乌司他丁对乳腺癌细胞迁移、黏附、侵袭能力的影响及机制*

张 超，孙治君

(重庆医科大学附属第二医院甲状腺乳腺外科 400010)

乳腺癌已成为女性最常见的恶性肿瘤之一，尤其是在出现远处转移后，患者的平均生存时间仅为18～30个月。防止转移的发生成为治疗乳腺癌的重点。 而在临床中，雌激素受体阴性/阳性(ER-/+)乳腺癌的治疗、预后有较大差异。乌司他丁(UTI)是一种酶抑制剂，有广泛的酶抑制作用，近年相关研究显示UTI具备抑制肿瘤细胞增殖、转移，促进凋亡的能力；而肿瘤转移、侵袭的三大基本步骤是迁移、黏附并对基质的降解，三个方面相互依存、相互促进缺一不可。在乳腺组织中，中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase，NE)是惟一能降解基底膜中弹性蛋白的酶，蛋白激酶B(protein kinase B，Akt)的过表达对肿瘤的发生、发展方面存在重要影响，整合素β1(Integrinβ1)的表达能促进肿瘤细胞与基质的黏附结合，因此上述三者可能在乳腺癌的转移、侵袭中发挥重要作用。为了研究证实UTI是否对乳腺癌的迁移、黏附、侵袭有抑制作用以及其机制是否与Akt、NE和Integrinβ1有关，本实验将观察UTI对乳腺癌细胞迁移、黏附、侵袭能力的影响，以及对Akt和Integrinβ1的表达及NE在细胞上清液中水平的影响。

1 材料与方法

1.1材料及试剂 乳腺癌MDA-MB-231(ER-)及MCF-7(ER+)细胞系均由重庆医科大学附属第一医院惠赠。Akt购自美国Bioworld Technolgy公司，Integrin beta1兔抗人单克隆抗体购自美国Santa(圣克鲁斯)公司，NE ELISA试剂盒购自大连宝生物工程有限公司。辣根过氧化物酶(HRP)标记山羊抗兔lgG抗体购自武汉博士德生物工程有限公司。UTI购自广东天普生化医药股份有限公司，多西紫杉醇(TXT)购自杭州赛诺菲安万特民生制药公司，药物分别配成100×血浆峰浓度(peak plasma concertration，PPC)备用。……