祛痰活血方对非酒精性脂肪性肝病模型大鼠肝组织miR-27a、p38MAPK、AQP9表达的影响

杨昌碧，汪静，郑丁

西南医科大学附属中医医院，四川 泸州 646000

非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD）是指除过量饮酒和其他明确导致肝损伤因素外所致的肝细胞内脂肪过量沉积，是一种与胰岛素抵抗和遗传易感密切相关的代谢应激性肝损伤[1]。NAFLD发病机制复杂，公认的是以胰岛素抵抗为中心的“二次打击”学说[2]，胰岛素抵抗导致的脂代谢紊乱及肝脏中三酰甘油（TG）过度沉积是NAFLD的发病基础。有研究报道，NAFLD小鼠肝组织miR-27a表达降低，miR-27a过表达可减轻小鼠肝组织TG的含量，从而减轻脂肪肝[3]。Appari 等[4]研究发现，miR-27a通过参与p38MAPK磷酸化而影响其下游基因的表达。水通道蛋白9（AQP9）是肝细胞摄取甘油的特异性通道，研究发现NAFLD大鼠肝细胞中p38MAPK和AQP9蛋白及mRNA表达显著升高，抑制p38MAPK表达及磷酸化可降低AQP9蛋白及mRNA的表达[5]。祛痰活血方是西南医科大学附属中医医院孙同郊教授治疗脂肪肝的经验方，具有活血化瘀、疏肝健脾功效。前期研究发现，祛痰活血方可降低TG、总胆固醇（TC）水平，总有效率达88%[6]。动物实验发现，祛痰活血方可抑制p38MAPK信号通路，减少AQP9的表达，减少TG在肝细胞蓄积，改善NAFLD大鼠肝脏脂肪变性[7]。因此推测miR-27a可能通过调节p38MAPK信号通路影响AQP9的表达，进而影响TG的形成。本实验采用高脂饲料喂养建立NAFLD大鼠模型，观察祛痰活血方对大鼠肝组织miR-27a、p38MAPK及AQP9表达的影响，探讨其作用机制。

1 实验材料

1.1 动物及饲料

清洁级雄性SD大鼠32只，体质量180～200g，成都达硕生物科技有限公司，动物生产许可证号SCXK（川）2020-24，饲养于温度20～24 ℃、相对湿度50%～60%环境。高脂饲料（82%基础饲料＋10%猪油＋2%胆固醇＋5%蛋黄粉＋1%胆盐），成都达硕生物科技有限公司，许可证号SCXK（川）2020-028。……