王 垚,付 新,张 聪,纪羽婷
(1.黑龙江中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,哈尔滨 150040;2.黑龙江中医药大学药学院中药化学教研室,哈尔滨 150040)
姜黄素(Cur)是从姜黄的根茎中提取的天然活性橙黄色结晶粉末,可调节多种信号分子,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化等多种生物学活性[1]。姜黄素被证实可通过细胞因子、环氧合酶-2、诱导型一氧化氮合酶、抗氧化应激、NF-κB、过氧化物酶体增值物激活受体、丝裂原活化蛋白激酶、STAT3通路、Toll样受体4等,被广泛地用于治疗各种疾病[2-3]。本实验利用TNBS复制UC小鼠模型,旨在探讨不同剂量姜黄素治疗结肠炎的疗效及可能机制。
1.1 动物及分组 清洁级健康雄性C57BL/6小鼠72只,体质量(20±2)g,由北京维通利华实验动物有限公司提供[合格证号:SCXK(京)2012-0001]。将小鼠随机分为正常组、模型组、姜黄素低剂量组、中剂量组、高剂量组、美沙拉嗪对照组,共6组,每组12只,适应性饲养3 d后使用。
1.2 药物及试剂 姜黄素购自于南京广润生物制品有限公司提供(批号:GR-133-140421);美沙拉嗪购自佳木斯鹿灵制药有限公司葵花药业生产(批号:130407);三硝基苯磺酸(2,4,6,TNBS)相对分子质量为293.17,购自Sigma公司。粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素(IL)IL-2、IL-4、IL-12P40、IL-15、IL-21 和 IL-23 等 ELISA 试剂盒均购于ebioscience公司。
1.3 主要仪器 低温高速离心机(德国Eppendorf);酶标仪(Molecular Devices SpectraMax Plus 384);低温高速离心机(eppendorf Centrifuge 5430R)。
2.1 模型复制 采用三硝基苯磺酸(TNBS)复制结肠炎小鼠模型[4]。造模前禁食12 h,除正常组外,所有小鼠给予1%戊巴比妥钠溶液(5 mL/kg)肌肉注射麻醉后,按100 mg/kg TNBS计算,将其溶入0.15 mL 50%乙醇,配制TNBS乙醇……