标准

①触及大动脉搏动；②出现自主心律；③收缩压≥60 mmHg，并维持30 min以上。

1.5 观察指标

30例研究对象均于CA时及ROSC即刻、2 h、8 h、12 h、24 h抽取外周静脉血10 mL，采用酶联免疫法（ELISA）检测血浆NF-κB亚基P65、TNF-α水平。

1.6 统计学处理

采用SPSS18.0统计学软件包进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用One-way ANOVA分析，两两比较采用SNK法；不同时间点数据比较采用重复测量资料的方差分析；采用Pearson相关分析评估血清NF-κB亚基P65与TNF-α的相关性，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CPR患者NF-κB亚基P65、TNF-α的变化

CA患者经CPR后NF-κB亚基P65出现进行性升高，在ROSC后12 h达到峰值，随后下降，于ROSC后24 h恢复到ROSC即刻时的水平。见表1、图1。TNF-α在CPR后也进行性升高，在ROSC后8 h达到峰值，随后下降，但ROSC后24 h又继续升高。见表1、图2。

2.2 CPR患者NF-κB亚基P65与TNF-α相关性分析

CA患者经CPR后NF-κB亚基P65、TNF-α均出现不同程度升高，两者呈正相关关系（r=0.492，P<0.05）。见图3。

3 讨论

CA时患者全身缺血缺氧，有氧代谢中断，无氧代谢增加，机体在神经、免疫、体液、内分泌等方面发生强烈应激反应，大量促炎细胞因子及炎症介质生成，此外抗炎物质出现过度表达，导致两者的平衡被打破，并发生级联反应，导致全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）的发生[13]。Adrie C[8]等研究发现，CPR患者SIRS的发生率高达90.6%，是导致CPR最终死亡的主要危险因素。另外，缺血缺氧可导致肠道黏膜屏障功能下降，细菌失调，内毒素移位，加促SIRS的进程并加重其程度。CPR后机体恢复自主循环，全身又将遭受缺血再灌注损伤[14]，大量氧自由基生成，導致内皮细胞功能损伤、细胞内钙超载、线粒体功能障碍，进一步促进炎症反应的发生和发展，导致体内失控的过度SIRS[15]，引发复苏后综合征，最终导致多器官功能衰竭（multiple organ failure，MOF）。由此可见炎症反应在CA的抢救和治疗过程中扮演着重要角色。

NF-κB属于NF-Kb/Rel家族的同源或异源二聚体蛋白，其广泛存在于人体各种组织细胞内，是促炎细胞因子及炎症介质表达的关键环节之一。其在哺乳动物体内包括NF-κB1（p50）、NF-κB2（p52）、RelA（p65）、RelB、c-Rel共五种亚基，其中NF-κB p65存在最广泛，是其活性的主要形式。CPR患者历经缺血、再灌注时其被广泛激活[16-18]，导致细胞因子网络的失衡，产生炎症反应的瀑布效应，导致SIRS的发生。

Geppert A[19]及Gibson DG等[20]研究认为TNF-α是CA时产生最早的致炎细胞因子，不仅能引起器官损伤，还能活化NF-κB，刺激其他几种细胞因子如IL-6、IL-8的生成，诱导细胞凋亡，放大其促炎性反应作用[21]。Ito T[9]等研究也发现在CPR成功即刻TNF-α开始升高，6 h达高峰，而其他促炎因子上升及达峰值时间相对较晚，也进一步证明TNF-α在CPR过程中起到核心作用。

本研究发现，心肺复苏患者NF-κB亚基P65在ROSC即刻、2 h、8 h、12 h、24 h均高于CA时，2 h、8 h、12 h均高于ROSC即刻，而24 h与ROSC即刻无明显差异，表明12 h内NF-κB亚基P65持续活化与过度表达，12 h后开始下降，24 h与ROSC无明显差异，因此，12 h内是心肺复苏救治的关键。TNF-α在ROSC即刻、2 h、8 h、12 h、24 h均高于CA时，8 h、24 h均高于ROSC即刻，2 h、12 h虽较ROSC即刻升高，但无明显差异，表明TNF-α在CA应激时逐渐升高，8 h达到高峰，后因NF-κB亚基P65持续活化与过度表达，导致炎症因子的级联反应，产生瀑布效应，因此，24 h后再次升高，预后不良。通过相关性分析发现，NF-κB亚基P65与TNF-α有正相关关系，随着NF-κB亚基P65的活化与过度表达，TNF-α释放增加。

目前CA患者的预后仍不尽如人意，高致死率，高致残率，严重影响人们的生命安全和生存质量，且治疗措施有限，使CPR的预后难以有质的进步。我们的研究进一步证明了炎症反应参与了CPR患者的致病过程，且占有重要的地位。运用抑制炎症反应的药物及措施是否会改善CA患者的预后，我们将在以后的实验中继续进行相关研究。

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（收稿日期：2017-11-17）