溶瘤病毒M1诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制

肖晓 周雅思 彭楚茵 邓金清 王来友 朱文博

中圖分类号 R965 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2021）23-2827-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.23.03

摘 要 目的：研究溶瘤病毒M1（简称“M1病毒”）诱导宫颈癌细胞C-33A凋亡的作用及机制。方法：采用MTT法检测不同滴度（0、0.001、0.01、0.1、1、10 PFU/cell）M1病毒处理后C-33A细胞的存活率;将C-33A细胞分为对照组（0 PFU/cell）和M1病毒低、中、高剂量组（0.001、0.01、0.1 PFU/cell），加入相应滴度病毒，培养48 h 后，采用流式细胞仪检测细胞的凋亡率和感染率，采用Western blot法检测细胞中C/EBP 同源蛋白（CHOP）、胱天蛋白酶12（caspase-12）、caspase-3、活化的caspase-3（cleaved-caspase-3）的表达水平。结果：经不同滴度M1病毒处理后，C-33A细胞存活率均显著降低（P<0.01），且呈剂量依赖趋势。与对照组比较，M1病毒各剂量组细胞的凋亡率和感染率以及中、高剂量组细胞中CHOP、caspase-12、cleaved- caspase-3（中剂量组除外）蛋白的表达水平均显著升高（P<0.01）。结论：M1病毒可诱导宫颈癌细胞C-33A的凋亡，其作用机制可能与激活内质网应激通路有关。

关键词 溶瘤病毒M1;宫颈癌;C-33A细胞;内质网应激;细胞凋亡

Effects and Mechanism of Oncolytic Virus M1 Inducing the Apoptosis of Cervical Cancer C-33A Cells

XIAO Xiao1，ZHOU Yasi2，PENG Chuyin1，DENG Jinqing2，WANG Laiyou1，ZHU Wenbo3（1. Dept. of Pharmacy， Guangdong Provincial People’s Hospital/Guangdong Academy of Medical Sciences， Guangzhou 510080， China; 2. School of Pharmacy， Guangdong Pharmaceutical University， Guangzhou 510006， China; 3. Dept. of Pharmacology， Zhongshan School of Medicine， Sun Yat-sen University， Guangzhou 510080， China）

ABSTRACT   OBJECTIVE： To study the effects and mechanism of oncolytic virus M1 （called M1 virus for short） inducing the apoptosis of cervical cancer C-33A cells. METHODS： MTT assay was used to detect survival rate of C-33A cells that were treated with different titers （0， 0.001， 0.01， 0.1， 1， 10 PFU/cell） of M1 virus. C-33A cells were divided into control group （0 PFU/cell）， low-dose， medium-dose and high-dose groups of M1 virus （0.001， 0.01， 0.1 PFU/cell）. After treated with corresponding titers of M1 virus for 48 h， flow cytometry was used to detect the apoptotic rate and infection rate of cells; Western blot was performed to detect the protein expression of C/EBP homologous proteins （CHOP）， caspase-12， caspase-3 and cleaved-caspase-3. RESULTS： After treated with different titers of M1 virus， the survival rate of C-33A cells decreased significantly （P<0.01）， and showed a dose-dependent trend. Compared with control group， the apoptotic rate and infection rate of cells in M1 virus groups as well as the protein expression of CHOP， caspase-12 and cleaved-caspase-3 （except for medium-dose group） in M1 virus medium-dose and high-dose groups were increased significantly （P<0.01）. CONCLUSIONS： M1 virus can induce the apoptosis of cervical cancer C-33A cells， and its mechanism may be related to the activation of endoplasmic reticulum stress pathway.

KEYWORDS   Oncolytic virus M1; Cervical cancer; C-33A cells; Endoplasmic reticulum stress; Cell apoptosis

宫颈癌是常见的女性恶性肿瘤，也是威胁人类生命安全的主要疾病。《2020年全球癌症报告》显示：宫颈癌发病率在女性癌症中排名第2位，发病年龄呈年轻化趋势;2020年全球宫颈癌新发病例超过60万例，死亡病例超过34万[1]。目前，早期宫颈癌的治疗效果较好，但晚期宫颈癌患者生存质量低、病死率居高不下[2-3]。因此，晚期宫颈癌的治疗已经成为临床工作的难点和重点，亟须新的安全有效的临床方案、策略或者药物来治疗。

溶瘤病毒是一类天然的或经过基因修饰的病毒，可特异性地在肿瘤细胞中复制，然后通过直接裂解细胞或者激活免疫来杀伤肿瘤细胞，而不损伤正常细胞[4-5]。……