高效液相色谱法测定静脉留置针中双酚A的残留量

汤智 黄敏菊 党玺芸 国家食品药品监督管理总局广州医疗器械质量监督检验中心 （广东 广州 510663）

高效液相色谱法测定静脉留置针中双酚A的残留量

汤智 黄敏菊 党玺芸 国家食品药品监督管理总局广州医疗器械质量监督检验中心 （广东 广州 510663）

利用高效液相色谱法建立了一次性使用静脉留置针中双酚A（BPA）残留量的检测方法，相关系数是0.999，回收率为98.4%～113.4%，重复性好，定量准确，为制定医疗器械产品中添加剂BPA溶出量检测标准提供实验依据。

液相色谱法 静脉留置针 双酚A

双酚A，简称BPA，是世界上使用最广泛的工业化合物之一，主要用于生产聚碳酸酯、环氧树脂、聚砜树脂、聚苯醚树脂、不饱和聚酯树脂等多种高分子材料，也可用于增塑剂、阻燃剂、抗氧剂、热稳定剂、等精细化工的制造。添加BPA可以使塑料无色透明、耐用、轻巧和具有良好防冲击性。但越来越多的研究证明，BPA对胎儿，婴儿和儿童的大脑，行为和前列腺的健康可能造成危害，导致内分泌失调，癌症和新陈代谢紊乱。欧盟认为含双酚A奶瓶会诱发性早熟，从2011年3月2日起，禁止含生产化学物质双酚A（BPA）的婴儿奶瓶。

BPA也广泛应用于高分子无源医疗器械产品中，与血液发生接触，而检测一直没有确定的方法，也缺少相关国家标准。鉴于此，本文建立了测定一次性使用静脉留置针中BPA溶出量的高效液相色谱法[1]。

1.仪器与试剂

高压液相色谱（日本岛津，LC-20A）；紫外/可见光分光光度计（日本岛津，UV2450）；分析天平，精度0.1mg，北京赛多利斯仪器有限公司；液体比重天平，P-5，上海精科有限公司；旋转蒸发仪，X-80A，上海青浦仪器有限公司；恒温水浴锅，DK-98-1，天津泰斯特仪器有限公司；纯水/超纯水系统，Merck Millipore有限公司。

无水乙醇（成都科隆化学试剂公司，AR），甲醇（国药化学试剂公司，色谱纯），玻璃容量瓶、锥形瓶和量筒若干。

国产一次性使用静脉留置针（批号：20160511 08）。

2.方法

2.1 色谱条件

色谱柱：Inertsil®ODS-SP，5µm，4.6mm×250mm；流动相：水：甲醇=30:70；流速：1.0ml/min；柱温：40˚C；进样量：20µL。

2.2 浸提液的制备

用95%乙醇和超纯水，通过液体比重天平测定并配制500mL密度为（0.9373～0.9378）g/mL的乙醇水混合液作为浸提液，经0.45μm滤膜后注入液相色谱仪。

图1. BPA的吸收光谱

图2. BPA 的HPLC保留时间

2.3 方法学验证

2.3.1 BPA特征吸收波长的选择

精密称取BPA标准品0.0250g，用甲醇稀释至100mL，得到浓度为0.25 mg/mL的标准储备液。取标准储备液，用甲醇稀释5倍，得到0.05mg/mL的标准工作溶液，用紫外/可见分光光度计[2]在200nm～500nm范围内进行扫描，根据吸收光谱曲线确定HPLC检测波长（n）280nm，见图1。

2.3.2 保留时间的选择

取BPA标准储备液，用甲醇稀释得到一定浓度的标准工作溶液，取50µg/mL BPA标准工作溶液在2.1色谱条件下进样测量，得到BPA的出峰保留时间t为5.956，图2。

2.3.3 标准曲线绘制

取BPA标准储备液用甲醇逐级稀释，得到1.0、2.5、5.0、10.0、25.0、50.0µg/ml浓度的标准溶液，按照2.1中色谱条件进样测定，得到各浓度的峰面积值。以峰面积值（Y）为纵坐标，BPA浓度（X ）为横坐标，绘制BPA标准曲线，见表1，得到线性回归方程Y=16689.8X-1182.97，R2=0.9998912。

2.3.4 灵敏度试验

将双酚A对照品溶液用甲醇不断稀释，检测，直至信噪比为约3时得到仪器的检测限。结果表明，本方法的检测限为0.211μg/mL。

2.3.5 精密度试验

取 BPA标准工作溶液1.0、2.5、5.0、10.0、25.0、50.0µg/mL，按照2.1色谱条件进样测定，每种浓度样品连续进样测定5次，得到其峰面积，计算变异系数RSD为1.67%，进行测量值的精确度表征，考察结果重复性。

2.3.6 回收率试验

表1. BPA标准溶液对应浓度值及标准曲线BPA标准品浓度(µg/mL) 峰面积(μV·s) 1.0 15207 2.5 40750 5.0 77693 10.0 171449 25.0 415312 50.0 832990

表2. BPA的加标回收率结果加标对照液浓度(µg/mL) 测得加标对照液浓度(µg/mL) 平均回收率 RSD 1.1371.0113.4% 0.59% 1.138 1.126 4.909 5.0 98.4% 0.41% 4.911 4.945 25.74 25.0 102.6% 0.61% 25.739 25.468

精密取3份供试液分别置于25mL容量瓶中，加入250μg/mL双酚A母液100μL、500μL、2500μL，用供试液定容至刻度，得到浓度为1.0μg/mL、5.0μg/mL、25.0μg/mL的加标样品，将供试液规定进行处理，对每个回收样品进行检测，见表2，计算其回收率（%）为98.4%～113.4%，变异系数（RSD）为0.41%～0.59%。

2.4 供试液的制备及测定

取留置针去除封管夹和护套，将各部件拆散（延长管和导管剪碎）后，放入空白试液中（1支留置针用100mL浸提液进行浸提），分别放置在37˚C恒温箱中浸提1h和24h，然后收集全部浸提液进行试验。

取一定体积的浸提液在50˚C下真空干燥，干燥完全后，冷却至室温，然后加入等体积的甲醇，漩涡溶解1min，得到检验液，检验液经0.45μm滤膜后注入液相色谱仪，结果见表3，溶出浓度24h明显大于1h。

表3. 样品检测结果样品名称 浸提时间 供试液浓度(mg/L)一次性使用静脉留置针 1h 0.211 24h 0.378

3.结论

在我国的医疗器械分类监管中，国家和行业标准中并没有针对BPA溶出指标的限量要求和统一方法。因此，为更好地保护患者的身体健康，应尽可能地在相关产品标准上体现这一点。

[1] 叶美君.紫外分光光度法测定环氧树脂中的微量双酚A [J].化学世界,2001,19(2):15-18.

[2] 任雯晴,贾大兵.紫外分光光度法测定塑料制品中双酚A [J].吉林化工学院学报,2007,11(2):27-30.

Determination of BPA Released from Vein Detained Needle for Single Use by HPLC

TANG Zhi HUANG Min-ju DANG Xi-yun Guangdong Medical Device Quality Surveillance and Test Institute (Guangdong Guangzhou 510663)

An effective test method of HPLC for the tests of dissolving-out amounts of BPA in vein detained needle was established. The correlation coeffcient of the linear equation were 0.999; the average recovery rate was 98.4%～113.4%. The method is simple, rapid and accurate, in order to give the experimental foundation for establishing the test standard of the BPA release of medical instrument.

HPLC, vein detained needle, BPA

1006-6586(2017)14-0016-03

TQ320.7

A

2017-06-27