非洲猪瘟实验室防控中存在的问题及对策

李晓露

(秦安县畜牧兽医事务服务中心,甘肃 天水 741600)

非洲猪瘟的临床症状与病理变化和猪瘟的症状与病变化有诸多相似之处,故对其的诊断主要依靠实验室来诊断,而实验室检测能够快速准确的对被检测的发病猪确定是不是非洲猪瘟,不是非洲猪瘟,采取治疗和综合防控措施;是非洲猪瘟立即上报,进行无害化处理。通过对猪场的环境样品采集后监测和检测有无非洲猪瘟,及时切断病原进入猪场,还有对猪场平时的消毒是否到位也是一个检验。实验室监测和检测非洲猪瘟能够将微小病毒变得无处可藏,帮助我们及时确诊发病猪只,完善疫病防控的工作流程,弥补生物安全的漏洞,实验室的这些优势都是其它途径不能够实现的。

1 非洲猪瘟实验室防控中存在的问题

1.1 非洲猪瘟样品的采集不规范

生猪点对点检测采集生猪的血液样品的过程中,在采血管中没有加入抗凝剂,不能够保证采集样品的质量,很多样品在送往实验室的过程中已经出现凝血的现象,导致实验室在检测的过程中要么不能用或者导致检测结果的不准确性增加。最终只能重新到场点采集样品,这样不但增加了防疫工作人员的工作量,同时养殖场点的负责人也会不满,因为短时间频繁的采血对猪的生长是不利的。有些采集人员为了减少采集的量,只对一只猪采集一管血液样品,这样虽然理论上对应该检测的猪样品都采集到了,但是一管样品不能保证实验室检测的准确性,这样在复检的过程中有有可能出现血液样品不足的情况,导致实验检测的进度和准确性都打折扣。

1.2 样品的运输条件和保存时间存在问题

由于个别养殖场被采样数量庞大,采集人员配备不足,当天不能够全部完成血液样品的采样工作,为了图省事,把当天采样的样品不送往实验室,等到一个场全部样品采集完成后一起送往实验室。由于样品数量多,不能够按照规定的保存条件来保存被采集的样品,还有采集时间超过样品最长保存7 d的时限,这样大概率会导致样品的变质和检测结果存在误差,不利于快速检测出有问题的样品,也就不能采取相对应的处置措施。

1.3 样品核酸提取不配套

因为在农业农村部批准使用的试剂盒当中,一般情况下不包含核酸提取试剂盒,不同公司提供的核酸提取试剂盒差异非常大,提取的质量差异也很大,这样导致核酸提取仪器跟核酸提取试剂不是同一个厂家生产的,这样提取样品的量不能够保证,同时检测的结果有可能跟实际情况出现巨大的差异。

1.4 实验室操作人员非洲猪瘟检测技能不高

实验室操作人员在整个检测过程当中是非常重要的一个环节。因为非猪洲瘟的缘故,各地都在市一级的实验室新建了分子生物实验室,但是由于一些实验室人员以前没有接触过分子实验室操作技能,导致有些实验室人员的素质还是不尽如人意,出现了虽然实验室配备了,但是检测结果和检测速度跟不上非洲猪瘟防控的要求

2 采取的对策

2.1 规范采集样品和样品运输保存

样品能在采集后24 h内送抵实验室,环境温度高于25℃ 则可放在 4℃ 左右的容器中运送,其他温度则室温保存运送,超过1 d以上送样-15℃以下保存,样品建议7 d之内进行实验室检测。无菌采集5 mL之后加入抗疑血,冷藏运输,到达检测实验室后,冷冻保存。唾液的采集以栏为单位,通过自制或商品化的棉绳悬挂于栏的某一位置,采食前后2 h吸引猪群撕咬,以悬挂1 h之内为宜,在采集管中加一些有效的酶抑制剂,有效保持唾液样本的活性,建议选用特定的保存液用于唾液样品的采集及保存。

2.2 核酸提取试剂跟仪器要配套使用

当前由于经过很多精细化的检测壁垒实验以后,有很多试剂盒对跟有些PCR仪器不配套使用的情况下是不能适用的。所以在检测过程中我们要根据实际工作的需要选择适用的PCR仪器,因为每一种试剂盒的使用范围,样品种类,灵敏度,最低检测限等是不一致的。兽医实验室使用最多的是荧光定量PCR试剂盒,根据使用试剂盒的检测目的,有目的性的选择试剂盒,特别要注意试剂盒的最低检测限,这样才能最大限度的保证实验检测的准确率。

2.3 加大实验室人员的培训

在今后的工作中对所有实验室人员要制定专门的分子实验室培训计划,只有熟练的掌握了分子实验室的操作规程和技能,才能在后面的防控中不掉链子。全力做好实验室人员的新技能的培训,使其不断学习新技术、新方法,有本领在手才能更好的开展各项工作。

2.4 健全配套硬件设施

配备必要的工具和废话,减少工作量,减少操作步骤,才能让检测人员在长时间的检测工作中不仅完成检测任务,而且能够把生物安全做好。同时,对硬件设施进行优化设置,减少人员在工作出现错误的几率也很重要,比建设实体隔断,有时效果更好。

3 按照国家防控方案用好专项基金可有效遏制非洲猪瘟蔓延

非洲猪瘟关键是要防控好,防大于治,因此要认真贯彻落实《全国非洲猪瘟防控工作方案农牧字(2019)12号》,严格内防外堵,注重强基固本。不断加强生物安全,扩大检测范围,提高端点处置能力;改进生猪(肉)调动;成立非瘟专项基金;开展防控技术攻关,有效遏制非洲猪瘟蔓延。开展系统而科学的流行病学调查,找出问题的症结并完善。