玉簪花中一个新的神经鞘苷

解红霞，薛培凤

（1.内蒙古医科大学附属医院药剂部，内蒙古 呼和浩特 010059； 2.内蒙古医科大学药学院，内蒙古 呼和浩特 010110)

玉簪花为百合科植物玉簪 Hosta plantaginea(Lam.)Aschers的花，又名内消花、白鹤花等，为多年生草本植物，是常用蒙药之一，具有清热、解毒、止咳、利咽喉之功效，主治咽喉肿痛、音哑、肺热、毒热[1]。药理作用研究表明，其醇提物具有镇痛作用[2]，乙酸乙酯萃取部位有较强的抗菌作用[3]，玉簪全草中的生物碱可抑制烟草花叶病毒、乙酰胆碱酯酶活性[4]。研究表明，其化学成分主要为黄酮和甾体皂苷两大类，包括甾体皂苷元及甾体皂苷[5]，黄酮苷类均为山柰酚苷，还有生物碱类和少量脂肪酸类[6-7]。但目前尚未见有其所含神经酰胺类化合物的报道。

1 仪器与材料

RE52CS型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）；SHZ-Ⅲ型循环水式多用真空泵（河南郑州长城科工贸有限公司）。乙醚、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、氯仿、无水硫酸钠等，所用试剂均为分析纯(天津威晨试剂厂)；试验用水为高纯水。薄层硅胶GF254、柱层硅胶（100～200目，200～300目，青岛海洋化工集团公司)；Sephadex LH-20（北京慧德易公司）。玉簪花新鲜药材（10 kg），于2007年8月购于内蒙古药材公司，经内蒙古医学院药学院生药教研室庞秀生教授鉴定为玉簪 Hosta.plantaginea(Lam.)Aschers的花。

2 方法与结果

2.1 提取与分离

取玉簪花药材9 kg，用8倍量体积分数为95%的乙醇渗漉提取3次，过滤，合并提取液，减压浓缩成浸膏。药渣再用体积分数为50%的乙醇渗漉提取3次，合并提取液回收溶剂，减压浓缩成浸膏。浸膏加适量水悬浮，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取。95%提取物共得石油醚萃取物191 g，乙酸乙酯萃取物261 g，正丁醇萃取物56 g。其中乙酸乙酯萃取物Ⅲ（261 g）经硅胶柱色谱分离，以氯仿 -甲醇（20∶1～1∶1）梯度洗脱。每100 mL为 1流份，共收集140份，经薄层色谱检识，合并相同流份，合并为40份（Fr1-40）。其中 Fr.3-8经硅胶柱得到的其他流份，再经Sephadex LH-20柱色谱，氯仿 -甲醇（1∶1）洗脱，得该化合物(50 mg)。

2.2 结构鉴定

化合物为白色无定型粉末（甲醇），熔点（mp）206～209℃，5%香草醛-硫酸乙醇溶液喷雾显色显粉红色斑点。

ESI-MS：m/z 736[M+Na]+，相对分子质量为 713。1H-NMR(C5D5N，300 MHz)中 δ8.38（1 H，d，J＝8.7 Hz，NH）和13C-NMR(C5D5N，75 MHz)中 δ175.7 羰基碳信号表明，分子中存在酰胺片断 -CO-NH。DEPT 谱 δ78.4，78.3，75.0，72.4，72.2，71.4，70.0表明，分子中存在6个连氧的 CH2和2个连氧的 CH，这些都是神经鞘胺醇的典型结构特征。

DEPT 谱 δ：132.1 和 131.9，131.0 和 129.9 碳信号，表明分子中有2对取代碳碳双键；1H-NMR谱显示2对烯质子 δ5.48(2 H，brs)和 δ5.93(2 H，t，J＝ 9.0 Hz，14.1 Hz)，氢的偶合常数较大，而且邻双键的碳信号约为32，表明双键为E构型[7]。

1H-NMR 谱有甲基信号 δ0.83(6 H，t，J＝ 6.1 Hz)和强 CH2信号 δ1.24，结合13C-NMR谱的 1个高场信号 δ14.2和长链碳信号 δ29.4～29.9，表明分子中存在着 2条长而无分支的碳链。1H-NMR谱还显示了葡萄糖的端基质子信号 δ4.93(1 H，d，J＝7.5 Hz)，13C-NMR 谱给出 1 个葡萄糖残基的信号 δ105.5，75.0，78.3，71.4，78.4，62.5，可以判断葡萄糖为 β 构型。

从化合物的1H-1H COSY图谱中看到，δ8.35质子信号(N-H)与 δ4.78 质子信号 (H-2)相关，δ4.78 质子信号 (H-2)又与δ5.93 质子信号(H-3)相关，而 δ5.93 质子信号(H-3)和 δ2.12质子信号(H-5)小相关，δ5.48 质子信号(H-7)与 δ 2.00(H-6)相关，同时和 δ2.12质子信号(H-5)有 1个小的相关点，δ2.00(H-9)与δ4.51质子信号(H-10)相关。说明两个双键之间相隔2个碳，从而确定了2个双键的位置和1～12的连接方式。

质谱碎片峰 m/z 696(M-H2O-H)，534(M-glu+H)也验证了以上相对分子质量，355(M-glu-C12H18O)是酰胺键断裂同时失去葡萄糖得到，为长链碱基产生的碎片离子峰，420(M-C21H43+H)是2-OH脂肪酸链的α裂解所得的碎片峰，由此推断出化合物17的结构是主链为21个碳的神经鞘苷类化合物。

13C-NMR谱和1H-NMR谱数据见表1。

根据以上分析及文献[7]确认，化合物被确定为1-O-β-D- 葡萄糖基 -(2S，3E，7E)-2-[(2′R)-2′- 羟基 - 二十一酰胺基]-3（E），（E）- 十二二烯 -1，-二醇，命名为玉簪神经鞘苷 A。结构式见图1。

3 讨论

近年来，国内外玉簪花的化学成分研究报道主要为甾体皂苷类、黄酮类、生物碱类等，新化合物较多，但未见报道有神经酰胺类化合物。本课题组从玉簪花醇提物的乙酸乙酯萃取部位分离得到2个神经酰胺类化合物，其中一个由于分离得到的量少，没有将核磁共振谱做完全，故结构不能完全鉴定；另一个通过波谱鉴定了结构，确定为玉簪神经鞘苷A，经检索为新化合物。

表1 化合物的13C-NMR谱、1H-NMR谱和DEPT谱数据（C5D5N，400 MHz）

图1 玉簪神经鞘苷A的结构式

参考文献：

[1]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(蒙药卷)[M].上海：上海科学技术出版社，2004：142.

[2]解红霞，薛培凤，周 静，等.蒙药玉簪花镇痛作用的实验研究[J].内蒙古医学院学报，2010，32(1)：36-38.

[3]解红霞，薛培凤，张宏桂，等.蒙药玉簪花的体外抑菌活性研究[J].内蒙古医学院学报，2010，32(6)：689-691.

[4]Wang YH，Gao S，Yang FM，et al.Structure elucidation and biomimetic synthesis of hostasinine A，a new benzylphenethylamine alkaloid from Hosta plantaginea[J].Org Lett，2007，9(25)：2 792-2 811.

[5]薛培凤，张金花，解红霞，等.玉簪属植物化学成分及药理作用研究进展[J].中药材，2011，34(4)：647-651.

[6]解红霞，张金花，张宏桂，等.蒙药玉簪花的化学成分研究[J].中国药学杂志，2009，44(10)：733-735.

[7]Wang YH，Zhang ZK，Yang FM，et al.Benzylphenethyl amine alkaloids from Hosta plantaginea with inhibitory activity activity against tobaccomosaic virus and acetylcholineste rase[J].J Nat Prod，2007，70(9)：1 458-1 461.