雷帕霉素对缺血再灌注大鼠肾小管上皮细胞凋亡的抑制作用

郑传东,苟 欣,胡兴平,张 力,邓 林

（1.四川省成都市第五人民医院泌尿外科 611130；2.重庆医科大学附属第一医院泌尿外科 400016）

雷帕霉素（rapamycin,RPM）又名西罗莫司是20世纪70年代初,由加拿大Ayerst研究所从放线菌培养液中分离出来的大环内酯类抗生素。近年来研究证明它是一种强有力的免疫抑制剂,其免疫作用较环孢素A强100倍左右,并已广泛应用于肾移植中。肾缺血再灌注损伤是导致急性肾小管坏死和肾移植失败的重要因素。越来越多的研究表明,肾缺血再灌注损伤引起的细胞凋亡是缺血再灌注致肾损害的重要环节之一[1]。因此,抑制细胞凋亡的发生对肾缺血再灌注损伤的防治具有重要的临床意义。有资料表明RPM能抑制细胞凋亡的发生。Fas和Bcl-2（B-cell lymphoma-2）是重要的凋亡相关基因[1]。本研究通过复制大鼠肾缺血再灌注损伤模型,研究RPM对大鼠缺血再灌注肾Fas、Bcl-2蛋白表达的影响以及对再灌注24h的肾组织超微结构的影响,探讨RPM对肾缺血再灌注的保护作用及其机制。

1 材料与方法

1.1 主要试验药物与试剂 RPM由中国华北制药集团新药研究开发有限责任公司提供,批准文号：2002HL0259,口服液,规格1mg/mL。兔多抗Fas由北京博奥森生物技术有限公司提供,兔多抗Bcl-2、即用型SABC法免疫组化试剂盒SA1022、二氨基联苯胺（DAB）显色液均由武汉博士德生物工程有限公司提供。

1.2 试验动物与分组 54只Wistar雄性大鼠,体质量200～250g,由重庆医科大学实验动物中心提供。随机分成假手术组（sham）、手术组（IR）和药物组（RPM+IR）。手术组和药物组又按缺血再灌注时间分为再灌注后0、24、48、72h等4个观察时间点,每个观察时间点6只。……