王 琪 季小忠
江苏省海安市人民医院(226600)
多巢囊肿综合征(PCOS)疾病进展中,患者的排卵障碍以及较高雄激素水平是该病重要危险因素[1];此外机体的慢性低度非特异性炎性反应也是疾病进展的重要原因。NK细胞作为优质细胞群,通过调控炎性反应而参与PCOS进展[2]。辅助性Th1及Th2细胞的动态平衡对机体维持正常细胞及体液免疫有重要意义。妊娠状态下,Th1细胞显著被抑制、Th2细胞表达较高,当机体Th1细胞较高表达时不良妊娠结局升高。细胞毒性T细胞(CD8+Tc)可通过对靶细胞的释放扩大免疫效能[3]。本研究分析PCOS不孕症患者血液中NK细胞、CD8+Tc细胞和Th1/Th2水平与性激素水平关系,为临床有关机理研究提供参考。
以2018年2月-2019年12月本院治疗的PCOS不孕症患者70例为PCOS组。纳入标准:①符合PCOS诊断标准[4];②表现为显著的稀发型排卵或不排卵;③超声检查发现患者单侧或双侧卵巢有直径2~9mm卵泡≥12个;④3个月内均未服用避孕药物;⑤排除自身免疫性疾病、肿瘤以及库欣综合征。另选体检正常排卵女性70例为对照组。所有纳入对象均知情同意,本研究经伦理委员会论证。
1.2.1细胞因子取静脉血样100μl使用RPMI-1640培养液100μl稀释后加入96孔平板中,使用PMA工作液及离子霉素工作液、莫能霉素工作液混合后,在 5% CO2培养箱中培养5h,弃上清液,向上述液体加入CD4-FITC 单克隆抗体10μl。避光保存15min,使用磷酸缓冲液(PBS)清洗,再次使用破膜剂,避光保存15min, PBS液清洗。使用流式细胞仪进行NK细胞、CD8+Tc细胞和Th1/Th2水平检测。
1.2.2性激素均于月经第3~5天空腹采血,月经稀疏甚至闭经者根据患者以往规律月经情况,预测其月经期采血。……