不同浓度葡萄糖、氯化钠及氯化铁对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响研究*

李瑜珍，郑 琳，张惠媚，张春雷

(深圳市中医院a.检验科;b.中药制剂研究重点实验室，广东深圳 518034)

铜绿假单胞菌是一种常见的条件致病菌，是引起医院感染的主要病原菌，常引起呼吸道、伤口和烧伤患者创面感染［1］。其易定植，易产生多重耐药性是临床治疗的难点。细菌感染后，菌体周围环境会影响细菌存在的状态［2］，有文献报道，葡萄糖、高渗氯化钠会影响葡萄球菌在人工假体及生物材料上形成生物膜，也有文献报道，铁离子会影响细菌生物膜。为了解这些物质对人体分离的铜绿假单胞菌生物膜的影响，为铜绿假单胞菌生物膜形成的预防和治疗提供新的思路，同时为其体外生物膜模型的构建提供实验优化条件，本文收集15株铜绿假单胞菌，用结晶紫染色法检测不同浓度的葡萄糖、氯化钠及氯化铁对其生物膜形成的影响。

1 材料与方法

1.1 研究对象 15株铜绿假单胞菌分离自我院2017年1～9月住院患者，其中10株分离自痰标本，2株分离自血液，3株分离自伤口分泌物，经结晶紫染色法和银染色法同时检测，确认都具有生物膜形成能力。

1.2 试剂和仪器 LB肉汤培养液由杭州滨和微生物试剂有限公司提供;葡萄糖、氯化钠、氯化铁、95%乙醇等化学试剂由汕头市光华化学厂提供;结晶紫染液由珠海贝索生物技术有限公司提供;恒温振荡器由上海跃进医疗器械有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 铜绿假单胞菌生物膜的制备:铜绿假单胞菌培养18～24 h，挑取单个菌落于100 ml LB培养基在恒温振……