吉非替尼联合自体DC/CIK细胞治疗对晚期非小细胞肺癌临床研究

琚芳芳，李宝平，张雷，薛利利山西医科大学第二医院肿瘤生物治疗科，山西太原　030001



吉非替尼联合自体DC/CIK细胞治疗对晚期非小细胞肺癌临床研究

琚芳芳，李宝平，张雷，薛利利
山西医科大学第二医院肿瘤生物治疗科，山西太原030001

［摘要］目的探讨靶向治疗吉非替尼联合自体树突状细胞（DC）/细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）细胞回输治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者的TGF-β1、免疫功能、安全性及疗效的影响。方法随机选取2013年7月—2015年1月于该院接受治疗的100例晚期非小细胞肺癌患者，采用随机数字表法随机分为治疗组和对照组各50例。对照组单纯采用口服吉非替尼250 mg/d靶向治疗，治疗组在此基础上给予至少3次DC/CIK细胞输注。随访时间为12个月，对比观察两组以下指标：血清TGF-β1、外周血淋巴细胞表型、不良反应、总生存期（OS）和中位生存期（mOS）。结果血清TGF-β1：两组治疗后血清TGF-β1水平均较治疗前下降（P＜0.05），治疗组下降较对照组明显（P＜0.05）。外周血淋巴细胞表型：经过治疗，治疗组外周血CD 3+、CD 4+、CD 8+和CD 4+/ CD 8+对对照组相较有明显差异，两组差异有统计学意义（P＜0.05）。不良反应：治疗组接受DC和CIK自体细胞输注后出现发热7例，经相应处理后缓解。两组皮疹和腹泻发生率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗组OS为9.1～18.1（12.1±3.4）个月，mOS为11.9个月，对照组分别为7.4～11.5（9.6±1.2）和9.5个月，两组相较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论在吉非替尼靶向治疗基础上联合自体DC/CIK细胞回输治疗晚期NSCLC，可以减轻不良反应，改善免疫功能，延长患者生存期，并具有较好的安全性。

［关键词］非小细胞肺癌；吉非替尼；树突状细胞；细胞因子诱导杀伤细胞

肺癌已成为我国恶性肿瘤发病率及死亡率均排第1位的恶性肿瘤［1］，其中非小细胞肺癌（NSCLC）患者占所有肺癌患者的80％，约有80％的非小细胞肺癌患者在确诊时已为晚期，失去手术治疗机会，且对化疗耐受性较差。目前靶向治疗已认为是治疗晚期NSCLC的主流方案，疗效广受好评。吉非替尼作为选择性的表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂，广泛适用于经化疗后或局部晚期或转移性NSCLC。据相关报道，吉非替尼对于晚期NSCLC有效缓解率接近20％，疾病控制率（DCR）为42％～54％。另外近年来，基于DC（树突状细胞）和CIK（细胞因子诱导杀伤细胞）的细胞免疫疗法开始应用于NSCLC治疗，其效果日益受到肯定。基于此，本文从联合用药角度着眼，随机选取2013年7月—2015 年1月收治的100例晚期非小细胞肺癌患者作为研究对象，探讨常规化疗药物吉非替尼联合DC、CIK对NSCLC临床效果、免疫功能及安全性的影响，现报道如下。

1　资料与方法

1.1一般资料

随机选取于山西医科大学第二医院肿瘤生物治疗科就诊的100例初治的晚期非小细胞肺癌患者，均经电子支气管镜下活检或CT引导下穿刺活检明确诊断。其中8例接受基因检测，纳入标准：①KPS评分＞60分；②可预计生存期≥6个月；③有可测量的病灶存在；④肝肾功能、血常规检查正常；⑤全部患者及家属知情同意，且经伦理委员会批准通过，排除有化疗禁忌症、严重心、脑疾病及精神疾病患者等。随机数字对照法分为治疗组和对照组各50例，其中治疗组男性26例，女性24例；年龄62～85岁，平均（68.4±3.4）岁；病理类型：鳞癌21例，腺癌19例，其他10例。TNM分期：5例患者为III B期患者，其余35例患者均为IV期患者；对照组男性25例，女性25例；年龄63～86岁，平均（67.4±3.5）岁；病理类型：鳞癌21例，腺癌20例，其他9例。TNM分期：5例患者为III B期患者，其余34例患者均为IV期患者。

1.2治疗方法

2组治疗前均给予血常规、肝肾功能及合并症等进行检查，对相应的合并症进行针对性干预治疗。2组均给予吉非替尼（批准文号：国药准字：J20100014，规格：0.25 g×10片），口服治疗，250 mg /次，1次/d。治疗期间密切观察病情变化。治疗组在此基础上配合细胞免疫疗法巩固治疗，包括DC（树突状细胞）和CIK（细胞因子诱导杀伤细胞），具体操作是先采集患者外周单核细胞，分离后置于培养瓶，适量加入细胞因子刺激液活化增殖，经1～2周的培养后回输。28 d为1个疗程。DC细胞注射液中DC细胞数＞2.0×107/mL，于采血后第8、9、10、11、12、13、14、15 d（机采细胞为第1天），在淋巴结富集区10 cm范围内的腋窝或腹股沟皮内注射。CIK细胞数＞1×109/mL，于采血后第12、13、14、15天通过肘静脉回输，60滴/min。

1.3评价指标

治疗组治疗3个周期就，随访比较治疗前后血清TGF-β1、不良反应、总生存期及中位生存期（mOS）。其中总生存期（OS）指病情确诊至死亡或随访结束期。

1.4统计方法

该研究采集的数据一律纳入SPSS 16.0统计学软件进行整理和分析，涉及定量数据的采用均数±标准差（±s）表示，组间对比行t检验；计数资料采取部分比表示，进行Χ2检验。

2　结果

2.1两组治疗前后血清TGF-β1水平

两组治疗后血清TGF-β1水平均较治疗前下降，差异有统计学意义（P＜0.05），治疗组下降更明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1　两组治疗前后血清TGF-β1比较［μg/L，（±s）］

表1　两组治疗前后血清TGF-β1比较［μg/L，（±s）］

注：与同组治疗前相比，*P＜0.05；与对照组同期相比，#P＜0.05。

组别TGF-β1治疗组（n=50）治疗前治疗后对照组（n=50）治疗前治疗后87.08±1.98 （28.98±2.05）*#89.23±4.02 （65.43±1.67）*

2.2两组治疗前后外周血CD 3+、CD 4+、CD 8+和CD 4+/CD 8+

对照组治疗后外周血CD 3+、CD4+、CD 8+和CD 4+/ CD 8+均较治疗前下降，差异有统计学意义（P＜0.05），治疗组后上述指标无明显变化；治疗组治疗后上述指标均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2　两组治疗前后外周血CD 3+、CD 4+、CD 8+和CD 4+/ CD 8+比较［％，（±s）］

表2　两组治疗前后外周血CD 3+、CD 4+、CD 8+和CD 4+/ CD 8+比较［％，（±s）］

注：与同组治疗前相比，*P＜0.05；与对照组同期相比，#P＜0.05。

组别CD3+CD4+CD8+　CD4+/CD8+治疗组（n=50）治疗前治疗后对照组（n=50）治疗前治疗后55.34±2.89 （57.61±3.91）#34.29±5.87 （29.26±5.43）#27.73±3.87 （23.87±4.21）#1.65±0.78 （2.34±0.52）#56.23±6.74 （34.68±3.15）*34.72±6.34 （26.65±1.32）*25.67±3.98 21.67±2.75 2.19±0.83 （1.59±0.34）*

2.3不良反应

治疗组出现皮疹11例（22％）、腹泻4例（8％），对照组皮疹20例（40％）、腹泻8例（16％），两组皮疹和腹泻发生率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗组接受DC皮内注射时有5例出现低热，体温可自行降至正常；在自体DC+CIK回输后有7例出现发热，其中超过38℃有3例，给予地塞米松5 mg对症处理后症状缓解。

2.4生存期

两组全部完成治疗及随访，截至末次随访2013年6月1日，两组未出现因DC /CIK细胞回输及服用吉非替尼治疗死亡病例和严重并发症，治疗组OS为9.1～18.1（12.1±3.4）个月，mOS为11.9个月，对照组分别为7.4～11.5（9.6±1.2）和9.5个月。

3　讨论

肿瘤治疗，在数十年间经历了手术、放疗、化疗、靶向治疗，到免疫治疗这几个发展阶段。目前研究证实，约50％的晚期非小细胞肺癌患者在初诊时年龄已在65岁以上［2］，老年患者在化疗、放疗过程中很难从中获益，且不良反应多。靶向治疗中吉非替尼是一种表皮生长因子受体的小分子酪氨酸激酶抑制剂药物（epidermal growth factor receptor- tyrosine kinase inhibitor，EGFRTKI），临床上可单独运用于经化疗后病情继续恶化的晚期非小细胞肺癌患者。吉非替尼还具有给药方便、肝脏代谢、不经过肾脏代谢、不良反应轻微等优势，但是也具有易产生耐药、不能延长生存期等不足［3-4］。肿瘤免疫治疗可分为细胞治疗和PD-1等免疫抑制剂等方法，细胞治疗运用最为成熟的就是DC细胞和CIK细胞。DC细胞是功能强大的抗原呈递细胞，在肿瘤免疫的产生和调节中起到关键作用［5］。DC结合T细胞可大量分泌IL-12、IL-18激活T细胞增殖，诱导CTL应答，从而清除肿瘤，增强NK细胞毒作用。另外，DC还有助于加速CD8+T细胞活化，间接分泌细胞因子或直接杀伤，增强机体抗肿瘤免疫应答。而CIK细胞是一种高效活性细胞，是恶性肿瘤过继免疫治疗的重要手段之一。细胞治疗可以调控宿主和肿瘤之间的相互作用，改善肿瘤微环境，清除肿瘤微小病灶，从而达到提高患者生存治疗，延长生存期［6］。此外研究发现［7-8］，CIK细胞对逆转非替尼耐药也有一定的效果。该研究显示，观察组由治疗前的（87.08±1.98）μg/L，明显降至治疗后的（28.98± 2.05）μg/L，接近正常参考值，而对照组改善幅度明显要小于观察组（P＜0.05），说明吉非替尼联合DC /CIK对抑制肿瘤活性的效果强于单纯吉非替尼用药。从该文另外一项数据来看，治疗组治疗前后CD 3+、CD 4+、CD 8+和CD 4+/CD 8+未出现明显的变化流式细胞仪检测治疗后T淋巴细胞亚群水平低于正常人群，与文献报道一致，说明吉非替尼联合DC /CIK并未引起免疫反应，虽然CD 8+前后有较大的下降，但差异无统计学意义，说明联合疗法对促进抗肿瘤免疫恢复有积极的效果。随访发现两组治疗后均未出现严重的不良后果，不过治疗组不良反应相比少于对照组，且中位生存期较对照组有所延长，以上说明细胞免疫疗法联合靶向治疗的思路对于晚期NSCLC在延长生存期有着积极的效果，值得肯定。

综上，对于晚期NSCLC患者，可使用靶向药物吉非替尼联合肿瘤细胞治疗，不仅改善机体免疫功能，还起到延长患者生存期的作用，具有很好的安全性及耐受性。

［参考文献］

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［4］Watanabe S，Tanaka J，Ota T，et al. Clinical responses to EGFR -tyrosine kinase inhibitor retreatment in non -small cell lung cancer patients who benefited from prior effective gefitinib therapy：a retrospective analysis［J］. BMC Cancer，2011，11：1.

［5］苏琼，高亚杰，王琳，等.吉非替尼联合鸦胆子油乳针对非小细胞肺癌脑转移患者的影响［J］.河南中医，2015，35（11）：2734-2735.

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［7］白皓，熊丽纹，韩宝惠，等.吉非替尼与厄洛替尼治疗非小细胞肺癌脑转移的临床观察［J］.临床肿瘤学杂志，2015，21 （11）：1028-1031.

［>8］汪海岩，张德芳.吉非替尼与厄洛替尼二线治疗晚期非小细胞肺癌的对比研究［J］.实用医学杂志，2012，28（20）：3444-3446.

Clinical Research on Gefitinib Combined with Autologous DC/CIK Cells in Treatment of Advanced Non-small Cell Lung Cancer

JU Fang-fang，LI Bao-ping，ZHANG lei，XUE Li-li
Department of Tumor Biotherapy，The Second Hospital of Shanxi Medical University，Taiyuan，Shanxi Province，030001 China

［Abstract］Objective To discuss the effect of molecular targeted therapy of gefitinib combined with autologous dendritic cells /cytokine induced kill cell adoptive therapy for patients with advanced non-small cell lung cancer on their TGF-β1，immunologic function and safety. Methods 100 cases of patients with advanced non-small cell lung cancer treated in our hospital from July 2013 to January 2015 were selected and randomly divided into two groups with 50 cases in each，the control group received molecular targeted therapy of oral administration of 250 mg/d gefitinib，the treatment group were given DC/CIK cell infusion at least 3 times on this basis，and the follow-up time was 12 months，and the serum TGF-β1，peripheral blood lymphocyte phenotype，adverse reaction，overall survival and median survival time of the two groups were compared and observed. Results The serum TGF-β1levels after treatment of the two groups decreased compared with those before treatment（P＜0.05），and the decrease of the treatment group was more obvious than that of the control group（P＜0.05），after treatment，there were obvious differences in the peripheral blood CD 3+，CD 4+，CD 8+ and CD 4+/ CD 8+ between the two groups with statistical significance（P＜0.05）. Conclusion After autologous DC/CIK cell infusion，the treatment group relived after the corresponding treatment，and the differences in the incidence rates of rash and diarrhea between the two groups had statistical significance by comparison（P＜0.05），and the differences in the OS and mOS between the treatment group and the control group had statistical significance［9.1-18.1（12.1±3.4），11.9 months，vs 7.4-11.5（9.6±1.2），9.5 months］（P＜0.05）. Molecular targeted therapy of gefitinib combined with autologous DC/CIK cell infusion in treatment of advanced non-small cell lung cancer can relieve the adverse reactions，improve the immunologic function，prolong the survival time of patients and has good safety.

［Key words］Non-small cell lung cancer；Gefitinib；Dendritic cell；Cytokine induced killer cell

［中图分类号］R5

［文献标识码］A

［文章编号］1674-0742（2016）05（b）-0061-03

DOI：10.16662/j.cnki.1674-0742.2016.14.061

［作者简介］琚芳芳（1986.2-），女，山西临汾人，硕士研究生，研究方向：恶性肿瘤的综合生物治疗。

收稿日期：（2016-02-19）