肤尔康胶囊质量标准提升研究

张恩 潘泰 周小波

基金项目：

贵州省中医药管理局项目［QZYY-2021-175］；红花岗区科技局项目［遵红科合社字（2019）22号］。

作者简介：

张恩（1991—），男，汉族，硕士，主管中药师，研究方向为医院制剂研发。E-mail：781302656@qq.com

通信作者：

【摘  要】

目的： 提高肤尔康胶囊的质量标准，保证制剂的安全性和有效性。方法： 从定性、定量两方面进行研究，用薄层色谱法（TLC）对肤尔康胶囊中苦参、白芷、牡丹皮三味中药进行定性鉴别；用高效液相色谱法（HPLC）测定肤尔康胶囊中绿原酸的含量。结果：苦参、白芷、牡丹皮的薄层色谱斑点清晰，分离效果较好、无阴性干扰；绿原酸的质量浓度在0～120μg/mL范围内呈良好线性关系（r=0.9994）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD均≤1.2%；平均加样回收率为98.1%，RSD=1.3%（n=6）。结论：建立的方法有较强的专属性及稳定性，可用于肤尔康胶囊的质量控制。

【关键词】

肤尔康胶囊；质量标准；薄层色谱法；高效液相色谱法

【中图分类号】R286.0    【文献标志码】 A    【文章编号】1007-8517（2023）24-0046-04

DOI：10.3969/j.issn.1007-8517.2023.24.zgmzmjyyzz202324010

Study on Quality Control of Fuerkang Capsules

ZHANG En  PAN Tai  ZHOU Xiaobo

Zunyi Hospital of Traditional Chinese Medicine， Zunyi 563000，China

Abstract：

Objective Improve the quality standard of Fuerkang capsules to ensure the safety and effectiveness of the hospital pharmaceutica. Methods From the qualitative and quantitative analysis， TLC（thin layer chromatography） was used to identify Sophorae Flavescentis Radix， Angelicae Dahuricae Radix and Moutan Cortex in Fuerkang capsules; The content of Chlorogenic acid in Fuerkang capsules was determined by HPLC （high performance liquid chromatography）. Results The TLC spots of Sophora Flavescentis Radix， Angelicae Dahuricae Radix and Moutan Cortex peel were clear， with good separation effect and without negative interference; The mass concentration of Chlorogenic acid showed good linear relationship in the range of 0～120μg/mL （r=0.9994）; RSDS of precision， stability and reproducibility tests were all lower than 1.2%. The average recovery was 98.1%， RSDS=1.3%（n=6）. Conclusion The established method has well specificity and stability， and can be used for the quality control of Fuerkang Capsules.

Keywords：

Fuerkang Capsules; Quality Standard; TLC；HPLC

膚尔康胶囊（批准文号：黔药制字Z20030347）是遵义市中医院自行研发的医院制剂，处方由金银花、苦参、白芷、牡丹皮、生地黄等药物组成，具有清热凉血、祛风止痒的功效，主治寻常型银屑病、慢性荨麻疹、老年性皮肤瘙痒等［1-2］。该制剂是我院皮肤科常用专科用药，在临床使用中有显著疗效、无不良反应，但该制剂原质量检测项目仅为胶囊剂的常规检查项，缺乏系统的质量控制标准，质量安全性难以有效控制。为较好地控制该制剂质量，保证临床用药的安全性和有效性，课题组采用薄层色谱法及高效液相色谱法对肤尔康胶囊进行定性鉴别、含量测定研究，以期建立较完善的质量控制标准。

1  仪器与材料

1.1  仪器  岛津LC-20AD高效液相色谱仪，SPD-M20二极管阵列检测器，LcsoLution色谱数据工作站；Diamonsil C18 （ 4.6 mm× 250 mm，5μm） 色谱柱；梅特勒EL104电子分析天平（分度值0.01mg）；SK1200H型超声清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；HH-W600数显三用恒温水箱（江苏金坛市亿通电子有限公司）。

1.2  药品与试剂  肤尔康胶囊（遵义市中医院自制，样品批号分别为210901、210902、210903）；绿原酸对照品（批号：120913-201109）、苦参对照药材（批号：121367-200605）、白芷对照药材（批号：121065-201406）、牡丹皮对照药材（批号：120905-201610）均在中国食品药品检定研究院采购；乙腈（德国Merck公司）为色谱纯；其他试剂均为色谱纯；水为自制重蒸馏水。

2  方法与结果

2.1  薄层色谱鉴别

2.1.1  苦参的薄层色谱鉴别［3-4］  取肤尔康胶囊内容物3 g，加氨水1.0 mL，三氯甲烷20 mL，回流提取20 min，冷却过滤，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷3 mL溶解作为供试品溶液。取缺苦参的肤尔康胶囊阴性样品3 g，同法做成阴性对照溶液，另取苦参对照药材0.1 g，三氯甲烷10 mL，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020 年版四部通则0502）试验，吸取上述3种溶液3～4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-氨水（8∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]0.1）为展开剂，用浓氨试液饱和30 min，展开，取出晾干，喷稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰（如图1 A所示 ）。

2.1.2  白芷的薄层色谱鉴别［5-6］  取肤尔康胶囊内容物2 g，加乙醚20 mL，浸泡1 h，时时振摇，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯2 mL溶解作为供试品溶液。另取缺白芷的肤尔康胶囊阴性样品同法做成阴性对照溶液，取白芷对照药材0.1 g，加乙醚10 mL，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020 年版四部通则0502）试验，吸取上述3种溶液各3～4 μL，点于同一以羧甲基纤维素钠制备的硅胶GF254薄层板上，以苯-乙酸乙酯（5∶[KG-*3/5]1）为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯（254 nm）下检视。供试品色谱中，在与对药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰（如图1 B所示）。

2.1.3  牡丹皮的薄层色谱鉴别［7-8］  取肤尔康胶囊内容物3 g，加10 mL乙醚，密塞，震荡10 min，滤过，滤液挥干，残渣加丙酮5 mL使溶解，作为供试品溶液。取缺牡丹皮的肤尔康胶囊阴性样品同法做成阴性对照溶液，另取牡丹皮对照药材0.5 g，加丙酮10 mL，同法制成作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2020 年版四部通则0502）试验，分别吸取供试品溶液，阴性对照溶液各5 μL、对照药材溶液2 μL，点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯（3∶[KG-*3/5]1）为展开剂，展开，取出晾干，置紫外光灯365 nm荧光检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰（如图1 C所示）。

2.2  含量测定［9-10］

2.2.1  色谱条件与系统适用性试验  C18色谱柱；以乙腈-0.4%磷酸溶液（13∶[KG-*3/5]87）为流动相；柱温不超过20 ℃；流速为1.0 mL/min，检测波长为327 nm。理论板数按绿原酸峰计算应不低于8000。

2.2.2  溶液的制备  对照品溶液的制备：精密称定绿原酸对照品10mg，置于10 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，得1mg/mL对照品溶液。

供试品溶液制备：取本品内容物约1 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入40%乙醇50 mL，称定重量，摇匀，超声处理（功率500 W，频率40 kHz）30 min，放冷，再称定重量，用40%乙醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm滤膜滤过，取续滤液，即得。

阴性对照溶液的制备：按处方比例称取缺金银花的其他药材，按照肤尔康胶囊的制备工艺制备缺金银花的阴性对照品，再按供试品溶液制备方法制得阴性对照溶液。

2.2.3  专属性试验  精密吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10 μL，按“2.2.1”色谱条件进样测定。结果显示，供试品色谱在与对照品色谱相应位置上有色谱峰，而阴性对照色谱在与对照品色谱相应位置上未出现色谱峰，结果表明该法无阴性干扰，专属性强（如图2 A、图2 B、图2 C所示）。

2.2.4  线性关系考察  取绿原酸对照品溶液，配置成绿原酸浓度为0μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、120μg/mL对照品溶液，分别精密吸取上述各浓度对照品溶液10 μL，注入液相色谱仪，测定蜂面积。以绿原酸含量为横坐标，对应峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为Y=2547.2X+20.075，r=0.9994，说明绿原酸对照品在0～120μg/L范围内，峰面积值与进样量呈良好的线性关系。

2.2.5  精密度试验  精密吸取对照品溶液10μL，重复进样6次，记录峰面积并计算RSD。结果显示RSD为1.20%（n=6），表明仪器精密度良好。

2.2.6  稳定性试验  精密吸取供试品溶液10 μL，分别于0 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h进样，测定峰面积。结果显示绿原酸RSD为0.13%（n=6），表明供试品在24 h内稳定性良好。

2.2.7  重复性试验  按拟定的含量测定条件及方法，取同一批号样品，平行称取6份进行含量测定。 结果显示平均含量为5.8275mg/g，RSD为0.66%（n=6），表明重复性良好。

2.2.8  加样回收试验  称取已知含量的样品9份，每份约0.5 g，精密称定，精密加入一定量的绿原酸对照品，按标准正文中绿原酸含量測定方法进行测定，计算回收率，结果显示该方法平均回收率为98.1%，RSD为1.3%，表明其回收率较好（见表1）。

2.2.9  样品含量测定  分别称取3批肤尔康胶囊样品约1 g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加40%乙醇50 mL，称定重量，摇匀，超声处理（功率500 W，频率40 kHz）30 min，放冷，再称定重量，用40%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过（0.45 μm滤膜），取续滤液，测定含量（见表2）。结果显示肤尔康胶囊3个批次样品的绿原酸平均含量为5.72mg/g，按其平均含量的80%设限，规定本品金银花含量以绿原酸计不得少于4.6mg/g。

3  结果与讨论

特色医疗机构制剂在医疗服务中起着十分重要的作用，其质量的好坏关系着临床用药的安全性及有效性，提升医疗机构制剂质量标准在促进医院科研、教学，保障用药安全等方面有着重要意义［11-14］。肤尔康胶囊是我院使用了二十多年的院内制剂，具有清热凉血、祛风止痒的功效，主治寻常型银屑病、慢性荨麻疹、老年性皮肤瘙痒等［1-2］，显著的临床疗效得到广大患者的认可。为了进一步规范工艺，有效控制肤尔康胶囊的质量，发挥肤尔康胶囊在治疗银屑病、慢性荨麻疹等顽固性皮肤病的优势，课题组对肤尔康胶囊的质量标准进行了提升研究。

在薄层色谱研究中，课题组参考相关文献对肤尔康胶囊中全部药味进行薄层鉴别试验，其中苦参、白芷、牡丹皮三味药材斑点清晰，分离度较好，专属性强，故选择上述三味药材作为肤尔康胶囊的定性鉴别指标。在金银花、生地黄等其他药味的鉴别过程中，存在阴性干扰、斑点不清晰等因素，难以鉴别，故未纳入质量标准中。

在建立含量测定方法时选择了君药金银花中的绿原酸作为含量测定指标，绿原酸具有保护心血管、抗菌、抗病毒、增强免疫力等药理作用［15-17］，因此研究制定绿原酸含量限度对保证肤尔康胶囊的临床疗效具有重要作用。

供试品溶液制备过程中考察了提取溶剂、提取方法和提取时间，综合考虑提取率及操作时间，选择以40%乙醇，超声提取30 min作为产品供试品溶液制备方法。在流动相的选择过程中，课题组参照药典方法在其基础上进行优化，确定以乙腈-0.4%磷酸为流动项，所得色谱图分离效果良好，解决了色谱峰拖尾的问题。根据考察结果显示，绿原酸含量在0～120μg/mL的范围内，线性回归方程是Y=2547.2X+20.075，r=0.9994，其线性关系良好；精密度试验结果RSD为1.20%，稳定性试验结果RSD为0.13%，重复性试验结果RSD为0.66%；回收率为98.1%，RSD为1.3%。

4  结论

课题组建立的鉴别方法操作简便，专属性较强，得到的TLC图谱斑点清晰，无阴性干扰；建立的含量测定方法专属性强、稳定性、重现性较好，可用于肤尔康胶囊的质量控制。该研究为肤尔康胶囊的质量控制提供了理论基础，有助于提高该制剂的稳定性与可控性。

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（收稿日期：2023-04-03  编辑：陶希睿）