金黄色葡萄球菌类肠毒素K对T淋巴细胞活化特点及抗肿瘤活性研究①

何亚南 孙钰椋 任雅坤 张胜辉 陈童彤 路依林 郭 睿 刘彦礼 李永海 林俊堂

（新乡医学院生命科学技术学院，新乡453003）

金黄色葡萄球菌肠毒素（Staphylococcal enterotoxins，SEs）是由金黄色葡萄球菌分泌的一类外毒素，由于其超抗原活性成为研究重点［1］。作为典型超抗原，SEs通过直接与主要组织相容性复合物Ⅱ类分子（major histocompatibility complex classⅡ，MHCⅡ）非限定性结合，无需抗原递呈细胞（antigen presenting cell，APC）加工呈递便可以完整分子形式递呈给T淋巴细胞，从而活化大量具有特异性TCR Vβ亚群的T淋巴细胞（5%～20%，包括CD4+和CD8+T细胞），随后释放大量细胞因子，如IL-2、IFN-γ及TNF-α等，同时产生强烈的细胞介导的细胞毒性作用，尤其对MHCⅡ阳性表达的肿瘤细胞具有较强杀伤作用［2-3］。因此，SEs诱导的免疫激活作用已被广泛用于抗肿瘤免疫治疗研究［4］。但SEs具有诱发机体呕吐、腹泻和发热等毒副作用，一定程度上限制了其临床应用［5］。

随着SEs研究深入，2004年国际命名委员会将SEs家族的1个亚组命名为金黄色葡萄球菌类肠毒素（Staphylococcal enterotoxin-like，SEls）［6］，其具有与典型SEs相似的结构及超抗原活性，但无致呕等副作用，在临床治疗恶性肿瘤中具有潜在应用价值，并已有相关报道［7］。目前已鉴定出一系列SEls成员，包括SElJ、SElK-Q、SElU、SElV和SElX等［8-10］。课题组前期已成功构建并表达高纯度SElK［11］。本研究旨在研究SElK对T淋巴细胞的活化作用，并分析其体内外抗肿瘤活性，为进一步阐明SElK超抗原活性提供理论基础，以期促进SElK在临床肿瘤治疗中的应用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物、细胞、外周血6～8周龄SPF级BALB∕c雌性小鼠，体重（24±2）g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号：SCXK（京）2012-0001，所有动物实验均获得我院动物保护委员会批准，并按照中国动物保护协会要求进行操作；……