694家医疗机构性病实验室沙眼衣原体室间质评结果分析

覃晓琳, 陈洋, 薛耀华, 徐青青, 欧江丽, 许巧珍, 吴兴中,陈文韬, 尹笑纳, 周涵, 张自岩, 刘丹, 黄进梅, 郑和平

1.南方医科大学皮肤病医院, 2.广州市性传播疾病精准防控重点实验室,广东 广州 510091

沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis,Ct)感染是全球流行率最高的细菌性性传播感染,每年估计有1.3亿新增病例,造成了巨大的经济和社会负担[1-2]。其中超过70%的女性泌尿生殖道感染者、80%的男性泌尿生殖道感染者和90%的直肠和咽部感染者为无症状感染[3-4]。如果不及时筛查与治疗,不仅会加剧Ct的传播和流行[3],还可导致严重的并发症,如男性可引起非淋球菌性尿道炎、附睾炎和直肠炎,女性可导致宫颈炎、盆腔炎、不孕和宫外孕等,同时Ct感染还可促进HIV的感染和传播[4-6]。

我国生殖道Ct感染发病率从2015年的37.18/10万增至2019年的55.32/10万,年均增长10.44%[7]。近年来,广东省生殖道Ct感染率呈快速上升趋势,位居我省5种法定性病(生殖道Ct、梅毒、淋病、尖锐湿疣和生殖器疱疹感染)报病之首[8]。室间质评是多家不同实验室对相同样本进行检测,评价检测结果的准确性,可客观反映各实验室的检测能力,同时可以评价不同实验方法和试剂品牌的检测性能,提高识别检测误差的能力[9-11],对于提高Ct检出率和实验室诊断质量非常重要。南方医科大学皮肤病医院作为广东省皮肤性病防治中心,自2003年起开展性病实验室规范化建设工作与质量控制体系建设[12]。为了提高广东省性病实验室Ct检测质量和能力,2021年本中心组织全省694家医疗机构开展了Ct检测室间质评活动,现报告如下。

1 对象与方法

1.1 质评对象

广东省21个地市共694家实验室参与沙眼衣原体室间质评,包括二级及以上级别医疗机构388家,妇幼机构82家,皮防慢病机构79家,一级或其他医疗机构145家。其中规范化性病实验室537家,普通性病实验室157家[9]。

1.2 质控样本

质控样本由广东省皮肤性病防治中心省性病中心实验室负责制备。使用的Ct D型由中国疾病预防控制中心性病防治中心尹跃平教授提供,并在HeLa细胞中培养。收集Ct感染细胞上清液中的原体和细胞中的网状体,56 ℃水浴灭活30 min。对样品进行超声处理并经0.45 μm滤器过滤去除碎片。为了更好地模拟临床样本,本次质控品使用临床不含有Ct但含有其他病原体(淋球菌、念珠菌、生殖支原体、HPV和解脲脲原体等)的宫颈/阴道或尿道分泌物制备成混悬稀释液,梯度稀释Ct阳性培养物制备成3份阳性质评样品,包括强阳、中等和弱阳性样本;另2份阴性样品为上述不含Ct的宫颈/阴道或尿道分泌物稀释液。采用罗氏和上海科华2种不同品牌核酸检测试剂盒及凯创和艾博2种不同品牌快速检测试剂盒对质控品进行靶值检测。调试好的质控品经过分装、冷冻干燥后由公司密封包装贴标签。使用广东省性病实验室质评信息系统对每个样品进行随机唯一编号。冻干样品可在4 ℃或-20 ℃下稳定3年以上,并定期监测确保样品的有效性和稳定性。

1.3 方法

1.3.1 质评方法 质控样本经冷链运输至各参评实验室。各实验室收到质控样本后,在规定时间内按照日常Ct检测方法进行检测,不限方法。通过我省性病实验室管理信息系统上报结果,上报前需更新参评实验室所在机构的性质和实验室等级等基本信息,结果上报内容包括样本编号、检测结果、使用方法和试剂品牌等。由本中心负责结果分析和统计,并形成结果通报进行反馈。

1.3.2 预期值确定 本次质控品Ct预期值包括3份阳性,2份阴性。 当回报结果与预期结果一致得2分,不一致得0分。考评结果采用百分制,所有考核项目换算成百分制得分之和除以考核项目数,即为考核总得分,总分60分及以上为合格。符合率=考核项目得分/考核项目总分×100%。合格率=合格数/参评机构数×100%。

2 结果

2.1 不同性质医疗机构Ct检测能力比较

694家性病实验室均回报结果,总体符合率为96.11%,合格率98.70%。参与机构中二级及以上医疗机构占比最高(55.91%)。比较不同性质医疗机构Ct实验室检测能力发现,皮防系统(或慢病系统)结果符合率最高(98.23%),一级或其他医疗机构符合率则相对较低(94.90%);妇幼机构合格率(100%)最高(表1)。

表1 不同性质医疗机构参加Ct实验室检测能力分析

2.2 不同类型性病实验室检测能力比较

2.3 不同级别性病实验室检测方法比较

表2 不同级别性病实验室不同检测方法实验室检测能力分析

2.4 不同检测方法结果分析

表3 广东省不同Ct质控标本实验室检测能力结果分析

3 讨论

室间质评是第三方机构将质控标本以盲样的形式发到各参评实验室进行检测,目的是评价不同实验室对同一样本检测结果的一致性,从而提高参评实验室Ct检测结果的准确性和可比性[9-11]。广东省性病实验室规范化建设自2003年开展至今[12],已建成由540家规范化性病实验室组成的性病实验室与质量控制网络;Ct室间质评从2004年开始在全省范围开展,参评实验室从2004年的19家[13]增至2021年的694家,且总体符合率从75.4%提升至96.11%。随着室间质评的持续开展,广东省Ct实验室检测能力稳步提升[14]。

不同医疗机构Ct检测能力有所不同,本次室间质评中皮防系统(或慢病系统)总体符合率最高,其次是妇幼机构和二级及以上医疗机构,而一级及其他医疗机构总体符合率最低,提示皮防慢病机构作为广东省性病防治专业机构,具有更高的Ct检测能力,对推动各地市性病防治工作具有重要意义;同时,综合医院随着等级的提升,Ct检测能力也随之提升。

规范化性病实验室建设和完善的实验室质量体系是性病实验室质量保障的基础[9]。广东省经过多年的性病实验室规范化建设及管理实践,对本省性病实验室检测质量提高具有重要推动作用。本次质评显示,全省规范化性病实验室的室间质评得分显著高于普通性病实验室,提示性病实验室规范化建设和质量管理的重要性。

有研究表明核酸检测方法对淋病、衣原体、生殖器分枝杆菌、滴虫病和有症状的HSV-1和HSV-2的诊断具有较高的敏感性(86.1%～100%)和特异性(97.1%～100%)[4]。核酸扩增方法具有灵敏度和特异性高等优点,被认为是Ct感染检测的首选方法和“扩大金标准”[14-18]。但由于核酸检测方法对实验室条件、环境、设备及人员要求较高,我国Ct核酸检测方法尚未广泛开展[14,18]。本次室间质评回报结果的694家医疗机构实验室中,有14.70%的实验室采用了核酸检测方法,相比2015年的7.15%[13]有了显著提高;一级中心及以上级别性病实验室核酸检测方法使用占比达到28.37%,显著高于普通和一级性病实验室,提示高级别规范化性病实验室Ct检测能力更强。本次室间质评结果显示Ct核酸检测方法相比其他方法显现出更高的符合率、特异性和敏感性,与Fredlund等[19]研究结果一致,因此推荐有条件的实验室应优先选择核酸检测方法。

总之,本研究参评实验室包括较多基层医疗机构,覆盖面广,客观反映了不同医疗机构对Ct检测的能力,发现总体上广东省Ct检测能力较高,而普通性病实验室、基层医疗机构和部分欠发达地区医疗机构Ct检测能力相对较弱,提示广东省还需进一步加强规范化性病实验室建设,加强基层医疗机构和不发达地区Ct检测能力。