益肾宁汤剂对慢性肾小球肾炎患者血清TGF-β1、MMP-9的影响※

公　敏　通讯作者：李　红

(1.山西中医学院，太原030024 2.山西中医学院中西医结合医院)

益肾宁汤剂对慢性肾小球肾炎患者血清TGF-β1、MMP-9的影响※

公敏1通讯作者：李红2

(1.山西中医学院，太原030024 2.山西中医学院中西医结合医院)

慢性肾小球肾炎(CGN)病情缠绵，反复发作，是发病率最高的慢性肾脏病。CGN是慢性肾衰竭的主要原发疾病，可明显降低患者生活质量[1]。西医对本病的发病机制已较明确，但是无较好的治疗方法，且副作用大，费用较高。中医对本病治疗有一定优势，但微观上作用机制并未明确。现代研究认为，细胞外基质(ECM)合成和降解过程的动态平衡失调可导致ECM过度积聚，成为肾小球硬化的主要病理改变[2]。其中，TGF-β1、MMP-9是参与该过程的主要因子，促进肾脏组织纤维化的形成。本文以ELISA检测方法测定CGN患者治疗前后TGF-β1、MMP-9变化情况，探讨益肾宁汤剂对CGN的作用靶点，报道如下。

一般资料

以70例CGN患者为研究对象，均于2013年10月—2014年10月就诊于我院肾内科，中医辨证属于脾肾气虚型。患者年龄25～60岁，平均(43.4±2.4)岁，男36例，女34例，同时伴高血压者16例，伴糖尿病者12例，治疗前病程3～10年，平均(6.5±2.8)年。纳入标准[3]：临床表现为起病缓慢，病程迁延，可轻可重，或时轻时重，随病情发展，可有肾功能减退、贫血、电解质紊乱等情况出现；可有蛋白尿和(或)水肿、高血压、血尿及管型尿等表现中的一种或数种；24 h尿蛋白在0.15 g/L以上，但低于3.5 g/L、Cr低于133 μmol/L。排除标准：①肾功能不全失代偿期以上的患者；②药物过敏史者；③经检查证实为糖尿病肾病、高血压肾损害、系统性红斑狼疮、药物性肾损害等继发因素所致者；或者其他原因导致TGF-β1、MMP-9水平发生异常者；④伴有意识障碍、精神异常者、妊娠者。中医辨证分型属脾肾气虚型，主症：腰痛；疲倦乏力，或浮肿；纳少或腹胀；次症：大便溏，尿频，或夜尿多，或遗尿；舌质淡、有齿印，苔薄黄，脉细弱。符合主症1项及次症1项，或次症2项可诊断为脾肾气虚证。所有病例以入院病例号为编号，根据随机数字表，将患者随机分成两组，每组35例。两组患者一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

治疗方法

对照组患者给予常规治疗，并服用10 mg洛汀新(盐酸贝那普利片，批准文号：国药准字H20000292，生产企业：北京诺华制药有限公司，规格5 mg×7片×2板/盒)，2次/d，早晚各1次。治疗组同时服用益肾宁汤剂(黄芪30 g，党参15 g，生地黄15 g，金樱子15 g，当归15 g，川芎15 g，丹参30 g，青风藤15 g，石韦30 g，白茅根30 g，白花蛇舌草30 g，砂仁6 g，鳖甲20 g，水蛭粉6 g)，1剂/d，采用全自动入药煎药机煎煮，每剂2袋，每袋250 mL，每次1袋，早晚餐后半小时温服。治疗4周为1个疗程，观察疗效。

观察指标：分别于治疗前后监测肾功指标(BUN、Cr)，以ELISA检测方法测定TGF-β1、MMP-9变化情况。

治疗结果

疗效观察：参照《中药新药临床研究指导原则》[4]：①临床控制：尿常规检查蛋白转阴，或24 h尿蛋白定量(UTP)正常，肾功能正常；②显效：尿常规检查蛋白减少2个“+”，或UTP减少≥40%，肾功能正常或基本正常；③有效：尿常规检查蛋白减少1个“+”，或UTP减少<40%，肾功能正常或有改善；④无效：临床表现与上述实验室检查均无改善或加重者。

结果：治疗后，治疗组总有效率优于对照组总有效率(P<0.05)，见表1。

表1　治疗组与对照组患者临床疗效比较[例(%)]

注：与对照组比较，△P<0.05

肾功指标变化：治疗后，治疗组BUN、Cr、UTP较治疗前明显改善(P<0.05)；并且优于对照组治疗后各指标(P<0.05)，见表2。

表2　治疗组与对照组患者肾功指标变化比较±s)

注：与对照组比较，△P<0.05；与治疗前比较，*P<0.05

组间TGF-β1、MMP-9水平变化：治疗后，治疗组TGF-β1、MMP-9水平较治疗前明显改善(P<0.05)，并且优于对照组(P<0.05)，见表3。

表3　治疗组与对照组患者TGF-β1、MMP-9水平比较

注：与对照组比较，△P<0.05；与治疗前比较，*P<0.05

讨论

CGN的中药治疗成为现代热点研究课题，由于中药治疗的整体观以及多靶点特征，使其在CGN等慢性疾病治疗中具有突出优势，临床应用中相对副作用小，安全性高，可长期服用。

大量文献资料显示[5～7]，根据分型论治，中药在CGN治疗上临床实践经验丰富，并且取得良好临床效果。益肾宁为临床治疗CGN经验方，可有效降低蛋白尿，改善临床症状，但是关于益肾宁作用机制相关资料缺乏，故从分子生物学加以研究和分析。

现代研究表明[8，9]，CGN发病机制主要可归结为细胞外基质(ECM)更新代谢的动态平衡失调，导致ECM进行性积聚，促进肾小球纤维化的形成。该过程机制十分复杂，有多种细胞因子参与，其中TGF-β1、MMP-9为主要相关因子。MMP-9属于基质金属蛋白酶类(MMPS)中的Ⅳ型胶原酶/明胶酶类，是调节ECM的主要降解酶。原因在于Ⅳ型胶原纤维构成肾小球、肾小管基底膜，MMP-9对其降解功能具有专一性，可维持基底膜完整性[10]。MMP-9水平下调，可导致ECM过度积聚，肾小球逐渐硬化。所以检测血液中MMP-9浓度对早期慢性肾小球疾病有一定诊断价值。TGF-β1可促进炎症反应，是致纤维化作用最强的细胞因子。它通过直接刺激ECM分子合成，抑制T、B淋巴细胞分泌过程，抑制机体免疫功能。TGF-β1还可抑制MMPS的分泌，增强MMPs的内源性特异性抑制因子(TIMPs)活性，从而阻断ECM降解途径，致使ECM沉积[11]。因此，TGF-β1、MMP-9在肾脏疾病发生发展中的变化作用备受重视，成为重要研究指标。

本研究显示，西医治疗基础上联合益肾宁治疗CGN，可下调TGF-β1水平，上调MMP-9水平，可促进ECM降解，可能是益肾宁达到临床疗效的机制所在，起到抗肾脏组织纤维化的作用。益肾宁以益气健脾补肾、活血利湿清热立法。中药组成中，黄芪、党参配伍共同补气健脾，近代药理研究发现两药合用可以调节机体的免疫功能，改善机体代谢，同时减少蛋白质的流失[12]。生地黄养阴生津，补肾的同时理脾胃之伤，并且提高机体免疫能力。活血养血之品中当归、川芎、丹参联合应用，有效改善患者血液高凝状态，促进纤维蛋白的降解，同时配合多种清热、利尿、通淋之品，发挥抗氧化作用，抑制炎症反应，对抗肾组织的损伤。

诸药合用，形成多靶点的治疗特色，从而发挥抗纤维化作用。

参考文献

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(收稿日期2015-08-31)

※课题项目：2014年山西省卫生厅科技攻关项目