呼吸道病原体九联检联合痰培养在小儿支气管肺炎诊断中的应用价值

杨敏怡，岑丽莲

（1.广东肇庆端州区妇幼保健院 检验科，广东 肇庆 526040；2.广东肇庆市第一人民医院 检验科，广东 肇庆 526040）

0 引言

支气管肺炎为儿童发病率较高的呼吸道感染性疾病，病原体传播速度较快，再加上小儿机体免疫力相对低下，如果不及时予以治疗，可并发多脏器衰竭，危害患儿身心健康[1]。因此，尽早诊疗小儿支气管肺炎有重要的意义。小儿支气管肺炎的临床症状体征无特异性，导致肺炎发生的病原体种类多样，以往临床常单一应用痰培养进行检测，但其操作复杂、耗时长，易受外界因素影响，使其漏诊误诊[2]。近年随着实验室检测技术的不断发展，呼吸道病原体九联检逐渐应用于呼吸道感染性疾病诊断中。现为进一步探究呼吸道病原体九联检联合痰培养在小儿支气管肺炎诊断中的应用价值，特做如下研究。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选择2020年1月-2021年4月到肇庆市端州区妇幼保健院就诊250例支气管肺炎患儿进行研究，纳入标准：①符合《诸福棠儿科学（第7版）》[3]中支气管肺炎的相关诊断标准；②无重要脏器疾病或其他肺部疾病；③家属同意患儿进行痰培养、呼吸道病原体九联检。排除标准：①不配合血样本或痰样本取样的患儿；②伴有其他感染性疾病。此次研究患儿中男133例，女117例，年龄6个月至11岁，平均（5.16±0.92）岁，病程2～14d，平均（7.09±2.24）d。

1.2 方法

1.2.1 痰培养

250例患儿均接受痰培养，具体方法：①采集痰样本：对于不能自主咳痰的儿童，应用口腔一次性无菌吸痰管深插，在负压吸取痰液作为样本，存于无菌容器内送到生物检验室进行细菌培养检测。对于可自主咳痰的儿童，指导其先用清水漱口，深呼吸用力咳嗽，将咳出的痰液保存到无菌容器内送检；②检测步骤：吸取痰样本接种于培养皿中，在室温35℃、二氧化碳浓度为5%的环境生化培养箱中孵育分离培养18～24h，观察菌落的形态，涂片并进行镜检。再挑取单个纯菌落应用梅里埃ATB细菌鉴定分析仪进行菌株鉴定。

1.2.2 呼吸道病原体九联检

对于痰培养阴性的患儿，进一步进行呼吸道病原体九联检，具体方法：采集患儿的肘静脉血样本2mL，先进行离心处理（离心速率3000r/min）10min，吸取上清液采用间接免疫荧光法进行检测，观察血清中的待测抗体与抗原结合情况，除去未能结合的抗体，而抗原-抗体复合物进行干燥、封片处理，在荧光显微镜下观察结果。严格按照九项呼吸道感染病原体IgM抗体检测试剂盒（包括肺炎支原体IgM抗体、嗜肺军团菌1型IgM抗体、肺炎衣原体IgM抗体、Q热立克次体IgM抗体、呼吸道合胞病毒IgM抗体、腺病毒IgM抗体、流感病毒甲型IgM抗体、流感病毒乙型IgM抗体、副流感病毒IgM抗体）说明书进行操作，而且为了保障检测有效性，每一次试验操作均进行阳性、阴性对比。

1.3 观察指标

记录患儿痰培养、呼吸道病原体九联检的检测结果，分析其结果的差异。

1.4 统计学方法

应用Microsoft Excel 2013软件整理数据，并将录入的数据输入到SPSS 20.0中进行处理，细菌种类及病原体类型属于计数资料，以百分比表现，行卡方检验。

2 结果

2.1 痰培养结果

250例患儿痰样本检测中174例阳性（69.60%），76例阴性（30.40%）。174例阳性共检出226株致病菌，以革兰氏阴性菌为主，菌株具体构成比前5名菌种为肺炎克雷伯菌（26.99%）、大肠埃希氏菌（23.45%）、铜绿假单胞菌（12.39%）、金黄色葡萄球菌（11.06%）、鲍曼不动杆菌（9.29%），具体见表1。

表1 痰培养结果

2.2 呼吸道病原体九联检结果

76例痰培养阴性患儿呼吸道病原体九联检均为阳性，其中肺炎支原体占22.37%、嗜肺军团菌 1型占6.58%、肺炎衣原体占13.16%、Q热立克次体占13.16%、呼吸道合胞病毒占6.58%、腺病毒占6.58%、流感病毒甲型占10.53%、流感病毒乙型占6.58%、副流感病毒构成比占14.47%，见表2。

表2 呼吸道病原体九联检结果

3 讨论

小儿支气管肺炎在儿科门诊中极为常见，其病原体感染以细菌、病毒、支原体等为主，临床症状多为咳嗽、咳痰、发热、气促等，严重的还会出现食欲下降、嗜睡，在体征方面可闻及肺部呼吸音变弱、湿啰音，呼吸频率和心率增加等。支气管肺炎患儿若不予以及时有效诊疗，可促使病情急剧恶化，损害各项组织脏器，治疗难度显著增加。因此临床应做好小儿支气管肺炎的诊断，及时为患者提供准确有效的治疗方案，促进其尽快康复。

针对小儿支气管肺炎的诊断，常用方法有痰培养、血培养、肺泡灌洗等，肺泡灌洗为侵入性操作，可损伤患儿机体组织，患儿的耐受性一般较差，临床较为少用；血培养对肺炎致病菌的检测阳性率较低，诊断价值不高[4]。痰培养为当前临床诊断肺炎的主要手段，其能够培养出细菌、真菌等致病菌，而且在培养后进行涂片时还可以鉴别细菌是革兰氏阴性菌还是革兰氏阳性菌，这对于诊断疾病和制定针对性治疗方案具有一定的临床价值[5]。但是痰培养的检测过程复杂，耗时较长，干扰因素多等，极易造成检测不准确，阳性率较低。因此，寻找一种可靠的检测方案与痰培养结合应用对于提升诊断准确率具有重要的意义。

近年也越来越多研究报道[6]，病毒、支原体是呼吸道感染发生主要病原体之一，故在支气管肺炎病原体筛查中应重视非典型病原体的抗体检测。随着现代检测技术的飞速发展，呼吸道感染性疾病的诊断技术也在不断进步，呼吸道病原体九联检应用越来越广泛。呼吸道病原体九联检主要是应用间接免疫荧光法分析受检者血清中肺炎支原体、嗜肺军团菌1型、肺炎衣原体、Q热立克次体、呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒甲型、流感病毒乙型、副流感病毒9种常见病原体的IgM抗体分布情况[7]。其检测原理是在检测过程中将血清样本滴加到载玻片上，使血清抗原与特异性抗体结合发生免疫反应，进而生成抗体复合物，并通过荧光镜检明确形成抗体复合物的相应特异性抗体，进而明确其感染病原体类型[8]。相关研究也证实[9]，呼吸道病原体九联检不仅能够检出单一致病病原体，还能够对多个病原体的感染状况进行诊断，具有特异性强、准确率高、检测速度快等优点，可显著提升肺炎的诊断准确率，使治疗更具针对性，疗效更好。

本研究对支气管肺炎患儿予以呼吸道病原体九联检联合痰培养检测，结果显示，250例患儿痰样本检出174例阳性（阳性率69.60%），共有226株致病菌，构成比前5名分别为肺炎克雷伯菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌。此外，76例痰培养阴性患儿呼吸道病原体九联检均为阳性，其中肺炎支原体占22.37%、嗜肺军团菌1型占6.58%、肺炎衣原体占13.16%、Q热立克次体占13.16%、呼吸道合胞病毒占6.58%、腺病毒占6.58%、流感病毒甲型占10.53%、流感病毒乙型占6.58%、副流感病毒构成比占14.47%，提示痰培养能够对细菌、真菌感染进行鉴别，而呼吸道病原体九联检可检出病毒、支原体、衣原体等病原体，故呼吸道病原体九联检联合痰培养能够全面分析评价患儿细菌、真菌、病毒、支原体、衣原体等病原体感染情况，检测范围广，有效避免漏诊，显著升高检测阳性率，为后续治疗及患儿预后判断提供可靠的依据[10-11]。尤其是对于痰培养阴性的支气管肺炎患儿，更应重视其血清中非典型病原体抗体检测，根据检测结果选用对非典型病原体敏感的药物，予以科学合理的治疗[12]。

综上所述，呼吸道病原体九联检具有操作简单、检测快速、准确率高、特异性强、检测项目多、费用低等优点，可早期发现非典型病原体。在小儿支气管肺炎诊断中联合应用呼吸道病原体九联检和痰培养有协同互补作用，可以全面早期确定致病病原体，提高引起支气管肺炎发生的病原体类型诊断准确率，为临床制定科学合理的治疗方案提供重要的参考依据，也有利于临床合理用药治疗，避免抗生素滥用。