刘青梅 韩 辅 (长春中医药大学附属医院,吉林 长春 130021)
溃疡性结肠炎(UC)的发病目前认为主要与遗传、免疫、环境等因素的相互作用有关。细胞因子在UC发病中发挥重要作用。目前认为减少一氧化氮(NO)产生,抑制诱导型NO合成酶(iNOS)表达可能是治疗UC的有效靶点之一。本实验主要观察中药肠康颗粒对UC大鼠NO水平及NOS活力的影响,从而进一步验证该药疗效,探讨其治疗UC的机制。
1.1 材料
1.1.1 实验动物 采用Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重(200±20)g,由吉林大学医学实验动物中心提供。
1.1.2 实验药品 肠康颗粒由干姜、白术、桂枝、茯苓、肉豆蔻、乌梅、五味子等组成,由长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心药物制剂研究室加工;柳氮磺吡啶(上海信谊嘉华药业有限公司生产,批号H31020557);5%三硝基苯磺酸(TNBS)水溶液购自Sigma公司;乙醇为国产分析纯。
1.1.3 主要试剂 NO试剂盒、NOS试剂盒(南京建成生物工程研究所生产);双蒸水(吉林大学基础医学院自制)。
1.2 方法
1.2.1 动物分组 60只大鼠适应性喂养7 d后,随机分为乙醇对照组、模型组、肠康颗粒低、中、高剂量组,柳氮磺吡啶(SASP)组,每组10只。乙醇对照组以50%乙醇0.25 ml灌肠;其余5组以100 mg/kg TNBS加50%乙醇0.25 ml混合试剂灌肠。
1.2.2 模型制备 所有动物禁食48 h后,乙醚麻醉,取12 cm聚丙烯管(直径2 mm),剪侧孔数处,并由肛门插入结肠8 cm达结肠部位,快速注入药液后,捏紧肛门,提取大鼠尾巴保持倒立1 min,以防注入液倒流,待麻醉清醒后正常喂养。
1.2.3 给药方法 肠康颗粒低、中、高剂量组分别按生药11、22、44 g/kg剂量,用无菌蒸馏水调制成溶液灌胃(正常人用量换算成大鼠剂量的5、10及20倍);SASP组按0.5 g/kg剂量,用无菌蒸馏水调制成溶液灌胃,灌胃体积均为10 ml/kg;乙醇对照组及模型组灌服等体积生理盐水。……