CXCL12/CXCR4通路在人肺腺癌细胞诱导破骨细胞前体细胞向破骨细胞分化中的作用

陈聪，赵雪强，林云，蒋碧佳，李宁，银建华，卢春兰，周成风，曾锦荣

桂林医学院第二附属医院呼吸与危重症医学科，广西桂林541199

肺癌是引起人类死亡最常见的恶性肿瘤之一。随着手术、放化疗、靶向治疗及免疫治疗等综合治疗的开展，肺癌患者的中位生存期较前明显延长，但骨转移发生率亦随之增高。这导致肺癌患者治疗负担日益加重，必须采用积极有效的防治措施。趋化因子受体4（CXCR4）于2001年被发现，在恶性肿瘤组织中表达升高，并与疾病的不良预后有关［1］。趋化因子12（CXCL12）是CXCR4 的惟一配体，其水平反映CXCR4 活性。CXCL12/CXCR4 通路与白细胞运输、癌性骨痛和术后疼痛等一系列生理、生化及病理过程有关，也是肿瘤细胞与体内微环境沟通的重要物质［2］。白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）是常见的炎症细胞因子，其在肿瘤骨侵袭破坏的微环境中起促进作用。2019年10 月—2021年2 月，我们观察了CXCR4 竞争性拮抗剂AMD3100干预肺腺癌A549 细胞与破骨细胞前体细胞共培养后破骨细胞的分化情况，初步探讨通过抑制CX⁃CL12/CXCR4是否能影响破骨细胞的分化及其可能的分子机制。

1 材料与方法

1.1 主要材料 人肺腺癌细胞株A549、破骨细胞前体细胞（小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7）均购于中科院昆明细胞库；AMD3100购自上海陶素生化科技有限公司；胎牛血清（FBS）、DMEM 培养液购自美国赛默飞世尔科技公司；Transwell 小室购自美国康宁公司；抗酒石酸碱性磷酸酶（TRAP）染色试剂盒购自上海贝博生物科技有限公司；TRNzol Universal 总RNA 提取试剂、第一链cDNA 合成试剂盒及破骨细胞标志物组织蛋白酶K（CTSK）、降钙素受体（CTR）、TRAP、破骨细胞分化因子受体（RANK）荧光定量试剂盒均购自天根生化科技（北京）有限公司；……