PRDM1调控NF-κB信号通路对巨噬细胞极化和功能的影响①

2021-08-21 04:36:06张梦莹李雪琴
中国免疫学杂志 2021年11期
关键词:信号检测

张梦莹 李 志 李雪琴 钟 民 吕 坤

(皖南医学院第一附属医院弋矶山医院中心实验室,芜湖241001)

巨噬细胞作为一种极具可塑性和多能性的细胞群体,在免疫反应中发挥着不可替代的作用[1-3]。在机体微环境不同刺激物的影响下,可向不同类型分化且功能各异(主要分为M1型和M2型)[4-5]。B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(B-lymphocyte induced maturation protein-1,Blimp-1),又称为PR结构域蛋白1,已知它在B淋巴细胞终末分化为浆细胞并分泌大量免疫因子的过程中发挥关键作用,从而调控机体的免疫状态[6-7]。并且正性调节区锌指蛋白1(positive regulatory domain zinc finger protein 1,PRDM1)在人和小鼠的T细胞中均有表达,且高表达于CD4+和CD8+细胞系的效应及记忆细胞中[8-9]。同时PRDM1在调节T细胞的稳态上也发挥关键作用[10-11]。由此提示PRDM1可能与T细胞的分化和功能密切相关。因此本课题组前期实验中通过芯片微阵列分析数据(国家生物技术信息中心数据库登录号:GSE81922)筛查发现,小鼠骨髓来源巨噬细胞(bone marrow-derived macrophages,BMDMs)体外极化过程中,PRDM1表达存在差异,与M1相比,M2中PRDM1下调表达最为明显,提示其与巨噬细胞体外极化密切相关[12]。核转录因子κB(nuclear transcription faetor,NF-κB)是一种可以调控基因转录的核因子,被认为是巨噬细胞极化的重要调控因子,参与了TLR诱导的M1极化[13-14]。因此,本研究以巨噬细胞为研究对象,构建过表达腺病毒PRDM1,探索PRDM1是否通过调控NF-κB信号通路影响BMDMs的极化,为其在巨噬细胞极化的调控作用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料 胎牛血清、2.5 g∕L胰蛋白酶(Gibco公司),高糖DMEM培养液(Hyclone公司),Trizol(美国Invitrogen公司),First-Strand cDNA Synthesis试剂盒、核蛋白-胞浆蛋白抽提试剂盒(美国Thermo公司),PCR试剂盒(广……

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