CV-A5抗体制备及ELISA抗原检测方法的建立①

张小宇 靳卫平 王文辉 吴 杰 卢 佳 孟胜利 王泽鋆 申 硕

（武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究一室，国家联合疫苗工程技术研究中心，武汉430207）

手足口病（hand，foot and mouth disease，HFMD）是由人肠道病毒（human enterovirus，HEV）引起的婴幼儿感染为主的流行性传染病，在我国丙类传染病中发病率位居第一，主要症状包括患儿手、足、口腔等处皮肤疱疹、溃疡，并伴有发热、乏力和精神萎靡等全身症状，少数患者可出现严重中枢神经系统症状，严重危害婴幼儿健康和生命安全［1］。武汉生物制品研究所于2016～2017年在湖北省襄阳市进行的HFMD病原学研究表明，3 216例HFMD患儿临床样本中柯萨奇病毒A组5型（Coxsackievirus A5，CV-A5）感染呈高比例，且与CV-A2、CV-A6、CVA10、CV-A16和肠道病毒71型（Enterovirus 71，EV-71）共同流行，是HFMD的主要病原体之一［2-5］。CVA5属小RNA病毒科肠道病毒属，呈20面体球形对称，为单股正链RNA，长度为7 400～7500 nt，编码多聚蛋白。基因组5΄末端至3΄末端依次排列5΄UTR，编码区为P1、P2、P3、3΄UTR及多聚腺苷酸尾。P1编码主要结构蛋白，终产物为VP1～VP4。VP1～VP3暴露于病毒粒子表面，VP4存在于病毒内部［6］。CV-A5与诺如病毒（norovirus，NoV）GⅡ.4共同感染可能诱发间歇性枫糖尿症（MSUD）6岁患儿首次严重急性脑病；CV-A5与乙型流感病毒共同感染可能引发瑞氏综合征，对肝脏和大脑产生巨大损伤，如不及时治疗将迅速导致肝肾衰竭、脑损伤，甚至死亡；CVA5原型株与EV-71重组可能导致HFMD暴发，并伴有严重神经系统症状［7-9］。研发包含CV-A5的HFMD多价疫苗，对预防和控制CV-A5及其他肠道病毒暴发及引发的重症具有重要意义。抗原检测是疫苗工艺稳定、质量可控的重要保证，是质控方法不可缺少的环节。……