HPLC法测定干血滤纸片中苯妥英的浓度

王漪檬，马爱玲，赵宁民，马培志（郑州大学人民医院药学部，河南 郑州 450003）

苯妥英（phenytoin，DPH）为早期的经典抗癫痫药物，目前存在临床用量不断减少但又需长期进行血药浓度监测[1-4]（therapeutic drug monitoring，TDM）的矛盾现状。由于基层TDM开展不够广泛、在当地静脉采血后样品不易运输等原因，苯妥英的血药浓度监测呈现零星化态势，甚至有些医院已放弃此项检测。目前苯妥英的血药浓度检测方法有荧光偏振免疫法、酶放大免疫分析法、高效液相色谱法、液-质联用法、二维液相色谱法和毛细管电泳法等[5-10]。

干血滤纸片法（dried blood spots，DBS）作为一项成熟的方法，已广泛应用于新生儿筛查[11]，药物的检测[12-14]和基因测序[15]。其样品收集技术具有较大的优势[13]，包括样本的室温稳定性好、微创、成本低、易保存和运输、能够减少潜在的病原体感染风险等。其作为一种新颖的TDM方法，已有临床研究将该方法应用于丙戊酸、卡马西平（carbamazepine，CBZ）、他克莫司等药物浓度的检测[16-18]。本实验将HPLC法和DBS法相结合，旨为临床监测苯妥英的血药浓度提供参考。

1 仪器和试药

1.1 仪器

Waters 1525高效液相色谱仪（美国沃特斯公司），Waters 2489紫外检测仪（美国沃特斯公司），AUW120D电子天平（日本岛津公司），SCILOGEX MX-S旋涡混合器（美国赛洛捷克公司），LG16-A高速离心机（北京雷勃尔公司），DS3120超声波清洗机（天津东康公司），Whatman 903滤纸（美国沃特曼公司，批号：6981314W131）。

1.2 试药

苯妥英对照品（中国食品药品检定研究院，含量98.6%，批号：100210-201002）；卡马西平对照品（中国食品药品检定研究院，含量99.7%，批号：100142-201105）；空白EDTA全血由本院检验科提供；甲醇为色谱纯；水为超纯水。……