环状RNA circ0023033及其靶基因在肺癌中的表达及诊断标志物意义

曹金秀 江雁琼 孙嘉

广州医科大学附属第五医院（广州510700）

肺癌在最近几十年里逐渐成为全世界发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，伴随医学技术的不断发展，肺癌诊断和治疗已取得了很大的进步，但是患者的5年生存率仍然很低。大量的研究表明［1］，肺癌发病是一个多基因参与、多步骤的复杂病变过程，先是产生组织学上可以辨认的癌前病变，最后导致侵袭性肿瘤产生。肺癌的危险因素包括接触到的环境或职业致癌物，如汽车尾气、芳香化合物、石棉、砷、吸入的放射性物质等。尽管越来越多的肺癌危险因素已经被明确，但是其发生发展的机制仍不清楚。随着非编码RNA研究的不断深入，人们发现其在肺癌的发生发展过程中具有十分重要的作用。环状RNA（circular RNA，cir⁃cRNA）是一类新兴的非编码RNA分子，与传统的线性RNA不同，circRNA的分子结构呈封闭环状，不含有5′和3′末端，不易被核酸内切酶降解，具有一定的组织特异性。目前，对于circRNA作为肺癌标志物的研究报道较少。研究报道［2］hsa_cir⁃cRNA_100855为鼻咽癌circRNA芯片中显著高表达的基因，且hsa_circRNA_100855可作为鼻咽癌新的非编码RNA标志物。经GEO数据库（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/geo）及circBase数据库（http：//www.circbase.org/）的 查 找 及 分 析 可 知 ，hsa_cir⁃cRNA_100855与 has_circ_0023033为同一个cir⁃cRNA，简称circ0023033。本研究主要寻找鼻咽癌新的circRNA标志物在同为呼吸系统肿瘤肺癌中的表达，探究其是否具备作为肺癌诊断标志物的潜力。

1 材料与方法

1.1 仪器、试剂与细胞

1.1.1 主要仪器 超净工作台（1300 Series A2，Thermo Scientific），CO2细胞培养箱（Thermo Scien⁃tific），-80℃超低温冰箱（Thermo Scientific），液氮罐（Thermo Scientific），电热恒温水浴箱（苏州长风），制冰机（SM⁃F123 SANYO），倒置显微镜（Nikon），冰箱（Haier，Samsung），AB⁃7500实时PCR仪（Applied Biosystems），BG⁃thermo RT恒温仪（BAYgene）ND⁃1000紫外/可见分光光度计（Nano⁃drop Tecnologies）。……