老年2型糖尿病患者细胞免疫状态及T细胞亚群的观察

符琳琳 张消克

(首都医科大学附属复兴医院干部病房，北京 100038)

临床研究发现2型糖尿病病人T细胞亚群明显异常，表明患者细胞免疫功能的异常，这可能是2型糖尿病患者易发生感染而又不易治愈的原因之一〔1〕。

1 对象与方法

1.1 对象 2型糖尿病组为我院住院患者40例，其入选标准为:①符合1997年WHO建议的糖尿病诊断及分型标准的2型糖尿病患者;②年龄＞60岁;③排除自身免疫系统疾病，恶性肿瘤、严重的肝肾功能不全、各种形式的感染及血液病、近期应用免疫制剂等。糖耐量异常组为我院住院患者35例，其入选标准为:①符合1997年WHO建议的糖尿病诊断及分型标准的2型糖尿病患者;②年龄＞60岁;③排除自身免疫系统疾病，恶性肿瘤、严重的肝肾功能不全、各种形式的感染及血液病、近期应用免疫制剂等。非糖耐量异常组:为我院住院患者32例，①空腹和餐后2 h血糖(FPG，2 h PG)正常。②年龄＞60岁;③排除自身免疫系统疾病，恶性肿瘤、严重的肝肾功能不全、各种形式的感染及血液病、近期应用免疫制剂等。各组研究对象的一般资料见表1。

1.2 方法 受试者均隔夜空腹10 h，于次晨来院采集肘正中静脉血，立即分送检测 T细胞亚群、FPG及糖化血红蛋白(HbA1c)。计算体质量指数(BMI)。T细胞亚群用流式细胞仪单克隆免疫荧光法测定，采用FACSVantage型流式细胞仪，试剂用美国BD公司，鼠抗人 CD4-FITC、CD8-PE、CD3-PE-CY5单克隆抗体。其他检测指标:空腹血糖采用全自动生化分析仪进行分析，HbA1c用氧化酶法，试剂盒采用北京原子高科技股份有限公司的产品，批内变异系数＜10%，批间变异系数＜15%。1.3 统计学分析 采用SPSS16.0软件，正态分布数据两组以上的均数比较用方差分析。非正态分布数据采用非参数检验。分类变量组间率的比较用χ2检验，多个样本率两两比较用χ2分割法。

2 结果

糖尿病组CD3+、CD4+较糖耐量异常组及非糖耐量异常组显著降低，有显著差异(P＜0.01)，糖耐量异常组较非糖耐量异常组CD3+、CD4+降低，有显著差异(P＜0.01)。糖尿病组及糖耐量异常组CD8+较非糖耐量异常组降低，有显著差异(P＜0.05)。非糖耐量异常组 CD4+/CD8+较其他两组明显增高(P＜0.01)。见表2。

表1 各组研究对象的一般资料(x±s)

表2 各组之间T细胞亚群的关系

3 讨论

淋巴细胞包括参与细胞免疫的T淋巴细胞(CD3+)和主要参与体液免疫的B淋巴细胞(CD19+)。T淋巴细胞是人体重要的免疫细胞群〔2〕，而T淋巴细胞又分为辅助性T淋巴细胞(CD3+CD4+)和抑制性/细胞毒性T淋巴细胞(CD3+CD8+)。CD4+T细胞可分为Th1和Th2细胞，Th1细胞在正常情况下主要介导与细胞毒和局部反应有关的免疫应答;Th2可刺激B细胞的增生并产生抗体，与体液免疫有关。且CD4+T细胞可产生多种细胞因子。调节机体免疫应答。CD8+T细胞包括杀伤性T细胞(CTL)和抑制性T细胞(Ts)，CTL可分泌穿孔素、释放多种丝氨酸酯酶(可活化穿孔素)、分泌淋巴毒素等，和抗原结合诱导靶细胞的凋亡。各群淋巴细胞的数目和相对比例都在一定的范围内。

T淋巴细胞亚群变化的临床意义:CD4+和CD8+细胞的比值(常用的正常参考值为1.4～2.5)＞2.5表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应;比值＜1.4一般被称为“免疫抑制”状态，常见于①免疫缺陷病，如获得性免疫缺陷病，②恶性肿瘤，③再生障碍性贫血、白血病，④某些病毒细菌感染，⑤自体免疫性疾病的活动期。

高血糖及酮症酸中毒的状态可使体内前炎症因子及CD4+及CD8+活化，高血糖及自由脂肪酸水平升高提供了机体氧化的环境及激活炎症反应的途径〔3〕，使感染易发生且不易治愈。高血糖状态及细胞膜糖基化终末产物导致糖尿病病人粒细胞功能受损和T细胞对丝裂素反应减低。有研究发现:2型糖尿病病人外周血单个核细胞对植物血凝集和其他丝裂原的反应增殖能力比正常对照组明显减低，说明存在细胞介导的免疫功能损伤。糖基化终末产物及T细胞表面糖化终末产物可影响机体的免疫功能及炎症反应过程，使机体抵抗力下降，易导致感染的发生及感染发生后不易治愈。

CD4/CD8比值降低也是某些疾病(如乙肝)严重程度和预后不良的重要标志〔4〕。本研究发现T细胞亚群数量和各亚群之间的比例和病人的血糖水平明显相关。非糖耐量异常组、糖耐量异常组、糖尿病组的CD4/CD8比值顺序降低。CD4+T细胞减少，细胞因子如IL-2等减少，协助B细胞产生抗体减少，同时，CD8+T相对增多，对CD4+T细胞的抑制作用增强，抑制机体的免疫功能，导致机体容易并发感染，且由于免疫功能的异常使得感染不易治愈。

1 樊建开，徐兆东，蔡惠群，等.糖尿病肢端坏疽患者T细胞亚群的变化与临床意义〔J〕.中国中西医结合外科杂志，2003;9(1):12-4.

2 Tanaka S，Isoda F，Ishihara Y，et al.T lymphopenia in relation to body mass idex and TNF-αin human obesity adequate weight reduction can be corrective〔J〕.Clin Endocrinol(Oxf)，2001;54(3):347-54.

3 Stentz FB，Kitabchi AE.Activated T lymphocytes in type 2 diabetes implications from in vitro studies〔J〕.Curr Drug Targets，2003;4(6):493-503.

4 王秀敏，付春彬，董洪林.外周血T淋巴细胞亚群及血清Sil-2R检测在慢性乙型肝炎病人中的意义〔J〕.中国老年学杂志，1997;2(1);22.