滕 磊,蔡蔚然,柴宇琪,忻耀杰,袁 波
(上海中医药大学附属曙光医院,上海 201203)
变应性鼻炎是发生在特应性个体的Ⅰ型变态反应,这种“特应性个体”即中医学“体质”的概念。虽然变应性鼻炎可发生于各种不同体质,但寒体最容易引起变应性鼻炎,症状最严重[1]。由于引起变应性鼻炎的多种炎性细胞及细胞因子与症状呈相关表达[1],且受到骨髓间充质干细胞(MSCs)的分化和免疫调控的影响[2],说明体质能影响骨髓MSCs的增殖表达。本研究以大鼠遗传性体质模型为基础,在此基础上构建变应性鼻炎模型,探讨骨髓MSCs在不同体质变应性鼻炎中的增殖表达情况。
1.1实验动物 6周龄清洁级SD大鼠40只,雌雄各半,体质量(165±55)g,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,许可证号:SCXK(沪)2012-0002。自由进水、常规饲料喂养,室温稳定于20~25 ℃,空气湿度为60%。
1.2实验试剂和设备 卵清蛋白(Ⅴ级,Sigma,美国);氢氧化铝、PBS磷酸盐缓冲液、抗体稀释液(科夷生物科技有限公司提供);CD29(ab179471)单克隆抗体和APC- Goat Anti-Rabbit(Ab130805)(Abcam,美国);CD44-PE(88151)单克隆抗体(CST,美国);CD45-FITC(561867)单克隆抗体(BD,美国);Fresco离心机(Thermo,美国);FACSCalibur流式细胞仪(BD,美国);Scepter细胞计数器(Millipore,美国)。
1.3遗传性体质模型的建立 参照文献[3]进行建模。将40只SD大鼠按雌雄分别测量肛温,按照肛温高低筛选自然状态下寒、热、常体3种体质的SD大鼠各8只(雌雄各半)作为亲代大鼠,按体质类型及性别分笼饲养。寒体组灌饲黄连解毒汤,热体组灌饲附子理中汤,常体组灌饲生理盐水,进行体质强化。按人与动物等效剂量换算方法折算用药量,人与大鼠药物每公斤体质量剂量比为1∶6。……