黄芪甲苷抑制胰腺癌PANC1细胞恶性生物学行为及其作用机制

蔡秀珍 张曼 刘涛

1潍坊市中医院药学部，潍坊 261041；2潍坊市脑科医院药剂科，潍坊 261021

【提要】 采用CCK8检测胰腺癌PANC1细胞的存活率，划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力，蛋白质印迹法检测与细胞增殖、凋亡及上皮间质转化相关的蛋白表达等方法探讨黄芪甲苷对胰腺癌PANC1细胞恶性生物学行为的影响。结果显示，黄芪甲苷干预PANC1细胞后可抑制细胞的存活率，显著减少迁移和穿膜的细胞数量，影响相关蛋白的表达，提示黄芪甲苷抑制胰腺癌PANC1细胞生长的机制可能与其抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡、抑制上皮间质转化过程有关。

黄芪甲苷是中药黄芪天然活性成分提取物之一，具有许多药理作用，如抑制炎症、抗氧化、降低血糖、调节脂肪及能量代谢、抗纤维化、调节免疫及抗肿瘤等[1-6]。早期研究发现，黄芪甲苷可以通过PKC-α-ERK1/2-NF-κB信号通路抑制肺癌细胞A549的迁移和侵袭[7]。然而黄芪甲苷是否对胰腺癌发挥同样的抗肿瘤作用尚不明确。本研究探讨黄芪甲苷对胰腺癌PANC1细胞的作用及其机制，为胰腺癌的治疗提供新的策略。

一、材料与方法

1．PANC1细胞增殖活性检测：胰腺癌PANC1细胞购自ATCC，常规复苏并传代。取对数生长期细胞，接种于96孔板，每孔3×105个细胞。培养过夜后将溶解于DMSO的终浓度为1、2.5、5、7.5 μg/ml的黄芪甲苷(成都科程生物科技开发公司)分别孵育细胞24、48、72、96 h，以单加DMSO作为对照组，每个实验组设置6个复孔。培养到相应时间点，避光每孔加入10 μl CCK8(武汉博士德生物公司)，继续孵育2 h，上酶标仪检测每孔在450 nm处吸光度值(A450值)。……