槐耳抗肿瘤活性部位筛选研究

黄 挺 杨 翀 徐志远 程向东

槐耳是多孔菌科真菌槐栓菌Trametes robiniophila Murr.的干燥子实体，别名槐檽、槐菌、槐鸡、槐蛾、赤鸡等，主要分布于我国陕西、山东、河北等地[2]。临床和基础实验证实，槐耳具有良好的抗肿瘤作用，对肿瘤的生长、增殖、侵袭与转移均具有抑制作用，能诱导恶性肿瘤细胞凋亡，抑制肿瘤血管生成，逆转耐药细胞株，增强化疗药物敏感性等疗效明显，且对正常细胞毒性小[1-8]。本研究主要探讨槐耳不同提取物对不同肿瘤细胞的体外抑制作用，报道如下。

1 实验材料

1.1 细胞株 人肝癌细胞HepG2、人肺癌细胞A549、人胰腺癌细胞PANC-1、人肠癌细胞HCT-116、人胃癌细胞MKN-45、人胃癌细胞BGC-823 细胞株，均来源于中国科学院生命科学研究院细胞库。

1.2 药品与试剂 槐耳药材（浙江佐力百草中药饮片有限公司，产于山东，批号20151001）经浙江中医药大学中药资源与鉴定教研室陈孔荣教授鉴定，来源于山东，为多孔菌科真菌槐栓菌Trametes robiniophila Murr.的干燥子实体；槐耳颗粒（启动盖天力药业有限公司，批号EJ14）；RPMI Medium Modified 1640（美国HyClone 公司，批号1676918）；胎牛血清FBS（Gibco，批号1616966）；胰蛋白酶-EDTA 消化液（美国Gibco 公司，批号21467 E16）；Cell Counting Kit-8（杭州诺扬生物有限公司，批号010417170406）；Phosphate Buffered Saline（美国HyCloneTM公司，批号NAH1449）；DMSO（Dimethyl Sulfoxide）（美 国Sigma-Aldrich 公司，批号WXBB8079V）。

1.3 主要仪器 十万分之一电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司，型号XS105）；千分之一电子天平（常州市幸运电子设备有限公司，型号JA203H）；百分之一天平（常州市幸运电子设备有限公司，型号XY2000C）；台式冷冻多用离心机（Thermo Electron Corporation，型号CL31R）；超声波清洗器（昆山超声仪器有限公司，型号KQ5200DE）；超低温冰箱（Thermo Electron Corporation）；多 功 能 酶 标 仪（Thermo scientific，型号Varioskan Flash）；CO2细胞培养箱（Thermo Electron Corporation，型号3111）；倒置荧光显微镜（日本Nikon 公司，OLYMPUS CKX41SF）；……