MiR-21靶向调控PTEN对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响*

李红敏 方 容 邹 琴

武汉市第四医院消化内科1(430030) 检验科2

背景：胃癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，miR-21可调节磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)蛋白表达，诱导多种肿瘤细胞凋亡。目的：探讨miR-21靶向调控PTEN对胃癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法：将对数生长期SGC-7901细胞分为miR-21 mimic组、miR-21 inhibitor组、阴性对照组和空白对照组，采用RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测miR-21和PTEN mRNA和蛋白表达，萤光素酶报告基因试验验证两者的靶向关系。将胃癌SGC-7901细胞分为空白对照组、NC组、miR-21组、PTEN组和miR-21+PTEN组，以CCK-8法检测细胞增殖活性，TUNEL法检测细胞凋亡情况，Transwell法检测细胞侵袭力，划痕实验检测细胞迁移力，蛋白质印迹法检测Ki-67、PCNA、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax、PTEN、p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达。建立裸鼠成瘤模型，检测过表达miR-21对移植瘤体积和质量的影响。结果：MiR-21可靶向负调控PTEN表达。与NC组相比，miR-21组细胞增殖、侵袭和迁移率升高(P<0.05)，细胞凋亡率下降(P<0.05)，Ki-67、PCNA、Bcl-2/Bax比例、p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达升高(P<0.05)，PTEN、cleaved caspase-3表达下降(P<0.05)；PTEN组细胞增殖、侵袭和迁移率下降(P<0.05)，细胞凋亡率升高(P<0.05)，Ki-67、PCNA、Bcl-2/Bax比例、p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达下降(P<0.05)，PTEN和cleaved caspase-3表达升高(P<0.05)。与PTEN组相比，miR-21+PTEN组细胞增殖、侵袭和迁移率升高(P<0.05)，细胞凋亡率下降(P<0.05)，Ki-67、PCNA、Bcl-2/Bax比例、p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt蛋白表达升高(P<0.05)，PTEN、cleaved caspase-3表达下降(P<0.05)。与对照组相比，过表达miR-21可增加裸鼠移植瘤的体积和质量(P<0.05)。结论：MiR-21可靶向负调控PTEN表达，激活PI3K/Akt信号通路，促进胃癌细胞增殖、侵袭和迁移，并抑制细胞凋亡。

胃癌是一种常见的消化道恶性肿瘤，早期主要表现为非特异性消化道症状，随疾病发展表现为疼痛、体质量减轻、贫血、恶病质等，预后较差[1]。目前，胃癌的治疗主要采用手术联合术前、术中和术后化疗的方式，但术后易发生复发和转移[2]。微RNA-21(miR-21)是miRNA家族的成员，参与调控多种细胞的增殖、分化和凋亡等生理过程，近年研究显示，miR-21在胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤中均存在异常高表达[3-4]。既往有研究[5]显示，miR-21可靶向调控磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homologue, PTEN)的表达，诱导肝癌细胞凋亡。PTEN是一种肿瘤抑制基因，在胃癌细胞中异常低表达，可抑制胃癌细胞的增殖和侵袭[6]。Pan等[7]的研究显示，PTEN可抑制磷脂酰肌醇-3激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路的表达，抑制胃癌细胞的恶性生物学行为。……